生物化学复习总结之呼吸链.

呼吸链（电子传递链）电子传递（electrontransfer):底物脱下的氢和电子经过系列载体的序列氧化还原反应，最终把电子和氢质子传递给受体的过程，称之为电子传递。电子传递链（electrontransferchain):由一系列递氢体和递电子体组成的氧化还原反应链，称之为电子传递链。参与底物氧化的电子传递链也叫做呼吸链（respirationchain)。递氢体：电子传递链中同时参与传递H＋与电子的辅酶或辅基。递电子体：电子传递链中参与传递电子的辅酶或辅基。NAD+及与NAD+偶联的脱氢酶NAD+是一种流动的电子传递体。黄素及与黄素偶联的脱氢酶辅酶Q属于一种流动的电子传递体。铁硫蛋白细胞色素细胞色素c是一种流动的电子传递体氧气呼吸链的组成及其作用机制吡啶核苷酸与吡啶核苷酸型脱氢酶吡啶核苷酸型脱氢酶，属脱氢酶类，包括脱氢酶复合物，但它们的辅酶大多相同，主要有两种：NAD+（CoI):NicotinamideAdenineDinucleotideNADP+(CoII):NicotinamideAdenineDinucleotidePhosphate分子中起递氢作用的是烟酰胺，能反复氧化和还原，起到接受氢和提供氢的作用而传递氢。根据NAD(P)+的光谱变化进行测定呼吸链的组成及其作用机制黄素脱氢酶类•是一类不需氧的含黄素的脱氢酶；•种类多，酶蛋白不同，辅基有两种：黄素单核苷酸（FlavinMononucleotide，FMN)；黄素腺嘌呤二核苷酸（FlavinAdenineDinucleotide,FAD)•此类酶催化由NADH分子上脱氢（NADH脱氢酶，酶蛋白称为FP1），生成FMNH2，或催化由琥珀酸分子上脱氢（琥珀酸脱氢酶，酶蛋白称为FP2）生成FADH2。呼吸链的组成及其作用机制铁-硫中心（Iron-sulfurCenters,铁硫蛋白)铁硫中心（Fe-S）：铁硫蛋白中铁与无机硫原子(Fe与S等量)和/或蛋白质中Cys残基的硫原子相连所形成的活性基团。铁硫中心的结构：最简单的是单铁原子与4个Cys的-SH相连；更复杂的是有2个或4个铁原子。Rieske铁硫蛋白则为1个铁原子与两个His残基相连。蛋白含有的铁是非血红素铁,它借铁的价态变进行电子传递，氧化型与还原型的的颜色不同，Fe3+为红、绿，而Fe2+为无色.注意：铁硫蛋白在电子传递链中，虽然起到传电子的作用，但这不是传递链中一个单独的组分，往往是与其它组分结合在一起共同起传递电子的作用。辅酶Q（CoenzymeQ，CoQ）脂溶性醌类化合物，有一个长的异戊二烯侧链，因广泛存在得名，又称泛醌(Ubiquinone)。位于线粒体内膜。辅酶Q为电子和质子载体。CoQ在呼吸链中接受脱氢酶传递过来的H，本身被还原为氢醌，再把电子传递给Cyt体系而被氧化，接受1e变为半醌自由基，接受2e变为氢醌(QH2)。CoQ不仅接受NADH脱氢酶的H，还接受线粒体内其它脱氢酶的H，如琥珀酸脱氢酶，脂酰CoA脱氢酶及其它黄素脱氢酶脱下的H，在电子传递链中处于中心地位。细胞色素（cytochromes）•结构：细胞色素是一类色蛋白，以血红素为辅基•功能：在电子传递链中起传递电子的作用;通过血红素中Fe原子的价态变化传递电子（血红蛋白与肌红蛋白的血红素不发生价态变化）•血红素结构是划分细胞色素的依据a,a3,b,c,c1…..•都是膜结合蛋白，只有Cytc是可溶的细胞色素（cytochromes）•细胞色素都是膜结合蛋白。•不同种类的细胞色素的辅基结构及与蛋白质连接的方式是不同的•不同的血红素有不同的特征吸收谱带；•血红素的氧化态与还原态的光吸收是不同的。CytochromeC•分子量为~13,000；•唯一水溶性的细胞色素；•位于线粒体内膜的外测；•每次接受和传递一个电子电子传递链各组分的排列顺序Theorderoftheelectron-transferringchain从NADH→O2的电子传递顺序：NADH→FP1→4FeS→CoQ→(2FeS)↓Cytb→Cytc1→Cytc↓Cytaa3→O2呼吸链四个复合物的电子和质子流动总图NAD-Q还原酶琥珀酸-Q还原酶细胞色素还原酶细胞色素氧化酶电子传递链中的复合体•复合体Ⅰ：NADH脱氢酶复合体也称NADH:泛醌氧化还原酶，是一个大的酶复合物，由42条不同的多肽链组成，包括含FMN黄素蛋白和至少6个铁硫中心。高分辨率电子显微镜显示复合物Ⅰ为L形，L的一个臂在膜内，另一臂伸展到基质中。复合体Ⅰ：NADH脱氢酶复合体复合物Ⅰ催化两个同时发生的偶联过程：（1）NADH+H++QNAD++QH2（2）4个质子由基质转到内膜外因此，复合物Ⅰ是由电子转移能所驱动的质子泵，结果内膜基质面变负，内膜外侧变正。复合物Ⅱ：琥珀酸到泛醌也称琥珀酸脱氢酶，是TCA循环中唯一的一个线粒体内膜结合的酶，虽比复合物Ⅰ小而简单，但含有两类辅基和至少4种不同的蛋白，1个蛋白与FAD及有4个铁原子的Fe-S中心共价结合；1个铁硫蛋白。电子由琥珀酸流向FAD，然后通过Fe-S中心到泛醌。复合物Ⅱ：琥珀酸到泛醌呼吸链上还有其他底物的电子流经Q，但不经过复合物II：–脂酰CoA脱氢酶–3-磷酸甘油脱氢酶往往将这些由FAD作为辅基的脱氢酶统称为琥珀酸脱氢酶类。复合物Ⅲ：泛醌到Cytc（细胞色素bc1复合物或CoQ:Cytc氧化还原酶）又称细胞色素bc1复合物，或泛醌：细胞色素c氧化还原酶。作用：偶联催化电子由氢醌到Cytc的转移和质子由膜内基质向膜外空间的运输。复合物Ⅲ：泛醌到Cytc（细胞色素bc1复合物或CoQ:Cytc氧化还原酶）结构：复合物Ⅲ和Ⅳ结构的确定（1995-1998，X-射线晶体学）是线粒体电子转移研究的里程碑。复合物Ⅲ是一个由相同单体组成的二聚体，每个单体含有11个不同的亚基。复合物Ⅳ：细胞色素C到O2•复合物Ⅳ又称细胞色素氧化酶•功能：在呼吸链的最后一步，把Cytc的电子转移给O2，使其还原生成H2O。•结构：Thecomplexhasalargemolecule（分子）(MW204kD)andconsistsmorethantensubunits(13);电子传递的顺序为：Cytc-CuA-a-a3-CuB-O2，每4e通过复合物时，酶从基质中消耗4个“底物”H+，生成2H2O，每通过1e，利用氧化还原反应的能量泵出1H+到内膜外空间。底物水平磷酸化(SubstrateLevelPhosphorylation)•底物分子首先因脱氢、脱水等作用形成一种高能中间化合物;•高能中间化合物是由于底物氧化时底物内分子重排形成的；•高能键通过转磷酰基给ADP，转移时有非常大的平衡常数和一个大的ΔGº’负值；•一分子高能中间化合物只能形成一个ATP；•基质水平磷酸化是酵解过程中获取能量的唯一方式。氧化磷酸化（OxidativePhosphorylation)生物氧化过程中，代谢物脱下的氢经呼吸链氧化为水时所释放的能量转移给ADP形成ATP的过程。实际上是氧化作用与氧化作用过程释放的能量用于形成ATP的过程（磷酸化作用）两种作用的偶联反应。ATP必须运输出线粒体ATP离开,ADP进入线粒体-通过一种“转位酶”。ATP离开是有利的，因为细胞液比基质要“+”。然而ATP出去和ADP进入有1个负电荷的净转移——相当于有1个质子进入基质。所以每1个ATP的输出消耗1个H+。1个ATP合成大概需要消耗3H+。于是，合成及加上输出1ATP=4H+磷氧比（P/O）氧化磷酸化的效率可以通过测定P/O值来确定。P/O值是指电子传递过程中，每消耗1摩尔氧原子所生成的ATP的摩尔数。消耗的氧原子数目相当于传递给氧气的电子数的1/2，消耗的无机磷酸等于氧化磷酸化产生的ATP。细胞内的氧化磷酸化是受到严格调控的，调控的手段主要是它与电子传递之间的反馈。确切的说是ADP浓度控制，这种由ADP对氧化磷酸化的调节被称为呼吸控制。代谢物脱下的2H经NADH氧化呼吸链被氧化为水时，生成3ATP（P/O≈3），而经琥珀酸氧化呼吸链氧化为水时，生成2ATP（P/O≈2）。氧化磷酸化的抑制剂抑制类型抑制剂名称作用位点或作用机制呼吸链抑制剂鱼藤酮、安米妥、杀粉菌素萎锈灵抗霉素A氰化物、CO、H2S、叠氮化物复合体I复合体II复合体III复合体IVF1F0-ATP合酶抑制剂Aurovertin寡霉素、venturicidinDCCD抑制F1抑制F0阻止质子通过质子F0通道解偶联剂DNP、FCCP缬氨霉素生热素脂溶性质子载体钾离子载体，破坏电势能质子通道ATP/ADP交换体抑制剂苍术苷、米酵菌酸抑制线粒体基质内的ATP与细胞质内的ADP之间交换