西南林大现代生化仪器分析课件06高效液相色谱分析法第5节 超临界流体色谱

10:31:24第六章液相色谱分析法一、超临界流体色谱的特点与原理featureandprincipleofSFC二、超临界流体色谱仪的结构流程structureandgeneralprocessofSFC三、超临界流体色谱的应用applicationofSFC第五节超临界色谱highperformanceliquidchromatographsupercriticalfluidchromatograph,SFC10:31:24一、超临界流体色谱的特点与原理principleandcharacterofsupercriticalfluidchromatography1.概述超临界流体：在高于临界压力与临界温度时，物质的一种状态。性质介于液体和气体之间。超临界流体色谱(SFC)，80年代快速发展，具有液相、气相色谱不具有的优点:（1）可处理高沸点、不挥发试样；（2）比LC有更高的柱效和分离效率。10:31:242.超临界流体性质（1）性质介于液体和气体之间;具有气体的低黏度、液体的高密度，扩散系数位于两者之间。（2）可通过改变超临界流体的密度（程序改变）调节组分分离（类似于气相色谱的程序升温，液相色谱中的梯度淋洗）。超临界流体的密度与压力有关。10:31:243.原理SFC的流动相：超临界流体；CO2、N2O、NH3SFC的固定相：固体吸附剂（硅胶）或键合到载体（或毛细管壁）上的高聚物；可使用液相色谱的柱填料。填充柱SFC和毛细管柱SFC；分离机理：吸附与脱附。组分在两相间的分配系数不同而被分离；通过调节流动相的压力（调节流动相的密度），调整组分保留值；10:31:24压力效应：SFC的柱压降大（比毛细管色谱大30倍），对分离有影响（柱前端与柱尾端分配系数相差很大，产生压力效应）；超临界流体的密度受压力在临界压力处最大，超过该点，影响小，超过临界压力20%，柱压降对分离的影响小；压力效应：在SFC中，压力变化对容量因子产生显著影响，超流体的密度随压力增加而增加，密度增加提高溶剂效率，淋洗时间缩短。CO2流动相，当压力改变：7.0→9.0×106Pa，则：C16H34的保留时间25min→5min。10:31:24程序升压10:31:24HPLC与SFC比较10:31:24二、超临界流体色谱的结构与流程1.结构流程10:31:242.主要部件（1）SFC的高压泵无脉冲的注射泵；通过电子压力传感器和流量检测器，计算机控制流动相的密度和流量；（2）SFC的色谱柱和固定相可以采用液相色谱柱和交联毛细管柱；SFC的固定相：固体吸附剂（硅胶）或键合到载体（或毛细管壁）上的高聚物；专用的毛细管柱SFC；10:31:24主要部件（3）流动相SFC的流动相：超临界流体；CO2、N2O、NH3CO2应用最广泛；无色、无味、无毒、易得、对各类有机物溶解性好，在紫外光区无吸收；缺点：极性太弱；加少量甲醇等改性；（4）检测器可采用液相色谱检测器，也可采用气相色谱的FID检测器10:31:24三、超临界流体色谱的应用1.聚苯醚低聚物的分析色谱柱：10m×63μmi.d.毛细管柱。固定相：键合二甲基聚硅氧烷；流动相：CO2；柱温：120C；程序升压；10:31:242.甘油三酸酯的分析四种组分仅双键数目和位置不同，难分离；色谱柱：DB-225SFC毛细管柱；流动相：CO2；从15MPa程序升压到27MPa；2.5hr完全分离。10:31:24表液相色谱分离类型选择参考表溶于水——排阻色谱，水为流动相相对分子质量＞2000不溶于水——排阻色谱，非水流动相同系物——分配色谱不溶于水异构体——吸附色谱样品分子大小差异——排阻色谱反相液一液色谱相对分子质量溶于水，不离解＜2000排阻色谱，水为流动相碱——阳离子交换色谱溶于水，可离解酸——阴离子交换色谱溶于水，离子与非离子—反相离子对色谱