蔬菜的质量安全与检测技术1209

蔬菜抽样工作要点与快速检测技术芮三亚南京市农产品质量检测院抽样工作注意事项抽样的重要性抽样是检测工作中的重要步骤，是保证监测结果是否具有公正性和代表性的重要环节，抽样工作的质量，直接影响到检验检测工作的质量，因此要高度重视，并认真规范地做好这项工作。抽样工作注意事项农产品抽样常见标准GB/T8855-2008新鲜水果和蔬菜取样方法NY/T5344.1-2006无公害食品产品抽样规范第1部分通则NY/T5344.25344.4-2006无公害食品产品抽样规范第2部分：粮油第4部分：水果NY/T2103-2011蔬菜抽样技术规范–替代NY/T5344.3-2006•NY/T2102-2011茶叶抽样技术规范–替代NY/T5344.5-2006NY/T896-2015绿色食品产品抽样准则(2004作废)抽样工作注意事项抽样批次（样品数）的确定当蔬菜种植面积小于10hm2时，每1~3hm2设为一个抽样批次；当蔬菜种植面积大于10hm2时，每3~5hm2设为一个抽样批次。在蔬菜大棚中抽样，每个大棚为一个抽样批次。如基地大棚数量多，则抽取部分大棚作为抽样单元。抽样工作注意事项样品的“5同”性同一区域、同一品种或种类、同一成熟度、同期采收、同一生产管理方式的蔬菜为一个抽样单元（一个样品批次）。抽样工作注意事项抽样原则–随机性–代表性–适时性–适量性–可行性–公正性抽样工作注意事项抽样的随机性抽出的用以评定整批产品的样品，应是不加任何选择的，按随机原则抽取。生产地抽样时，应避开病虫害等非正常植株。抽样工作注意事项抽样的代表性抽样所得的样品应具有足够的代表性，应是以从整批产品中所取出的全部个别样品（份样）集成大样来代表整批产品，不应以个别样品（份样）或单株或单个个体来代表整批。每个抽样批次内根据实际情况按对角线法、梅花点法、棋盘式法、蛇形法等方法采取样品，每个抽样批次内抽样点不应少于5点。抽样工作注意事项抽样的适时性田头抽样应在产品成熟期或上市前进行。严格执行休药制度，施用过农药的蔬菜必须在规定的安全间隔期满后才能采收、上市，才能抽样检测。抽样工作注意事项蔬菜体内农药残留量与该农药的使用次数及最后施药距采收时间的长短关系密切，只有按规定的使用次数以及在过了规定的安全间隔期采收才能保证蔬菜体内的农药残留量不超过相关标准的规定要求。农药的安全间隔期及同茬上的允许使用次数，因不同的农药品种及不同的作物类型而不同。在蔬菜上使用，具体可参照GB／T8321《农药合理使用准则》（1--9）及GB4285—89农药安全使用标准，生产者在使用时要严格掌握。抽样工作注意事项抽样的适量性抽取的样品数量因不同的抽样方法及不同的品种类型而存在差异。总体上样品数量2-3kg，个体大的蔬菜如甘蓝、花菜、大白菜、冬瓜等应不少于3-6个，食用菌至少1kg，个体不少于12个。GB/T8855-2008新鲜水果和蔬菜取样方法小个体样品中等个体样品大个体样品较大个体样品抽样工作注意事项抽样的可行性抽样的方法、使用的工具及样品数量应是合理可行、切合实际的，符合样品检验的要求，应在确保随机性、代表性的基础上做到快速、经济和可操作性强。抽样工作注意事项抽样的公正性抽样工作应在的机承担任务构主持下完成，抽样人员应亲自到现场抽样。受检单位人员可陪同抽样，但不应干扰已定抽样方案的实施。抽样工作注意事项抽样准备–抽样方案的编制抽样时间、地点抽样人员所抽样品的名称和数量抽样程序（方法）所抽样品的包装、处理和运输–抽样用品的准备文件类工具类抽样工作注意事项抽样人员–抽样人员应经过培训，取得相应的资质。每一抽样点抽样人员不应少于2人，至少其中一人应负责对抽样工作程序的具体实施及相关情况的协调处理。抽样工作注意事项–抽样程序主动出示有关文件、证件，说明抽样内容。随机抽取符合要求的样品。样品应进行购买。做好有关调查。推荐使用一次性手套，保证不造成二次污染。抽样人员与受检单位人员共同确认样品的真实性和代表性，认真填写抽样工作单。特殊情况不能抽样，及时向任务下达单位汇报样品应放入塑料袋。封条双方签字。样品袋加贴样品的标识。样品尽快带回实验室处理。抽样工作注意事项样品运输–高温季节样品运输应选择保持低温的容器。–样品应在24h内运送到实验室，否则应缩分冷冻后运输。原则上不准邮寄和托运，应由抽样人员随身携带。–除非征得实验室同意，样品不宜在星期五或法定节假日前一天送达。–样品运输过程中，应有措施保证样品完整、新鲜，避免被污染。样品缩分与制备用于农药残留检测的样品–应选择整洁、无污染的场所，将封存的样品取出，用干净纱布轻轻擦去样品表面的附着物。如果样品黏附有太多泥土，可用流水冲洗，并擦干。个体较小的样品（如樱桃番茄）可随机取若干个体切碎混匀；个体较大的（如大白菜、结球甘蓝）按其生长轴十字纵剖4份，取对角线2份，将其切碎，充分混匀。用四分法取不少于1Kg的混合样品放入组织捣碎机中制成匀浆，取二份各300g左右匀浆放入聚乙烯瓶中，在-16℃~-20℃条件下保存。样品缩分过程中，要注意避免工具间的交叉污染。样品缩分与制备用于元素（重金属)检测的样品–样品先用自来水冲洗，再用去离子水冲洗三遍，用干净纱布轻轻擦去样品表面水分。个体较小的样品（如樱桃番茄）可随机取若干个体切碎混匀；个体较大的（如大白菜、结球甘蓝）按其生长轴十字纵剖4份，取对角线2份，将其切碎，充分混匀。用四分法取不少于1Kg的混合样品放入组织捣碎机中制成匀浆，取二份各300g左右匀浆放入聚乙烯瓶中，在-16℃~-20℃条件下保存；或者四分法取样后放入烘箱中65℃烘干，同时测定样品水分，磨成干粉后放入密封容器中保存。目前果蔬中农药主要检测方法及标准☆检测方法1.快速检测法（如速测灵-新灵法和酶抑制法等）2.色谱检测法（气相色谱法和液相色谱法）3.色谱-质谱检测法（气相色谱-串联质谱法和液相色谱-串联质谱法）1.快速检测法GB/T5009.199-2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测（速测卡法及酶抑制法）GB/T18630-2002蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的简易检验方法（酶抑制法）目前果蔬中农药主要检测方法及标准快速检测法的特点快速检测法的优势是快速、低成本、简单易行。存在以下不足：①属定性的检测方法，不能按标准判定合格与否；②可检测的农药品种受限制，主要用于蔬菜中部分有机磷和氨基甲酸酯类农药的残留量检测；③可检测的蔬菜品种受限制，对某些种类的蔬菜中农药残留量的检测结果可能出现假阳性或假阴性；④酶的稳定性较差，一定要妥善保存（温湿度、保存期限等），以免失效影响检测结果；⑤酶源或酶的种类不同其灵敏度差异较大，绝大多数灵敏度不能达到国家标准对蔬菜农药残留限量标准的最低要求，势必造成误判。目前果蔬中农药主要检测方法及标准我国目前果蔬的主要检测方法及标准目前快速检测使用的主要是酶学法及化学法，酶学法主要有酶抑制率法及酶联免疫半定量快速检测法（用试剂盒检测），化学法如新灵2型已得到广泛使用，从90年代开始的1滴灵到2型产品，目前每年用新灵检测的样品数可达400万。农药中文名英文通用名毒性最低检出浓度（溶液）mg/kg最低检出浓度（蔬菜）mg/kg甲胺磷methanidophos高毒1～23～5氧化乐果omethoate高毒0.7～22～5对硫磷parathion高毒0.7～1.52～4甲拌磷phorate高毒0.3～0.71～2久效磷monocroto-phos高毒0.3～0.71～2倍硫磷fenthion高毒2～2.56～7杀扑磷methidathion高毒2～2.56～7敌敌畏dichlorovos中毒0.10.3克百威carbofaran高毒0.3～0.71～2涕灭威aldicarb高毒0.3～0.71～2灭多威methomyl高毒0.3～0.71～2抗蚜威pirimicarb高毒0.5～11.5～3丁硫克威carbosulfan中毒0.7～12～3甲萘威carbaryl中毒0.3～0.71～2丙硫克百威benfuracarb中毒0.3～0.71～2速灭威MTMC中毒0.5～0.81.5～2.5残杀威propoxur中毒0.3～0.81.5～2.5目前果蔬中农药主要检测方法及标准速测灵（新灵）检测原理洗脱方法的选择：有机磷农药大部分是触杀性农药，内吸作用相对较弱。喷洒后90%以上的农药都附着在叶片、果实表面。用50%的甲胺磷乳油1000倍液在青菜叶面喷雾，药后5天用气相色谱检测全叶残留为6~8ml/L左右，而叶片表面残留大于5ml/L。大量研究表明，叶片、果品表面残留是农药在蔬菜上残留的主要部分。检测对象表面应用高效洗脱液洗脱后进行农药残留检测是可行的。根据这一理论，我们配制了专用清洗液，这种清洗液属植物源多元表面活性剂，无毒、无污染，同时具有洗脱率高，对检测试剂显色反应没有干扰等特点，用这种专用清洗液进行清洗，清除率可达90%左右。速测灵最低检出农药浓度速测灵是快速检测有机磷农药残留的化学制剂,特别是对剧毒农药甲胺磷、对硫磷、水胺硫磷、氧化乐果等有较高的灵敏度,农药溶液的检测极限为＜1ml/L,蔬菜果品的农药残留检测极限为≤2ml/L。凡经本试剂检测通过的蔬菜农药残留量确保≤4ml/L,一般不会引起中毒事故。速测灵与酶抑制法比较检测方法酶液（片）法速测灵检测法检测农药种类有机磷氨基甲酸酯类有机磷检测农药数量与灵敏度约20种，但不同农药灵敏度差异很大，如甲胺磷的灵敏度溶液为1ppm，样品中2-3ppm，对硫磷、乐果、乐斯本等在7ppm以上常用有机磷均可检测，对剧毒农药甲胺磷、对硫磷等特别敏感，灵敏度为0.8-1ppm检测蔬菜品种只适用叶菜类,不适用韭菜、生姜、葱、蒜，辣椒、胡萝卜等不要剪得太细叶菜类、茄果类、豆类、水果等，不适用韭黄、马铃薯、萝卜、食用菌等速测灵与酶抑制法比较检测方法酶液（片）法速测灵检测法检测方式可在现场检测，但需要电源和附加设施更适合在菜场、生产基地、超市等现场使用,不需任何附加设施,是真正的便携式检测方法把菜样捣碎，组织液、色素等对透光率、吸光度有影响，干扰因素较多用专用洗脱液洗脱检测对象表面及表层组织中的残留农药,干扰因子相对较少成本一台检测仪加配套设施约1万元，另外还需购买酶源等易耗品，每样品检测费用1-2元左右一盒试剂30多元可测100个样品，每次检测成本0.3元，如用速测仪，每台200多元，每次检测成本小于0.4元速测灵与酶抑制法比较检测方法酶液（片）法速测灵检测法检测条件、检测时间要求较高。酶源的质量、酶的保存、温度、反应时间等均影响检测，还需专门训练的技术人员操作。每次检测时间30分钟以上。操作方法简便，对照说明书一般人员均可掌握。每次检测时间只需5－10分钟。快速检测需注意的问题1、是一种定性的检测方法，针对的对象是“放心菜”，检测合格后能确保食用后不会出现明显有害人体的情况即不发生中毒事件，尚不能保证达到国家对蔬菜质量安全标准的规定要求。2、不适合本产品检测的蔬菜不要检：速测灵法不适用韭黄、马铃薯、萝卜、食用菌、葡萄、草莓等，（非食用部分的叶片如番茄叶片、黄瓜叶片等也不要检）；用酶抑制法则韭菜、生姜、葱、蒜等不要检，辣椒、胡萝卜等果菜不宜剪得太细，否则容易出现假阳性。凡经水清洗过的产品也不适合本方法。3、速测灵检测时以来检测的蔬菜部位要做到四无：无破损、无虫孔；无蚜虫等害虫；无虫粪、蜜露；无泥土。否则会干扰检测结果。快速检测需注意的问题4、配置洗脱液的用水要干净，可用自来水，但不可取河水、井水、沟渠水及使用过的下脚水等。5、检测试剂要妥善保管，新灵试剂A液、B液要避光、密封、阴凉处保存；酶液及显色液要置冰箱内冷藏，使用前要确保试剂在有效期内，过期的试剂不可再用。6、移液到显色管时应到5毫升的刻度线上，移液过多或过少都会影响颜色的变化，显色时间长短视环节温度，夏天3-5分钟，冬天5-10分钟。7、用肉眼判定时一定要褪色十分明显或紫红色完全褪去，而且经多点取样，至少重复测定3次以上。快