华北理工水处理生物学课件16微生物的研究方法及水处理中的水生动植物

第七章微生物的研究方法——实验基本方法微生物观察分纯方法保藏方法灭菌、消毒一、微生物的观察目镜×4、10、16载物台调焦旋钮（粗调微调）光源物镜×10、40、100（油镜）放大倍数＝物镜×目镜普通显微镜类别项目明视野型暗视野型相差型电子显微镜最大放大倍数1，600倍2，000，000倍光源可见光电子束成像原理透镜成像透镜成像与光反射原理透镜成像与光衍射原理电子透镜成像原理染色是否否活体观察有困难可以否常用显微镜比较分离—得到纯菌落二、微生物的分离和保藏提问：如何进行？选择性培养基筛分→接种针划线分离纯细菌划线分离方法实验课介绍如何进行微生物试验无菌操作？用品全部灭菌；在酒精灯火焰保护下进行操作；操作间的紫外杀菌；手臂的消毒等；无菌操作台操作试管固体斜面培养基保藏挑单菌落划斜面除保藏外分纯后的细菌还可用于驯化或基因改良，培育高效菌。提问：培养出的高效菌投加到实际处理系统中后常常效果比试验中的差，原因何在？水质波动过大；生物之间竞争和拮抗关系等等提问：如何解决？直接研究混合菌处理（包括活性污泥）技术三．微生物的保藏但保藏中存在一个菌种退化的问题退化——群体细菌一些重要特性逐渐变差提问：退化原因？有害突变、染菌、病毒侵蚀、培养基环境改变诱导保藏目的—留“种子”如何克服这一问题？A.出现衰退之前分离保藏没有发生衰退的细菌B.杜绝培养基变化及染菌等的发生；C.复壮（对变异衰退细菌恢复强壮再保藏）复壮方法：用高剂量的紫外辐射和低剂量的诱变剂联合处理对于衰退严重的菌株可以起到满意的复壮目的。有害突变、染菌、病毒侵蚀、培养基环境改变诱导保藏原理：使细菌休眠提问：有哪些方法呢？低温、干燥、缺氧、贫乏培养基和添加保护剂等1．定期移植法低温保藏，定期转接保存的温度和时间各菌种不一。例如，细菌于4~6℃保存，芽孢杆菌每3~6个月移植一次，其他细菌每月移植一次。若贮存温度高，则移植间隔时间要短。放线菌于4~6℃保存，每3个月移植一次；酵母菌于4~6℃保存，每4~6月移植一次；霉菌于4~6℃保存，每6个月移植一次；2．干燥法将菌种接种到无菌的干燥载体上如灭菌后的河砂、土壤、硅胶、滤纸及麸皮等以砂土保藏法用得较普遍，通常把接种菌种的砂土放在干燥器内，于常温或低温下保藏，芽孢杆菌、梭状芽孢杆菌、放线菌及霉菌均可用此法保藏。3．隔绝空气（——定期移植法的辅助方法）方法：无菌液体石蜡封住半固体培养物来保藏菌种。将待保存的斜面菌种用橡皮塞代替原有的棉塞塞紧，这样可使菌种保藏较长时间。4．无菌蒸馏水悬浮法——最简单的保藏法方法：将菌种悬浮于无菌蒸馏水中，将容器封好便可达到目的。如球衣菌就可用此法保藏。5．综合法（冷冻干燥法）低温+干燥+隔绝空气A.先加保护剂制成细胞悬液并分装于小试管内保护剂有牛奶、甘油等提问：作用何在？细胞内及周围不结冰B.将悬液冻结成冰(温度为—25℃至—40℃)，抽气进行真空干燥（目视冻干样品呈现酥状或松散的片状即可）冷冻干燥机C.小试管熔断封口，置室温或低温保藏此外，还有其他菌种保藏方法，可参阅菌种保藏手册。这种方法可使菌种稳定保藏几年至十几年，是最好的保藏方法。四、灭菌灭—杀灭包括芽孢在内的全部微生物的操作。如培养基蒸汽灭菌、接种环火焰灭菌提问：它与消毒的区别何在？消毒能杀死大部分病原菌，不能杀死芽孢紫外线、加热、75％乙醇、含氯消毒液、过氧乙酸等等消毒如何灭菌？（一）干热法器具：烘箱操作：160~170℃烘烤2h常用于金属和玻璃器皿的灭菌处理。（二）湿热法器具：高压蒸气灭菌锅操作：1大气压（121℃）持续15~20min普遍适用对于含有葡萄糖、乳糖等易被高温破坏物质的培养基，温度则降低为115℃持续30min进行灭菌处理。高压蒸汽灭菌锅（三）灼烧法器具：火焰用于接种环、载玻片、试管口及不再使用物品的灭菌。病死牲畜也常用此法处理。水处理中的水生动植物•1、水处理中水生动植物的作用•净化作用–利用水生动植物去除水中的污染物•指示作用–利用水生动植物指示水体的污染情况•应用——自然湿地、人工湿地、水体自净、稳定塘2、水处理中的水生动物•水生动物包括浮游动物、底栖动物和水生脊椎动物。•利用水生动物进行生物监测和生态评价水处理中水生动物的净化作用•原生动物和后生动物•鱼类放养、大型浮游动物对水质的净化作用蚯蚓水处理中水生植物的作用•水生植物的应用——湿地•水生植物的种类水生植物的净化作用水生植物的净化废水的优点