心衰宁合剂联合基金结题汇报

基于线粒体自噬途径探讨心肌代谢重构的分子机制及心衰宁合剂的干预研究目录/简介一、项目基本信息二、项目研究内容三、预期考核指标及完成考核指标情况四、项目经费使用情况一、项目基本信息项目名称：基于线粒体自噬途径探讨心肌代谢重构的分子机制及心衰宁合剂的干预研究经费：7万二、研究内容技术路线研究结果研究结论1、技术路线SD大鼠正常组模型组卡托普利组心衰宁小组心衰宁中组心衰宁大组自噬抑制组自噬诱导组取材（血清、心肌）1.心肌组织病理观察2.超声3.BNP测定4.电镜心肌超微结构5.WB检测Beclin-1、LC3、PPAR-α蛋白表达6.qRT-PCR法检测Beclin-1、LC3及PPAR-αmRNA的表达2.1病理情况心衰宁合剂对CHF大鼠心脏组织病理学变化的影响（HE，×200）2、研究结果2.1Masson染色，×4002.2电镜对心肌细胞超微结构的观察（电镜，×30000）2.3大鼠超声心动图检测结果及比较（X±s）注：与正常组比较，1）P＜0.01；与模型组比较，2)P＜0.01，3)P＜0.05。组别剂量/g·kg-1LVEDD/mmLVESD/mmEF/%FS/%常组-6.23±0.313.32±0.3684.15±5.5446.57±6.40型组-10.78±0.751）8.49±0.561）50.51±8.421）21.13±4.501）卡托普利0.017.63±0.482）4.51±0.192）79.63±3.152）41.29±2.882）心衰宁小剂量15.69.97±0.663）7.03±0.472）64.19±7.192)29.29±4.902)心衰宁中剂量31.28.71±0.312）5.74±0.373)70.82±7.872）34.08±5.342）心衰宁大剂量62.47.70±0.412）4.53±0.192）78.47±5.662）40.42±4.832）自噬抑制组0.17.75±0.372）4.56±0.412）77.23±4.552）39.23±4.552）自噬诱导组1.25（mg·kg-1）8.57±0.322）5.11±0.512）69.31±5.662)36.31±5.662)2.4心衰宁合剂对慢性心力衰竭大鼠血清BNP的影响（X±s，n＝10）注：注：与正常组比较，1）P＜0.01；与模型组比较，2）P＜0.01，3)P＜0.05；与诱导组比较，4）P＜0.01。组别剂量/g·kg-1血清BNP(ng/L)正常组-29.17±2.94模型组-178.16±6.121）卡托普利0.0166.60±4.952）心衰宁合剂低剂量组15.6138.00±7.012）4）心衰宁合剂中剂量组31.297.37±3.362）4）心衰宁合剂高剂量组62.466.00±3.612）4）自噬抑制组0.165.27±2.242）自噬诱导组1.25（mg·kg-1）157.5±9.522.5心肌组织中Beclin1、LC3-Ⅱ、PPAR-a蛋白表达电泳注：A.正常组；B.模型组；C.卡托普利组；D.心衰宁小剂量组；E.心衰宁中剂量组；F.心衰宁大剂量组；G.自噬抑制组；H.自噬诱导组2.5心衰宁合剂对慢性心力衰竭大鼠心肌组织Beclin1、LC3-Ⅱ、PPAR-a蛋白表达的影响（X±s，n=3）注：与正常组比较，1）P＜0.01；与模型组比较，2）P＜0.01，3)P＜0.05；与诱导组比较，4）P＜0.01，5）P＜0.05。组别剂量/g·kg-1Beclin1/β-actinLC3-Ⅱ/β-actinPPAR-a/β-actin正常-1.211±0.2100.994±0.0851.027±0.084模型-3.083±0.3811）1.805±0.1461）0.458±0.0811）卡托普利0.011.563±0.1212)1.106±0.0982)0.968±0.0853)心衰宁合剂15.62.226±0.2692)1.464±0.1272)0.616±0.0882）31.22.068±0.2422)5）1.394±0.1212)0.755±0.1052）5）62.41.685±0.1942)4）1.155±0.1342)4）0.854±0.0732）4）自噬抑制组0.12.001±0.1422)1.191±0.1322)0.820±0.0712）自噬诱导组1.25（mg·kg-1）2.524±0.1902)1.589±0.1233)0.582±0.2002.6心衰宁合剂对慢性心力衰竭大鼠心肌组织Beclin1、LC3-Ⅱ、PPAR-amRNA相对表达的影响（X±s，n＝10）注：与正常组比较，1）P＜0.01；与模型组比较，2）P＜0.01；与诱导组比较，4）P＜0.01，5）P＜0.01。组别剂量/g·kg-1Beclin1LC3-ⅡPPAR-a正常-1.145±0.3371.056±0.1701.256±0.315模型-9.167±1.9641）7.682±2.7641）0.148±0.0591）卡托普利0.012.128±1.0252)1.501±0.4882)1.144±0.3412)心衰宁小剂量15.66.139±3.0182)13.555±3.7462)0.386±0.174心衰宁中剂量31.24.638±1.5152)4）4.505±2.5012)5）0.554±0.1672)心衰宁大剂量62.43.033±1.8662)4）2.123±1.1532)4）0.898±0.4302)自噬抑制0.13.624±2.5832)2.556±1.5292)0.865±0.3202)自噬诱导1.25（mg·kg-1）7.419±3.1515.860±3.8790.204±0.093心心衰宁合剂对CHF大鼠干预后心肌纤维化程度明显减轻，可降低CHF大鼠血清BNP水平，提高PPARαmRNA及蛋白表达水平，降低Beclin1和LC3-ⅡmRNA及蛋白表达水平，调节CHF大鼠的自噬与心肌能量代谢，延缓CHF的发生、发展，其机制可能与调节PPARα、Beclin1和LC3-Ⅱ表达有关，但是其针对的具体环节，需要进一步研究。3、研究结论三、考核目标及完成情况指标类型考核内容完成情况完成度技术指标1.病理组织学观察（HE、Massin染色）完成100%2.心脏超声完成100%3.检测血清BNP完成100%4.电镜观察心肌细胞超微结构完成5、蛋白免疫印迹法检测心肌组织Beclin1和LC3-Ⅱ、PPARα蛋白表达完成100%6.采用RT-PCR法检测心肌组织Beclin1和LC3-Ⅱ、PPARαmRNA表达完成100%科技产出发表文章2篇。1、已发表学术论文1篇2、获得实用新型专利1项70%四、项目经费使用情况一、经费到位情况（科目）总预算数实际到位数1、科技厅计划拨款二、经费支出情况（科目）总经费支出科技厅经费支出1.实验材料费原材料/试剂/药品购置费3.管理费4.出版/文献/信息传播/知识产权事务费三、余额总经费余额科技厅经费余额THANKSFORWATCHING