2014年度重点人群扩大治疗地区抗病毒治疗耐药监测方案2014-3-19

2014年度防治工作：重点人群/扩大治疗地区抗病毒治疗耐药监测方案12014年度防治工作：重点人群/扩大治疗地区抗病毒治疗耐药监测方案在卫生计生委艾滋病防治项目的支持下，为支持艾滋病抗病毒治疗可持续性发展，反映艾滋病病毒耐药发生、发展和流行的状况，在参考WHO耐药监测指南的基础上，2014年将开展重点人群/扩大治疗地区抗病毒治疗耐药情况监测。调查目的：了解抗病毒治疗人群中艾滋病病毒耐药株的流行状况及其相关影响因素。调查方法：采用横断面调查方法。调查地区和对象：在已开展抗病毒治疗地区，选择该省份重点人群/扩大治疗地区使用主要抗病毒治疗方案人数多的一个或多个治疗点。被抽样治疗点的艾滋病病人应来自国家艾滋病抗病毒治疗数据库、能够并愿意提供书面（或口头）知情同意书。省市区重点人群治疗现场1.北京北京2.湖南衡阳3.广西南宁4.广西桂林5.四川宜宾6.新疆乌鲁木齐7.云南红河8.贵州贵州9.吉林吉林调查对象的纳入标准：初始一线抗病毒治疗12-15个月的成人。调查对象的排除标准：更换为二线抗病毒药物。从其他治疗点转入的治疗对象。HIV-2或HIV-1/HIV-2感染。临时性治疗者。抽样原则和样本量：考虑到各省份艾滋病病人的人数不同，以及进入治疗队伍的时间也有差异，抽取样本时在地域上“点面结合”，同时覆盖各主要治疗方案及其2014年度防治工作：重点人群/扩大治疗地区抗病毒治疗耐药监测方案2治疗时间等情况。以县或市内治疗点为基本抽样单位，按抗病毒治疗号顺序调查。抽样步骤和方法：2013年初始一线抗病毒治疗者，在调查时抗病毒治疗时间12-15个月的成人：在2014年9月前，按抗病毒治疗号顺序进行连续入组调查对象，对抽样到的全部调查对象进行访谈和血样采集，至少有95％的存活对象接受访谈和血样采集，包括停服抗病毒治疗药物的对象。直到达到要求的样本量100人（该人群必须有合格的采集血样和填写调查表，不包含失访、转诊、拒绝参加、死亡等）。原则上一个门诊点在招募期内完成入组人数；如一个门诊点入组人数在招募期内达不到要求，可以从最相邻近的一个或数个治疗门诊点招募，但各门诊点监测对象抗病毒治疗人群构成、治疗方案和抗病毒治疗管理上相似。调查对象和血样的编码：调查表和血样编号均按艾滋病抗病毒药物治疗数据库中的县区编码加抗病毒治疗号（共13位），血样需注明采样时间（年月日）。操作流程：根据选定的治疗点的治疗病人名单，严格按患者随访窗口期12-15个月，进行流行病学资料调查；同时按操作规范采样，样本运送到指定的CD4检测点，同时进行样本的分装处理，按操作规范要求运送到省CDC进行病毒载量和耐药基因型检测。血样采集、分装、保存和运输：选择含有抗凝剂（EDTA）的真空采血管(10ml)作为血样采集管。将血样编号标记在真空采血管上，并在采样单上注明采样日期和时间。每份样本采集静脉血8－10ml。采集静脉血后，立即轻轻颠倒真空采血管8-10次，使血液与抗凝剂充分混匀，防止血液凝固。每次采集EDTA抗凝全血标本8ml，采集后6小时内分出2份全血标本（每份0.5毫升），其他全血标本离心后分离出血浆（3000r/min离心15min），分3管保存，每只1－1.5毫升和1管淋巴细胞富积液（1毫升）。分离的1份全血标本在24小时之内做CD4检测，除送中国CDC复核和备案的标本以外，其他标本在省级实验室置－70℃冰箱保存备用，如病毒载量和耐药检测等。运送的标本按照国务院“病原微生物实验室生物安全管理条例”和国际传染病物质航空运输的标准，进行三层包装，参见《全国艾滋病检测技术规范（2009年修订版）》。按国家生物标本运输管理要求，在冷冻条件下将标记有抗病毒治疗编号的2支1－1.5毫升血浆和1支1毫升淋巴细胞富集液运送到性艾中心病毒及免疫学2014年度防治工作：重点人群/扩大治疗地区抗病毒治疗耐药监测方案3研究室进行检测复核和备案。数据采集：实验室观测指标：免疫学指标（CD4）；由通过国家质控考核的省或市级实验室集中完成。病毒学指标（VL，病毒载量）；由通过国家质控考核的省或市级实验室完成。耐药性指标（基因型突变）；只检测病毒载量检测限以上的样本（如，病毒载量≥1000拷贝/ml），在WHO认证的耐药检测实验室完成。提供：CD4仪器名称、型号、检测日期及检测结果；病毒载量检测仪器名称和型号、检测限、检测日期、检测结果。现场数据：2014年度重点人群、扩大治疗地区耐药监测补充调查表抽样框内（调查和未调查到的）符合调查要求的所有对象的抗病毒治疗数据库知情同意：每一个符合条件的调查对象将被详细告知本调查的目的、步骤、可能的风险和利益及调查的时间期限。如果参加者不能阅读或不理解知情同意书，建议参加者选一位见证人。实施任何调查之前，必须获得调查对象签署的书面知情同意书。生物安全：由于HIV和其它经血液传播的病原体可以通过接触污染的针头、血液和血制品而传播。在本调查中所有工作人员在血液样品采集、运输和处理的过程中，将参照国家的有关管理要求，采取适当的针对血液的防范措施。所有感染性标本的运输按照国家的有关管理要求操作。质量控制方法：现场调查质量控制：所有现场调查人员均需通过培训，具有参加本项研究的资质；省市疾病预防控制中心的工作人员为质量管理员，督导访谈、知情同意过程、调查表填写、采样和标本处理的工作质量；各省抽取2～5％的调查对象由不同的人员重新调查，进行一致性检验和比较；在采样过程中要注意血样编号与调查对象编号的核对，经核实后填入送样表。样本采集和分装的质量控制：样本采集器皿提前检查存量在有效期内使2014年度防治工作：重点人群/扩大治疗地区抗病毒治疗耐药监测方案4用；采样人员经过培训；核对样本和流调表编号是否一致；样本采集后检查样本状态是否有融血或凝血等异常情况；每份样本冻融次数小于3次。实验室检测的质量控制：要由有上岗证书并有资质的工作人员承担工作；已建立实验室外部质量控制体系；参加过国际或国家级的能力验证；建立室内的质量控制体系：每个检测项目有内部质控品并在每次检测时使用，定期绘制内部质控图和撰写质控报告。附件1.附件1：2014年度防治工作：重点人群/扩大治疗地区抗病毒治疗耐药情况监测知情同意书2.附件2：2014年度重点人群、扩大治疗地区耐药监测一览表3.附件3：2014年度重点人群、扩大治疗地区耐药监测送样表4.附件4：2014年度重点人群、扩大治疗地区耐药监测补充调查表2014年2月7日