SNT 0654-2019 出口水果中克菌丹残留量的检测 气相色谱法和气相色谱-质谱 质谱法

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T0654—20192019-12-27发布2020-07-01实施中华人民共和国海关总署发布ICS67.050CCSX04出口水果中克菌丹残留量的测定气相色谱法和气相色谱-质谱/质谱法DeterminationofcaptanresiduesinfruitsforExportGCandGC-MS/MSmethod出口水果.indd12020/1/1620:09:19出口水果.indd22020/1/1620:09:19ISN/T0654—2019前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准代替SN0654—1997《出口水果中克菌丹残留量检验方法》。本标准与SN0654—1997《出口水果中克菌丹残留量检验方法》相比，主要技术变化如下：——标准名称修改为《出口水果中克菌丹残留量的测定气相色谱法和气相色谱-质谱/质谱法》；——增加了梨、橘子、橙子、桃、桑葚、葡萄、猕猴桃、草莓、橄榄、荔枝、芒果、香蕉、火龙果、西瓜、香瓜等基质，删除了抽样环节；——修改了样品前处理方法，固相萃取法改为基质分散固相萃取法；——重新修订了方法的定量限：气相色谱法为0.02mg/kg，气相色谱-质谱/质谱联用法为0.01mg/kg；——采用气相色谱法替代了原标准中的高效液相色谱法；——增加了气相色谱-质谱/质谱法为确证方法。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国郑州海关。本标准主要起草人：张守杰、刘胜男、乔晴、华向美、孙武勇、祝伟霞、张淑霞、王素方、张玉娟、庞文月、辛莹。本标准所替代标准的历次版本发布情况为：——SN0654—1997。出口水果.indd12020/1/1620:09:19出口水果.indd22020/1/1620:09:191SN/T0654—2019出口水果中克菌丹残留量的测定1范围本标准规定了出口水果中克菌丹残留量的气相色谱和气相色谱-质谱/质谱检测方法。本标准适用于苹果、梨、橘子、橙子、桃、桑葚、葡萄、猕猴桃、草莓、橄榄、荔枝、芒果、香蕉、火龙果、西瓜、甜瓜等水果中克菌丹的测定。2　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3　方法提要试样中的克菌丹经磷酸溶液浸泡，用乙腈涡旋振荡提取，基质分散固相萃取净化后，注入气相色谱仪或气相色谱-质谱/质谱联用仪测定测定，外标法定量。4　试剂除另有规定外，所有实验用试剂均为分析纯，实验用水符合GB/T6682中一级水的要求。4.1　正己烷：色谱纯。4.2　乙腈：色谱纯。4.3　键合硅固相萃取吸附剂填料伯仲胺PSA（primarysecondaryamine）：粒度40μm~70μm。4.4　键合硅固相萃取吸附剂填料十八烷基硅烷键合硅胶C18（ostade-cylsilane）：粒度40μm~70μm。4.5　石墨化碳黑填料GCB（graphitizedcarbonblack）：粒度40μm~70μm。4.6　氯化钠。4.7　无水硫酸钠：550℃马弗炉内烘4h，200℃时取出置于干燥器内冷却后装瓶备用。4.8　磷酸。4.9　磷酸溶液（10%）：量取10mL磷酸（4.8）溶于水中并用水定容至100mL。4.10　克菌丹标准品（Captan，C9H8Cl3NO2S，CASNO：133-06-2）：纯度≥99%。4.11　克菌丹标准储备溶液：准确称取适量克菌丹标准品，用正己烷配制成浓度为0.1mg/mL的标准储备液，棕色瓶中于0℃~4℃冰箱中保存。4.12　克菌丹标准工作溶液：吸取适量标准储备溶液（4.11）用正己烷稀释成合适浓度的标准工作液。4.13　有机相滤膜：0.22μm。5　主要仪器和设备5.1　气相色谱仪：带电子捕获检测器。出口水果.indd12020/1/1620:09:192SN/T0654—20195.2　气相色谱-质谱/质谱仪：配备EI源。5.3　天平：感量为0.1mg和0.01g。5.4　氮吹仪。5.5　涡旋混合器。5.6　离心机：转速≥5000r/min。5.7　超声波发生器。5.8　刻度离心管：15mL。6　样品制备与保存从所取全部样品中取出代表性样品约500g按照GB2763要求处理，用捣碎机全部磨碎混合均匀，均分成两份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标记，于-18℃以下冷冻存放。在样品制备和保存过程中，应防止样品受到污染或者发生残留物含量的变化。7　测定步骤7.1　提取称取5.0g试样（精确至0.01g），置于50mL离心管内。加5mL10%磷酸溶液（4.9）浸泡5min，加入25mL乙腈（4.2）和7g氯化钠（4.6）剧烈涡旋振荡混匀提取10min，在5000r/min下离心5min，取10mL上清液于15mL具塞试管内待净化。7.2　净化在上述装有上清液的具塞试管内加入100mgPSA填料、50mgC18填料和30mgGCB填料，充分涡旋1min，5000r/min离心1min，准确移取5ml净化液至15mL具塞试管内在40℃下氮吹至近干，加入1.0mL正己烷（4.1）溶解残渣并超声15s后加入0.1g无水硫酸钠（4.7）除水，涡旋1min，过0.22μm滤膜，注入气相色谱仪或气相色谱-质谱/质谱联用仪分析。7.3　测定7.3.1　仪器条件7.3.1.1气相色谱参考条件如下：a）色谱柱：HP-5，柱长30m，内径0.32mm，膜厚0.25μm或同等性能的色谱柱；b）柱温度程序：初始温度50℃保持1min，以8℃/min升温至180℃，保持1min，再以20℃/min升温至300℃，保持2min；c）进样口温度：240℃；d）检测器温度：300℃；e）载气：氮气（纯度≥99.999%），1.0mL/min；f）尾吹气：氮气（纯度≥99.999%），30mL/min；g）进样方式：不分流进样；h）进样量：1.0μL。7.3.1.2气相色谱-质谱/质谱参考条件如下：a）色谱柱：HP-5MS，柱长30m，内径0.25mm，膜厚0.25μm或同等性能的色谱柱；出口水果.indd22020/1/1620:09:193SN/T0654—2019b）柱温度程序：初始温度50℃保持1min，以10℃/min升温至200℃，保持1.5min，再以20℃/min升温至300℃，保持2min；c）进样口温度：260℃；d）色谱-质谱接口温度：280℃；e）离子源温度：180℃；f）载气：氦气（纯度≥99.999%），1.0mL/min；g）离子源：电子轰击源（EI源）h）进样方式：不分流进样，1.5min开阀；i）进样量：1.0μL；j）溶剂延迟：5min；k）扫描方式：多反应离子监测模式（SRM）；其母离子m/z147.97，子离子m/z分别为104.87*、78.97、69.93。a7.3.2　气相色谱法测定根据样液中待测物含量情况，选定含量相近的标准系列工作溶液。标准工作溶液和样液中待测农药的相应值均应在仪器的线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，克菌丹保留时间约为18.81min，标准品的色谱图参见附录A中图A.1。7.3.3　气相色谱-质谱/质谱法测定及确证根据样液中被测物的含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中克菌丹的响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。如果样液与标准工作溶液的选择离子色谱图中，在相同保留时间处有色谱峰出现，并且在扣除背景后的样品质量色谱图中，所选离子均出现，所选择离子的丰度比与标准品对应离子的丰度比，其值在允许范围内（允许范围见表1），则可确定样品中存在对应的被测物。在7.3.1.2条件下，克菌丹的保留时间为18.94min，其气相色谱-质谱/质谱MRM图见附录A中图A.2。表1定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度/%＞50＞20~50＞10~20≤10允许的相对偏差/%±20±25±30±507.3.4空白试验除不称取试样外，均按上述测定条件和步骤进行。8　结果计算与表述用GC或GC-MS/MS数据处理系统或按式（1）计算试样中克菌丹的残留量：mAVcAXs×××=……………………………（1）式中：X——试样中克菌丹的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；*为定量离子。出口水果.indd32020/1/1620:09:194SN/T0654—2019A——样品中克菌丹的峰面积；c——标准工作溶液中克菌丹的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；V——样品最终定容体积，单位为毫升（mL）；As——标准工作溶液中克菌丹的峰面积；m——最终样液所代表的试样质量，单位为克（g）。注：计算结果需将空白值扣除。9　测定低限与回收率9.1　测定低限本方法的测定低限气相色谱法为0.02mg/kg，气相色谱-质谱/质谱联用法为0.01mg/kg。9.2　回收率样品的添加浓度及回收率的实验数据见表2、表3。表2不同基质的添加浓度、回收率（GC-ECD）基质添加水平（mg/kg）回收率/%苹果0.0279.0~101.04.080.5~100.525.080.0~102.0橘子0.0271.0~97.54.081.8~96.525.080.3~85.2梨0.0281.0~99.04.082.0~99.525.085.2~102.4橙子0.0278.5~92.04.080.5~91.825.087.6~91.2猕猴桃0.0270.1~95.6580.1~96.92080.7~106.9西瓜0.0271.2~100.3582.6~102.51081.0~104.5出口水果.indd42020/1/1620:09:195SN/T0654—2019基质添加水平（mg/kg）回收率/%香蕉0.0271.0~98.9582.4~99.61080.9~101.2甜瓜0.0271.6~98.6582.6~104.91085.7~103.6桃0.0274.8~103.2580.0~100.82081.2~106.5桑葚0.0275.6~99.5579.9~106.91081.6~101.1葡萄0.0271.2~98.5382.6~102.4580.1~99.5草莓0.0272.5~100.2581.0~104.280.2~103.7橄榄0.0269.8~91.2578.9~100.41080.5~101.9荔枝0.0270.0~95.2579.9~102.31081.2~106.1芒果0.0270.2~98.3580.1~100.51081.6~106.2火龙果0.0271.2~99.5581.2~100.91082.1~104.2续表出口水果.indd52020/1/1620:09:196SN/T0654—2019表3不同基质的添加浓度、回收率（GC-MS/MS）基质添加水平（mg/kg）回收率/%苹果0.0179.0~102.04.080.7~97.525.084.0~98.4橘子0.0171.0~92.04.081.0~87.025.080.0~86.0梨0.0184.0~103.04.082.5~96.025.089.6~108.4橙子0.0175.0~87.04.081.5~97.525.081.6~94.4猕猴桃0.0169.5~95.1571.2~102.32081.6~103.5西瓜0.0171.5~99.1580.6~105.21080.9~105.6香蕉0.0172.0~99.6580.5~100.71082.7~103.1甜瓜0.0173.1~95.9581.0~102.01079.9~102.0桃0.0168.9~98.2581.2~100.32080.7~102.2桑葚0.0