机能学实验 氨在肝性脑病发生中的作用

氨在肝性脑病发生中的作用肝性脑病（hepaticencephalopathyHE）继发于严重肝病的神经精神综合症欣快、反应迟缓、睡眠节律的变化，有轻度的扑翼样震颤前驱期扑翼样震颤Flappingtremor行为异常、嗜睡、定向理解力减退及精神错乱，经常出现扑翼样震颤昏迷前期明显的精神错乱、昏睡等症状昏睡期肝性昏迷(hepaticcoma)神志丧失、不能唤醒，没有扑翼样震颤昏迷期肝性脑病的发生机制肝性脑病氨中毒学说假性神经递质学说γ-氨基丁酸学说血浆氨基酸失衡学说氨中毒学说在严重肝病时，机体内氨生成过多而肝脏对氨的清除能力下降，致使血氨水平显著升高，高浓度的氨通过血脑屏障进入脑组织，引起脑功能障碍。如何复制肝性脑病的动物模型？？氨的来源增多氨的清除减少肠腔注射复方氯化胺肝叶结扎实验目的•学习复制肝功能障碍时氨代谢异常的动物模型的方法•观察肝性脑病时机体的典型表现及血氨水平的变化•掌握肝性脑病的概念及发病机制实验动物家兔，体重甲兔：雌/雄乙兔：实验器材家兔急性手术器械一套，兔固定台，粗棉线，细丝线，1ml、2ml、5ml、10ml注射器各1具，婴儿秤、扩散瓶2个药品1％利多卡因，1％肝素，2.5%复方氯化铵溶液，0.5mol/L硫酸，纳氏试剂，饱和碳酸钾实验方法甲兔：结扎大部肝叶＋注射复方NH4Cl乙兔：不结扎肝叶＋注射复方NH4Cl剑突下做一6-8cm长切口------避免气胸称重、分组----甲兔和乙兔重量相同/相近固定----------四肢伸展仰卧位？剪毛、麻醉（各2ml）----颈部、上腹部局部麻醉？甲兔结扎肝叶，找到十二指肠，穿牵引线乙兔不结扎肝叶，找到十二指肠，穿牵引线颈总动脉插管---取血1mL测血氨(取血后肝素化)提前取胶布剪口游离长度×√甲兔出现大抽搐时再次放血1ml测血氨。记录所用复方NH4Cl总量和时间。乙兔与甲兔出现大抽搐时注射的复方NH4Cl量和时间相同时，从颈总动脉再次放血1ml测血氨。继续推注复方NH4Cl直至乙兔出现大抽搐，记录所用复方NH4Cl总量和时间。向肠腔注射复方NH4Cl（5ml/5min)小结第一次取血时间第二次取血时间、弃掉肝素停止注射复方NH4CL注射器的使用大抽搐：四肢伸直，坚硬如柱，头尾昂起，脊柱挺硬迅速血氨测定方法(纳氏试剂显色法)饱和碳酸钾溶液1ml血液1ml立即以玻璃棒蘸硫酸1滴迅速盖上扩散瓶倾斜扩散瓶将血液及碳酸钾充分混匀（45度角旋转10分钟，放置１0分钟）取出玻棒,取纳氏试剂3ml将玻棒上含氨硫酸洗入试管中肉眼观察液体颜色,颜色深浅反映血液氨的浓度高低(可用—、±、+、++、+++、++++表示颜色深浅)※玻棒用前调整好高度※蘸液约1cm※勿使玻棒与血液及瓶内壁接触提前观察项目氨在肝性脑病发生中的作用观察组出现大抽搐所需出现大抽搐血氨浓度别NH4Cl用量(ml)所需时间(min)第1次第2次呼吸肌张力甲兔乙兔注意事项•原则上选择体重相差不超过250g的家兔进行对照•专人测定血氨•肝叶结扎线置于肝叶根部，避免勒破肝脏•复方NH4Cl切勿漏入腹腔•乙兔与甲兔同时推注复方NH4Cl或晚于甲兔？？•发生大抽搐时迅速放血05min10min15min20min25min30min5ml10ml15ml20ml25ml30ml35ml大抽搐：四肢伸直，坚硬如柱，头尾昂起，脊柱挺硬讨论要点1.肝性脑病的概念2.模型是如何复制的（氨中毒学说）3.实验数据横纵向对比分析4.实验现象的分析（氨对脑的毒性作用）观察项目•呼吸运动、肌张力、抽搐。氨在肝性脑病发生中的作用观察组出现大抽搐所需出现大抽搐血氨浓度别NH4Cl用量(ml)所需时间(min)第1次第2次甲兔乙兔氨对脑代谢功能的影响•1、干扰脑细胞能量代谢•2、使脑内神经递质改变•3、氨对神经细胞膜的抑制作用参考结论：血氨增高是肝性脑病的重要诱因甲兔为肝性脑病，乙兔为急性氨中毒肝脏具有解氨毒的作用，但有一定限度氨对大脑具有毒性作用