华北理工药物分析教案第14章 维生素类药物的分析

1首页课程名称：《药物分析》第12周，第22讲次摘要授课题目（章、节）第十四章维生素类药物的分析第一节维生素A的分析第二节维生素B1的分析【目的要求】通过本讲课程的学习，掌握维生素类药物的结构特点与分析方法之间的关系。掌握维生素A、B1的鉴别原理与方法。掌握三点校正法测定维生素A的原理、测定方法与计算方法【重点】维生素A、B1的鉴别原理与方法。三点校正法测定维生素A的原理、测定方法与计算方法【难点】掌三点校正法测定维生素A的原理、测定方法与计算方法内容【本讲课程的引入】维生素：是维持人体正常代谢机能所必需的微量营养物质。人体不能自行合成维生素。如果人体缺少某种维生素，就会引起维生素缺乏症，而影响人体的正常生理机能。板书“维生素类药物的分析”。一、维生素A（一）结构特点与分析方法之间的关系CH2ORCH33CH3CHCH3CH31．共轭多烯结构：具有紫外吸收，可采用紫外吸收光谱法进行鉴别，采用紫外分光光度法进行含量测定。天然维生素A是全反式维生素A。2．结构式中R的不同，可以形成维生素A醇或其酯。临床上多用其醋酸酯和棕榈酸酯。（二）鉴别实验1.三氯化锑反应：加饱和无水三氯化锑的无醇氯仿溶液，即显蓝色，渐变紫红色。2.紫外吸收光谱法：在300～400nm范围内扫描，应仅在326nm处有单一吸收峰；经水浴加热30秒，应在348、367、389nm处有三个尖锐的吸收峰。3.薄层色谱法：见表（三）维生素A含量测定维生素A含量测定方法有紫外分光光度法和三氯化锑比色法，前者是法定方法，后2者多用于食品或饲料中的维生素A的测定。中国药典采用三点校正法。1．为何要采用三点校正法？维生素A原料药中常混有杂质，如维生素A2、维生素A3、维生素A的氧化产物、鲸醇以及维生素A的异构体，这些杂质在维生素A的最大吸收波长附近有吸收，干扰维生素A的测定。采用三点校正法可以消除这些杂质的干扰。2．测定原理该法基于两点：1）在310～340nm范围内，杂质吸收呈一直线，且随波长的增大吸收度下降。2）物质对光吸收呈加和性。波长的选择：一点选在维生素A的最大吸收波长处（λ1），其它两点选在λ1的两侧。第一法（等波长差法）的三个波长为λ1=328nm、λ2=316nm、λ3=340nm；第二法（等吸收比法），使Aλ2=Aλ3=6/7Aλ1，则三个波长为λ1=325nm、λ2=310nm、λ3=334nm。3．测定方法首先判断用哪个吸收度进行含量计算。第一法：供试液浓度为9～15IU/ml，溶剂为环己烷，在300、316、328、340、360nm五个波长处测定吸收度。1）最大吸收波长在326～329nm之间，计算吸收度比值Ai/A328，并与规定值相减，差值不超过±0.02，则用A328计算含量：E1cm1%=A/CLIU/g=E1cm1%×1900IU/丸=IU/g×g/丸=IU/g×WIU/丸标示量%=--------×100%标示量A×D×1900×W或：标示量%=-------------------×100%W×100×L×标示量2）如果最大吸收波长在326～329nm之间，5个波长下的差值有一个或几个超过±0.02，这时先计算A328（校正）：A328（校正）=3.52（2A328-A316-A340）3A328（校正）-A328再计算------------------×100%A328若所得的数值在±3%，则仍用A328计算含量；若所得的数值在-15%～-3%之间，则需用A328（校正）计算含量；若所得的数值小于-15%或大于+3%，或最大吸收波长不在326～329nm之间，则应采用第二法（皂化法）测定。二、维生素B1（一）、结构特点与分析方法之间的关系1．氨基嘧啶环和噻唑环：具有硫色素反应，此反应专属性强，用于鉴别和含量测定。具杂环的沉淀反应，与生物碱沉淀剂反应，产生沉淀，用于鉴别与含量测定。2．共轭体系：具紫外吸收，用于含量测定。3．盐酸根：呈氯化物的反应，用于鉴别。NNNH3NS+OHCH3H3CCl,HCl维生素B1（二）鉴别反应1.硫色素荧光反应维生素B1在碱性溶液在碱性溶液中，可被铁氰化钾氧化生成硫色素，于正丁醇中显蓝色荧光。2.沉淀反应3.氯化物反应4.硫元素反应5.IR（三）含量测定维生素B1及其制剂的测定方法有非水溶液滴定法、紫外分光光度法、硅钨酸重量法和硫色素荧光法。中国药典（2010年版）采用非水溶液滴定法测定原料药，采用紫外分光光度法测定片剂和注射液。1．非水溶液滴定法：分子中有两碱性基团，均可与高氯酸作用，其摩尔比为1∶2，分子量为337.27，滴定度为16.86mg/ml。2．紫外分光光度法：用盐酸溶液（9→1000）将维生素B1片粉中的维生素B1溶出，4经过滤、稀释后于246nm测定吸收度，计算含量。A×D×W标示量%=-----------------------×100%E1cm1%×100×W×标示量【本讲课程的小结】今天我们主要讲了维生素A、B1药物的典型结构特点、理化性质和鉴别含量测定基本原理与方法。希望同学们重点学习。【本讲课程的作业】1．维生素B1的鉴别方法是A.三氯化铁反应B.硫色素反应C.柯柏反应D.与碱性酒石酸铜试液反应2.可用紫外分光光度法测定含量的药物有A.维生素A丸剂B.丙酸睾酮C.维生素AD.维生素B1片3.简述维生素A三点校正法的原理，波长选择方法。5课程名称：《药物分析》第13周，第23讲次摘要授课题目（章、节）第十四章维生素类药物的分析第三节维生素C的分析第四节维生素D的分析（自学）第五节维生素E的分析【目的要求】通过本讲课程的学习，掌握维生素C、E鉴别原理和方法，熟悉维生素E的GC含量测定法，了解维生素D的HPLC含量测定法。掌握维生素C碘量法的测定原理、方法与注意事项。【重点】维生素C、E鉴别原理和方法，维生素C碘量法的测定原理、方法与注意事项。【难点】维生素C、E鉴别原理和方法，维生素C碘量法的测定原理、方法与注意事项。内容【本讲课程的引入】本章围绕维生素类药的化学结构理化性质和分析方法之间的关系，结合中国药典，重点讲解本类药物的鉴别、检查和含量测定的原理和方法。板书“维生素C的分析”。“维生素E的分析”【本讲课程的内容】三、维生素C（一）、结构特点与分析方法之间的关系OHOHOHOHOHO维生素C1．烯二醇结构：具有强环原性，可发生氧化还原反应，用于鉴别和含量测定。2.与糖类似的结构：具有糖类似的性质和反应，可用于鉴别。3.旋光性4.酸性5.水解性6.紫外吸收特性（二）鉴别反应与AgNO3反应与2,6-二氯靛酚反应与碱性酒石酸铜反应6与KMnO4反应糖类的反应UV法鉴别243nm薄层色谱法ChP2010采用薄层色谱法对维生素C制剂进行鉴别（三）杂质检查药物检查项目检查方法维生素C有色杂质分光光度法（四）含量测定维生素C可采用碘量法、2，6-二氯靛酚法、比色法、紫外分光光度法和HPLC法。其中碘量法是维生素C原料及其制剂的法定方法。1．碘量法原理：维生素C具有较强的还原性，在醋酸性条件下，可被碘定量的氧化。讨论：醋酸的作用：维生素C再酸性介质中受空气中氧的氧化速度减慢。加新沸过的冷水：减少水中溶解的氧对测定的影响。2．2，6-二氯靛酚滴定法原理：维生素C具有较强的还原性，在酸性条件下，可被2，6-二氯靛酚氧化。指示终点方法的特点：在酸性溶液中，氧化型的2，6-二氯靛酚为红色，当与维生素C反应后，即转变为无色的酚亚胺（还原型），因此，用2，6-二氯靛酚滴定液滴定至溶液显玫瑰红色时，即为终点，无需另加指示剂。3.HPLC方法离子交换色谱法离子对色谱法分配色谱法（正、反相）对象制剂、生物样品、果汁四、维生素D（自学）是一类抗佝偻病维生素的总称目前已知的维生素D类物质至少有十种之多，它们都是甾醇的衍生物。1．性状均为无色针状结晶或白色结晶性粉末；无臭，无味；遇光或空气均易变质。72．溶解性维生素D2－在氯仿中极易溶解，在乙醇、丙酮或乙醚中易溶；维生素D3－在乙醇、丙酮、氯仿或乙醚中极易溶解；二者均在植物油中略溶，在水中不溶。3．不稳定性维生素D2、D3因含有多个烯键，所以极不稳定，遇光或空气及其他氧化剂均发生氧化而变质，使效价降低，毒性增强。本品对酸也不稳定。4．旋光性维生素D2具有6个手性碳原子，维生素D3有5个手性碳原子五、维生素E（一）、结构特点与分析方法之间的关系OOCH3CH3CH3CH3CCH3OCH3CH3CH3CH3维生素E1．芳环：具紫外吸收，可用于鉴别。1．乙酰化的酚羟基：水解后生成生育酚，可发生三氯化铁反应和氧化还原反应，用于鉴别。（二）、鉴别反应1.硝酸反应加硝酸，显橙红色2.水解后的三氯化铁反应试剂2，2-联砒啶，三氯化铁，显血红色。（三）、维生素E中杂质的检查药物检查项目检查方法维生素E酸度以NaOH滴定液（0.1mol/L）体积控制游离生育酚硫酸铈滴定法（四）、含量测定测定维生素E的法定方法是GC法，另外还有HPLC法、铈量法、比色法和荧光法。1．采用GC的优点：GC法具有高度选择性，可分离维生素E及其异构体，可选8择性地测定维生素E。【本讲课程的小结】今天我们主要讲了维生素CE药物鉴别、含量测定的基本原理与方法。希望同学们重点学习。【本讲课程的作业】1．用碘量法测定的药物有A.醋酸地塞米松B.丙酸睾酮C.维生素CD.硫酸阿托品E.维生素C注射液2.维生素E《中国药典》规定的含量测定方法为A.非水溶液滴定法B.旋光法C.HPLC法D.紫外分光法E.GC法3.碘量法测定维生素C的原理和方法是什么？有哪些注意事项？