第三章 药物的杂质检查

第三章药物的杂质检查本章内容第一节药物的杂质及其来源第二节药物杂质检查方法第三节一般杂质检查第四节特殊杂质检查方法第一节药物的杂质及其来源一、药物的纯度指药物纯净程度，反映了药物质量的优劣，含有杂质是影响药物纯度的主要因素。杂质检查即纯度检查药用纯度即药用规格，是药物中杂质及其最高限量的规定。杂质（impurities）是指：1.有毒副作用的物质2.本身无毒副作用，但影响药物的稳定性和疗效的物质3.本身无毒副作用，也不影响药物的稳定性和疗效，但影响药物的科学管理的物质药物的纯度和化学试剂的纯度1.前者主要从杂质对用药安全、有效性及药物的稳定性的影响方面考虑，后者是从杂质可能引起的化学变化对试剂的使用范围和使用目的的影响来考虑。2.药品只有两个等级：合格或不合格。化学试剂有很多等级，如基准试剂、优级纯（GR）、分析纯（AR）、化学纯（CP）、色谱纯、光谱纯。3.不能用化学试剂的规格代替药品标准，不能将化学试剂当做药品直接用于临床治疗。二、药物中杂质的来源1.生产过程中引入（1）原料、反应中间体及副产物（2）试剂、溶剂、催化剂类（3）生产中所用金属器皿、装置以及其他不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质2.贮藏过程中产生水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、聚合、潮解和发霉等易发生水解反应的结构：酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等易发生氧化反应的结构：醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等例．在药物生产过程中引入杂质的途径为A.原料不纯或部分未反应完全的原料造成B.合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造成C.需加入的各种试剂产生吸附，共沉淀生成混晶等造成D.所用金属器皿及装置等引入杂质E.由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分解引入的杂质第二节药物杂质检查方法杂质限量指药物中允许杂质存在的最大量，通常用百分之几或百万分之几（ppm）来表示。限量检查不测定杂质的含量，只检查杂质是否超过限量的方法。杂质量≤杂质限量＜杂质量药品合格药品不合格药物杂质检查方法1.对照法2.灵敏度法3.比较法对照法限量检查法（LimitTest）方法：取一定量待检查杂质的对照液与一定量供试品液在相同条件处理后，比较反应结果，从而判断供试品中所含杂质是否超限。要求：遵循平行操作原则特点：不需知道杂质的准确含量杂质限量计算供试品量允许杂质存在的最大量杂质限量供试品量标准溶液浓度标准溶液体积杂质限量%100ScVL例1对乙酰氨基酚中硫酸盐的检查：取本品2.0g，加水100ml，加热溶解后，冷却、过滤、取滤液25ml，依法检查，与标准硫酸钾溶液1.0ml（1ml相当于100µg的硫酸根）制成的对照液比较、浊度不得更大。求硫酸盐的限量为多少？例2丙磺舒中检查重金属：取丙磺舒1.0g，依法检查，重金属不得超过百万分之十，应取标准铅液多少ml？（每ml相当于10µg的pb）例3检查氯化钠中砷盐，规定取标准砷液2.0ml（1ml相当于1的As）制备标准砷斑，要求砷含量不得超过0.00004%。问应取供试品多少克。例4磷酸可待因中吗啡检查：取本品0.1g，加盐酸溶液使溶解成5ml，加亚硝酸钠试液2ml，放置15分钟，加氨试液3ml，所显颜色与吗啡溶液【取无水吗啡2.0ml，加盐酸使溶解成100ml】5.0ml，用同一方法制成的对照液比较，不得变深，问限量为多少？示例1：检查某药物中的砷盐，取标准砷溶液2ml（每1ml相当于1g的As）制备标准砷斑，砷盐限量为0.0001％，应取供试品的量为A.0.20gB.2.0gC．0.020gD.1.0gE.0.10gg0.2%100%0001.01012%1006LcVS已知：c＝1g/ml＝1×106g/mlV＝2mlL＝0.0001%示例2：检查维生素C中的重金属时，若取样量为1.0g，要求含重金属不得过百万分之十，问应吸取标准铅溶液（每1ml＝0.01mg的Pb）多少ml？A.0.2mlB.0.4mlC．2mlD.1mlE.20mlml110100.1101066cSLV灵敏度法是以反应的灵敏度来控制杂质的限量。系指在供试品溶液中加入试剂，在一定反应条件下，不得有正反应出现。特点：不需对照品。例：纯化水中氯化物检查，在50ml中纯化水中加入硝酸5滴，及硝酸银试液1ml，要求不得发生浑浊。氯化物的限量就是测定条件下不产生氯化银的浑浊为限。比较法方法：取供试品一定量依法检查，测定待检杂质的吸收度或旋光度等与规定的限量比较，不得更大。特点：准确测定杂质的吸收度或旋光度并与规定限量比较，不需要对照物。例去氧肾上腺素中酮体检查：取本品加水制成每1ml中含2.0mg的溶液，以水为空白，在310nm的波长处测定吸收度，不得大于0.02。第三节一般杂质检查杂质分类1.一般杂质：指自然界分布较广，多数药物生产和贮存过程中容易引入的杂质：如氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、水分、易炭化物、炽灼残渣等。一般杂质其检查方法收载在中国药典的附录中。2.特殊杂质：指某一个或某一类药物的生产或贮藏过程中引入的杂质如阿司匹林中的游离水杨酸、异烟肼中的游离肼、甾体激素中的其他甾体。特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药品的质量标准中。一般杂质检查要求：1.遵循平行操作原则（1）仪器的配对性如纳氏比色管应配对，刻度线高低相差不超过2mm，砷盐检查时导气管长度及孔的大小要一致（2）对照品与供试品的同步操作2.正确的取样及供试品的称量范围（1g不超过±2%，＞1g不超过±1%）3.正确的比色、比浊方法及检查结果不符合规定或在限度边缘时应对供试管和对照管各复查二份氯化物检查法一）检查原理（对照法）利用氯化物在硝酸酸性条件下与硝酸银试液作用，生产氯化银白色浑浊，与一定量标准氯化钠溶液在相同条件下生成氯化银浑浊比较，以判断供试品中氯化物是否超过限量。白色浑浊药物：AgClAgNOCl3HNO3白色浑浊）（对照：AgClAgNO,NaCl3HNO3Vc%100ScVL二）操作方法（药典附录）1.供试液：除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，应滤过；置50ml纳氏比色管中，加水使成约40m1，摇匀，即得供试溶液。2.对照溶液：另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，置50ml纳氏比色管中，加稀硝酸10m1，加水使成40m1，摇匀，即得对照溶液。3.比浊：于供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0m1，用水稀释使成50m1，摇匀，在暗处放置5分钟，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察，比浊。（三）测定条件1.标准NaCl溶液10gCl/ml，50ml溶液中含50～80g的Cl所显浑浊梯度明显，相当于标准NaCl溶液5～8ml。2.反应需在硝酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀硝酸10ml为宜。（1）加速AgCl浑浊的形成；（2）产生较好的乳浊；（3）避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银沉淀的形成。3.试剂：硝酸银4.供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀5.避光、暗处放置5分钟后比浊，因氯化银见光易分解。6.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。7.平行操作原则（四）干扰及排除1.若供试品有色，需经处理后方可检查。（1）内消色法：倍量法，如枸橼酸铁铵中氯化物的检查。（2）外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。2.不溶于水的有机药物（1）加水振摇，过滤，取滤液进行检查。（2）加热使供试品溶解，放冷，过滤，取滤液进行检查。（3）溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后进行检查。3.有机药物中有机氯杂质的检查，具体情况，具体分析。适宜的方法进行有机破坏，使有机氯转化为无机氯后，再依法检查。4.当有其它干扰物质存在时，必需在检查前除去（1）碘中氯化物和溴化物的检查（2）碘化物中氯化物的检查（3）溴化物中氯化物的检查示例.药物中氯化物杂质检查，是使该杂质在酸性溶液中与硝酸银作用生成氯化物浑浊，所用的稀酸是（）A.硫酸B.硝酸C.盐酸D.醋酸E.磷酸√例1.中国药典（2000年版）规定，检查氯化物杂质时，一般取用标准氯化钠溶液（10µgCl－/ml）5～8ml的原因是（）A.使检查反应完全B.药物中含氯化物的量均在此范围C.加速反应D.所产生的浊度梯度明显E.避免干扰√例2.采用硝酸银试液检查氯化物时，加入硝酸使溶液酸化的目的是（）A．加速生成氯化银浑浊反应B．消除某些弱酸盐的干扰C．消除碳酸盐干扰D．消除磷酸盐干扰E．避免氧化银沉淀生成√√√√√例3.当采用比浊法检查氯化物杂质时，若药物本身有颜色而干扰检查的话，应该选用的处理方法为（）A．内消色法B．外消色法C．比色法D．差示比浊法E．差示可见分光法√√例4.若要进行高锰酸钾中氯化物的检查，最佳方法是（）A.加入一定量氯仿提取后测定B.氧瓶燃烧C.倍量法D.加入一定量乙醇E.以上都不对√例5.下列哪些条件为药物中氯化物检查的必要条件（）A.所用比色管需配套B.稀硝酸酸性下(10ml/50ml)C.避光放置5分钟D.用硝酸银标准溶液做对照E.在白色背景下观察√√√硫酸盐检查法检查原理(对照法)利用硫酸盐在盐酸酸性溶液中与氯化钡生成白色浑浊，与一定量标准硫酸钾溶液在相同条件下与氯化钡生成的浑浊比较，以判断药物中硫酸盐是否超过限量。白色浑浊药物：4HCl224BaSOBaClSO白色浑浊）、（对照：4HCl242BaSOBaClSOKVc二）操作方法取规定量的供试品，加水溶解使成约40ml（如溶液显碱性，可滴加盐酸使成中性）；溶液如不澄清，应滤过；置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸2ml，摇匀，即得供试液。另取各药品项下规定量的标准硫酸钾溶液，按同样方法制成对照液于供试液与对照液中，分别加入25%氯化钡溶液5ml，用水稀释至50ml，摇匀，放置10min，同置黑色背景上，从比色管上方向下观察、比较。三）测定条件1.标准K2SO4溶液:每1ml相当于0.1mg的SO42－，50ml溶液中含0.1～0.5mg的SO42－所显浑浊梯度明显，相当于标准K2SO4溶液1.0～5.0ml。2.反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml供试溶液中含稀盐酸2ml为宜。3.试剂：氯化钡4.供试液和对照液稀释后，再加氯化钡溶液，使生成白色浑浊而不是白色沉淀5.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下观察。四）干扰及排除加入盐酸，排除碳酸离子等干扰。温度太低，水浴加热，加快浑浊产生。若供试品有色，也可用内消色法即倍量法处理。供试液不澄明，用成酸性的水洗过的滤纸过滤。例：药物中硫酸盐检查时，所用的标准对照液是（）A.标准氯化钡B.标准醋酸铅溶液C.标准硝酸银溶液D.标准硫酸钾溶液E.以上都不对√铁盐检查法1.原理对照法红色药物：36SCNFeHCl6SCNFeFeFe3o23红色、对照：36HCl3SCNFe6SCNFeVc2.检查方法（药典附录）除另有规定外，取各药品项下规定量的供试品，加水溶解使成25ml，移置50ml纳氏比色管中，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成35m1后，加30%硫氰酸铵溶液3ml，再加水适量稀释成50ml，摇匀（供试液及处理）；如显色，立即与标准铁溶液一定量制成的对照溶液比较，即得对照液：取各药品项下规定量的标准铁溶液，置50ml纳氏比色管中，加水使成25ml，加稀盐酸4ml与过硫酸铵50mg，用水稀释使成35m1后，加30%硫氰酸铵溶液3ml，再加水适量稀释成50ml，摇匀3.测定条件（1）标准铁溶液及对照液用FeNH4(SO4)2·12H2O（硫酸铁铵）配制标准铁贮备液（加入硫酸防止Fe3+的水解），标准铁溶液临用前稀释而成，标准铁溶液10gFe3+/ml，50ml溶液中含10～50g的Fe3+显色梯度明显，一般取标准铁溶液1.0～5.0ml