(SOP·QC-YC-043)岛津LC-2030型自动进样高效液相色谱仪使用、维护及保养标准操作规程

修正药业集团亳州制药有限公司文件编号：SOP•QC-YC-043版本号：00第1页共10页文件名称岛津LC-2030型全自动高效液相色谱仪使用、维护及保养标准操作规程文件编号SOP•QC-YC-043起草人起草日期年月日原文件编号--审核人审核日期年月日原文生效日--批准人批准日期年月日版本号00颁发单位质控实验室生效日期年月日分发号分发单位与数量质量管理部、质控实验室办公室、液相色谱室各1份修订记载版本号生效日期修订原因、依据及内容00依据《药品生产质量管理规范》（2010年修订）编写。修正药业集团亳州制药有限公司文件编号：SOP•QC-YC-043版本号：00第2页共10页目的：建立岛津LC-2030型自动进样高效液相色谱仪使用、维护及保养标准操作规程，供化验员标准操作。范围：应用于岛津LC-2030型自动进样高效液相色谱仪。职责：由质控实验室仪器负责人编写；质控实验室经理、质量管理QA审核；质量负责人批准；质控实验室相关化验员执行。内容：1编制依据：《岛津LC-2030型自动进样高效液相色谱仪使用说明书》、《药品生产质量管理规范》（2010年版）。2仪器组成：本仪器主要由溶剂瓶柜、自动进样器、紫外检测器、荧光检测器、柱温箱、脱气机组成。如图1所示：图13操作方法：3.1开机：溶剂瓶柜自动进样器脱气机柱温箱荧光检测器紫外检测器修正药业集团亳州制药有限公司文件编号：SOP•QC-YC-043版本号：00第3页共10页3.1.1准备好流动相并安装好色谱柱：将配制好的流动相用孔径为0.45µm的滤膜过滤，超声脱气处理15分钟后方可使用；色谱柱按箭头指示方向连接到液相色谱仪上。3.1.2打开液相色谱仪电源，液相色谱仪仪器开始自检。3.1.3电脑开机进入WINDOWS桌面后，双击LC-2030色谱工作站图标，进入工作站登陆界面。如图2所示：图23.1.4单击【确定】进入主项目界面。如图3所示：图33.1.5单击【仪器】图标，双击，进入仪器操作界面在线系统，修正药业集团亳州制药有限公司文件编号：SOP•QC-YC-043版本号：00第4页共10页出现在线控制主界面。如图4所示：图43.1.6打开排放阀（逆时针旋转﹤180°），单击【自动排气】，进入排气操作界面，根据需要选择流路及排气时间，完成设置后单击【下载】。如图5所示：图53.2数据采集方法编辑：3.2.1常规参数设置：3.2.1.1单击[常规]，进入常规操作界面，运行时间、泵流速、检测器波长和柱温箱温度（5℃～85℃）等，完成设置后单击[下载]，将该方法下载至液相色谱仪。如图6所示：修正药业集团亳州制药有限公司文件编号：SOP•QC-YC-043版本号：00第5页共10页图63.2.1.2单击【时间程序】，进入该操作界面，若进行等度洗脱，则不需要修改。如图7所示：图73.2.2高级参数设置：3.2.2.1单击[高级]，进入该操作界面，设置相关检测参数，完成设置后单击【下载】，将该方法下载至液相色谱仪，如图8所示：图83.2.2.2进入该操作界面，设置检测波长（波长范围：190nm～700nm）、池温度（控温范围40℃～90℃），完成设置后单击【下载】，如图9所示：图93.2.2.3单击【时间程序】，进入该操作界面，设置相应检验参数，若进行等度洗脱，“控制器”处理命令为【stop】，否则无法进行其他设置。如图10所示：修正药业集团亳州制药有限公司文件编号：SOP•QC-YC-043版本号：00第6页共10页图103.2.2.4单击【柱温箱】，进入该操作界面，设置柱温箱温度（5℃～85℃），如图11所示：图113.2.2.5单击【自动进样器】，进入该操作界面，设置相应检验参数。非特殊情况不需修改。3.2.2.6保存检验参数，完成检验参数设置，单击，开始检验分析。3.3样品分析：3.3.1双击，进入主项目界面，如图12所示：图123.3.2双击【再解析】，进入【再解析】界面，如图13所示：修正药业集团亳州制药有限公司文件编号：SOP•QC-YC-043版本号：00第7页共10页图133.3.3双击【文件】图标，选中需要处理的文件，单击文件名，打开该文件，如图14所示：图143.3.4单击，出现手动积分栏，对色谱图进行积分处理，如图15所示修正药业集团亳州制药有限公司文件编号：SOP•QC-YC-043版本号：00第8页共10页图153.3.5色谱图积分处理结束后，保存处理结果。3.4单击，预览数据报告，确认无误，输出报告。4注意事项4.1仪器安装环境：放置点应远离强磁场，避免震动、静电干扰及腐蚀性气体的腐蚀。4.2如果流动相为有机相与水的混合溶液，则直接用甲醇或乙腈冲洗流路，冲洗管路约60分钟后，待基线走平且无杂质峰出现即停泵关机。若实验中使用了缓冲盐或者其他电解质，在做实验前后，一定要先用10%甲醇冲洗约30分钟。4.3泵4.3.1水相及含水相流动相需现用现配，需用0.45µm微孔滤膜过滤，防止损坏泵及管路。4.3.2清洗瓶中的50%甲醇要求每天更换一次。4.3.3为了保证泵的安全运行，需要设定压力范围，一般为5～400pa。4.3.4拧松脱气阀时，不宜拧得过松。一般拧大于90º小于180º即可。拧的过松流动相容易从脱气阀部位流进泵头中引起报警。4.4检测器4.4.1新柱子活化时最好断开检测器管道使用二通阀连接管路直接排除清洗液。修正药业集团亳州制药有限公司文件编号：SOP•QC-YC-043版本号：00第9页共10页4.4.2检测器的紫外灯在长期打开的情况下，一定要保证有溶液经过流通池。若不需要进样，可设置一个较低的流速（0.05ml/min）或者关闭灯的电源。4.4.3检测器的灯一般是在流通池流动相流动一段时间后才打开的，如果流动池中有气泡，则会提示漂移过大无法通过自检和校正。4.4.4一次开灯相当于30小时正常使用寿命，因此尽可能将样品集中分析；遇有样品分散的情况，且间隔时间不超过8小时，不要关灯。4.4.5检测波长范围：190nm～700nm。4.4.6荧光检测器：液相色谱中的荧光检测器仅使用吸收紫外光或者可见光而发射的荧光。利用测量化合物荧光强度对化合物进行检测的液相色谱检测器就是荧光检测器（FLD）。4.5柱温箱：柱温箱一旦发生报警，一定要及时找到原因，若实验室湿度太高，则需采取相应的除湿措施，若柱温箱中发生泄漏现象，则需要拧紧色谱柱并擦干泄漏液，长时间的泄漏极易损坏柱温箱中的传感器。控温范围：5℃～85℃。4.6自动进样器4.6.1自动进样器建议用50%甲醇洗针。4.6.2可进行温度控制，避免自动进样器内温度升高影响供试品的测定结果，控温范围：4℃～40℃。4.7整个系统4.7.1流动相的PH值范围应控制在2-8（防止腐蚀流路）。4.7.2仪器长时间不用，每个泵通道和整个流路一定要用甲醇冲洗后保存，以免结晶或造成污染。避免水或缓冲液、酸、碱在泵内长时间停留。4.7.3仪器密封圈是反相，禁止使用正相流动相。4.7.4禁止在泵室内无溶剂状态下进行；避免在泵压过高状态下运行。4.8软件4.8.1计算机设置用户权限，由操作人员负责解密。4.8.3禁止在仪器上安装U盘及与工作无关的软件。4.8.4电子数据管理：电子数据应专人负责，具体执行《电子数据保存与备份管修正药业集团亳州制药有限公司文件编号：SOP•QC-YC-043版本号：00第10页共10页理规程》（SMP·QC-JY-007）。5维护与保养：5.1仪器应保持清洁，每日用棉布擦拭仪器表面。5.2当仪器脱气时，若气泡排不净，可将沉子先用异丙醇超声处理5-10分钟，再用色谱甲醇超声处理5-10分钟，若气泡仍存在，则更换沉子。5.3走水脱气时，流速用5ml/min时，压力超过10bar，应及时更换在线滤芯。5.4使用前先检查仪器是否正常，如有异常，立即与有关部门联系，进行维修做好记录。5.5检验结束后及时填写使用记录，具体执行《检验仪器设备管理规程》（SMP·QC-JY-017）。培训：培训部门：质控实验室培训对象：化验员培训时间：0.5小时