复旦微生物学实验课件1 无菌材料准备和环境微生物的检测

实验1无菌材料准备和环境微生物的检测•进入实验室，必须穿白大褂•两个同学一组，选择座位，收好第一个抽屉钥匙和柜子钥匙•录像1消毒和灭菌•录像2无菌操作倒平板配制培养基1、高氏1号培养基，液体培养基由教师配好，每组取一个250ml三角瓶中加入2.6克琼脂，再加160ml液体培养基，包扎，做好标记（XX组）。2、斜面培养基，教师准备高氏1号培养基，每组拿试管4支，每支分装培养基4ml，加帽。121℃20分灭菌斜面培养基待试管冷却至70℃后，垫适当厚度木板等来搁置斜面，使斜面前沿在试管正中间，自然冷却过程中不得移动，待彻底冷凝后收入柜子中。高氏一号培养基取出后趁热混匀沉底的琼脂，做好标记（X月X日，高氏一号）后收入柜子中1、课程介绍人员教材内容评分王英明刘明秋2、安全教育煤气着装微生物安全学习后签字3、培养基•固体/液体/半固体培养基/（脱水培养基）•天然/合成培养基•通用/选择/鉴别培养基•碳源/氮源/能源/水/无机盐/生长因子肉汤培养基1L——天然培养基，成分不明确牛肉膏粉3g，蛋白胨10g，NaCl5g，pH7.4，琼脂16g。高氏一号固体培养基1L——合成培养基，成分明确可溶性淀粉20g，KNO31g，K2HPO40.5g，MgSO4·7H2O0.5g，NaCl0.5g，FeSO4·7H2O，0.01g，琼脂16g，pH=7.4；氧化硫硫杆菌培养基1LNH4Cl0.52gNsourceKH2PO428gMgSO4·7H2O0.25gCaCl22H2O0.07g硫粉1.56gEnergysourcepH3.0高氏一号固体培养基1L——合成培养基，成分明确可溶性淀粉20g，KNO31g，K2HPO40.5g，MgSO4·7H2O0.5g，NaCl0.5g，FeSO4·7H2O，0.01g，琼脂16g，pH=7.4；氧化硫硫杆菌培养基1LNH4Cl0.52gNsourceKH2PO428gMgSO4·7H2O0.25gCaCl22H2O0.07g硫粉1.56gEnergysourcepH3.0在5%CO2中培养基灭菌相关概念•消毒：杀死有害微生物，酒精擦拭，食品消毒（牛奶的巴氏消毒等）。•灭菌：杀死所有微生物,就是常规方法检测不到样品中有活的微生物。•抑菌：抑制微生物生长，比如低PH，低温，高渗透压（盐，糖等），干燥等。•化疗：用药物选择性抑制寄主体内的病原微生物（包括肿瘤），比如各种抗生素，磺胺等•防腐：抑制微生物的生长，进行食品保鲜。常用方法•干热灭菌：靠高温杀死微生物，160-180度，2小时。灼烧：火焰上烧红。•湿热灭菌：高温水蒸气杀灭微生物。如灭菌锅121度20分，根据样品特点，调整温度和时间。•化学药剂，消毒：新洁尔灭，0。2%，30min。•辐照：紫外线消毒•过滤除菌：无菌滤器，孔径0.22微米，样品经过滤除去细菌等微生物，滤过性微生物不能除去。无菌操作倒平板无菌操作倒平板后处理•水电煤，安全检查•台面清洁，物品收好•高氏1号培养基三角瓶，斜面