(公开课)动物细胞融合与单克隆抗体

主讲：窦辉班别：高二（22）班番茄-马铃薯（理想图）有梦想，才会有创造！人—鼠（想像图）如何实现人、动物之间细胞的融合呢？A细胞B细胞人工诱导1.1动物细胞融合的概念杂交细胞动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。诱导方法物理法：化学法：生物法：灭活的病毒（特有的方法）原理：（与植物细胞融合的基本原理相同）离心、电激、振动聚乙二醇(PEG)细胞膜的流动性灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞融合，形成杂交细胞（细胞膜具有一定的流动性）1.2动物细胞融合过程保留融合活性为什么灭活的病毒能作诱导剂？灭活丧失感染性1.3动物细胞融合技术的意义和应用突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段意义：应用：制备单克隆抗体（最主要的应用）从动物的血清中分离抗体该法制备抗体的缺点：抗体的传统生产方法抗原反复注射动物产量低纯度低特异性差灵敏度低1975年的实验室一个美丽的发现每个B淋巴细胞——只能分泌一种特异性抗体怎样大量获得单一抗体进行无性繁殖（克隆）体外培养的细胞不能无限增殖？癌细胞但是既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞动物细胞培养技术动物细胞融合技术单克隆抗体你的设想既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞BB、B瘤、瘤瘤（B、瘤）（一选）选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活（二选）：选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞√体外培养小鼠腹腔内培养目的：获得产生相应抗体的B细胞2.2单克隆抗体的应用诊断试剂——最广泛应用准确、高效、简易、快速单克隆抗体最主要的优点：特异性强灵敏度高并能大量制备“生物导弹”＝单克隆抗体＋药物单抗导向，药物为弹头治疗疾病和运载药物主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。两个过程动物细胞融合过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法－－灭活病毒一个新细胞－－杂交瘤细胞一个优势－－单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是（）A.离心B.灭活的病毒C.电刺激D.振动【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（)A.具有原来两个或多个细胞的遗传信息B.能无限增殖C.可形成新个体D.培养过程会贴壁BA【例3】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A.经过免疫的B淋巴细胞B.不经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞D.不经过免疫的B淋巴细胞A【例4】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（）A．将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D．筛选杂交细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体B×①15、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：（1）该方案能达到预期效果吗？。原因是______________________________________________。（2）图中②为过程，常用作为诱导剂。该细胞继承了_____________________，因此不仅能分泌___________，还有本领。不能没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生专一抗体的B淋巴细胞细胞融合灭活病毒双亲细胞的遗传物质特异性抗体大量增殖制备单克隆抗体（3）该方案的目的是_________________________。比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用途植物体细胞杂交动物细胞融合课后作业：比较动、植物细胞杂交技术单克隆抗体:单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体