双酶法水解玉米淀粉的工艺研究

双酶法水解玉米淀粉的工艺研究作者：张剑，易华锋，张开诚，林庭龙，ZHANGJian，YIHua-feng，ZHANGKai-cheng，LINTing-long作者单位：张剑,张开诚,林庭龙,ZHANGJian,ZHANGKai-cheng,LINTing-long(武汉工业学院化学与环境工程系,湖北,武汉,430023)，易华锋,YIHua-feng(英博金龙泉,孝感,啤酒有限责任公司,湖北,孝感,432100)刊名：酿酒科技英文刊名：LIQUOR-MAKINGSCIENCE&TECHNOLOGY年，卷(期)：2009，(3)被引用次数：0次参考文献(9条)1.BaksT.KappenFHJ.JanssenAEM.BoomRMTowardsanoptimalprocessforgelatinisationandhydrolysisofhighlyconcentratedstarch-watermixtureswithalpha-amylasefromB.licheniformis20082.WongDWS.RobertsonGH.LeeCC.WagschalKSynergisticactionofrecombinantα-amylaseandglucoamylaseonthehydrolysisofstarchgranules2007(02)3.PronpongS.SaovaneeD.SittiwatLEffectofglycationonstabilityandkineticparametersofthermostableglucoamylasefromaspergillusniger20054.CrabbWD.MitchinsonCEnzymesinvolvedintheprocessingofstarchtosugars19975.郭勇.郑穗平酶在食品工业中的应用19966.BradfordMMArapidandsensitivemethodforthequantitationofmicrogramquantitiesofproteinutilizingtheprincipleofprotein-dyebinding19767.张剑.张开诚.田辉混合酶水解水溶性淀粉的研究[期刊论文]-中国酿造2007(02)8.FellerG.PayanF.TheysFStabilityandstructuralanalysisofα-amylasefromtheAntarcticpsychrophilealteromonashaloplanctisA2319949.姜锡瑞.段刚新编酶制剂实用技术手册2002相似文献(10条)1.期刊论文李富伟.汪勇.汤海鸥.LiFuwei.WangYong.TangHaiou淀粉酶和糖化酶体外降解玉米淀粉的机理探讨-中国饲料2009,(16)本文采用淀粉酶、糖化酶的单酶及其复合酶进行玉米淀粉水解的试验.研究发现,淀粉酶、糖化酶分别在模拟畜禽小肠和胃内pH条件下表现出较好的酶活力;在酶单位添加量相同的条件下,淀粉酶的水解效率优于糖化酶;在pH4.6时淀粉酶与糖化酶的水解互作效应优于添加酶量相同的单一淀粉酶,低于单一糖化酶;在pH6.0时淀粉酶与糖化酶的水解互作效应优于添加酶量相同的单一糖化酶,低于单一淀粉酶.2.期刊论文王海燕.秦浚川.王敖全.唐国敏黑曲霉酸性α-淀粉酶基因和糖化酶基因对工业酒精酵母的整合及其共表达-微生物学报2004,44(4)用PCR合成的黑曲霉(Aspergillusniger)酸性α-淀粉酶(Acidα-amylase)的cDNA,构建了由酵母醇脱氢酶(ADH1)启动子和终止子引导表达,酸性α-淀粉酶自身信号肽序列引导分泌的表达元件,与黑曲霉糖化酶cDNA的表达元件同时插入由酵母rDNA序列引导同源整合的酵母YIp型表达载体pWHY中,构成双基因表达分泌质粒pWAG.采用pWAG与酵母YEp型G418抗性表达质粒的共转化,将两个基因表达元件整合到酒精生产酵母菌株AS2.346的染色体rDNA序列中,获得同时表达胞外酸性α-淀粉酶和糖化酶的双功能酒精酵母工程菌.3.学位论文王海燕黑曲霉酸性α-淀粉酶基因和糖化酶基因对工业酒精酵母的整合及其共表达2003为提高酒精发酵速度和发酵率，本研究将黑曲霉Aspergillusniger的酸性α—淀粉酶基因(acidalpha-amylase-encodinggene，acid-amy)和糖化酶基因(glucoamylase-encodinggene，glaA)，构建在同一个酵母整合型载体上，并通过与含G418抗性标记的自主复制型质粒对酒精生产酵母菌株2.346的共转化，将acid-amy和glaA同时整合在其染色体上，建成能同时分泌表达酸性α-淀粉酶和糖化酶的acid-amy/glaA双功能工程菌。首先通过聚合酶链式反应(PCR)技术从黑曲霉cDNA文库扩增acid-AMY的cDNA序列，将其置于酵母ADH1的启动子和终止子间，构成acid-amy表达元件，与由PGK引导表达的glaA表达元件同时克隆到酵母整合型载体上建成双基因表达质粒pWAG。将该质粒线性化后，与含G418抗性标记的自主复制型质粒pBEJ16共转化酒精酵母2.346菌株，将acid-amy和glaA整合在酵母染色体的rDNA序列中。将G418抗性的转化子接到淀粉培养基平板上，用碘蒸汽染色的方法检出七株产生透明水解圈的菌株。培养液的酶分析表明均为分泌酸性α-淀粉酶和糖化酶的菌株。这些菌株分泌的acid-AMY最适pH为3.0～4.0，在16℃也具有一定的活性。连续转移十次，七株菌的酸性α-淀粉酶均稳定表达，但有一株菌丢失了糖化酶活性。实验结果表明，将两种外源基因克隆在一个表达载体上，同时整合到酵母的染色体上，能够成功获得双功能工程酵母，两外源基因不会明显影响彼此的表达。但由于酵母有可能通过重组机制将其染色体上的外源基因切除或破坏，。因此为满足工业生产的需要，需进一步连续传代，从中筛选出稳定的双功能菌株。4.期刊论文顾旭炯.刘璘.楼坚.张承丽.GuXujiong.LiuLin.LouJian.ZhangChengli硅藻土共固定化淀粉酶和糖化酶的研究-饲料工业2006,27(18)以糖化酶和α-淀粉酶为双酶体系、硅藻土为载体,用吸附法同时固定了这两种酶,得到的最适的共固定化条件为硅藻土(g)∶糖化酶(U)∶淀粉酶(U)=1∶100∶160,pH值4.5～5.0,温度5～15℃左右,缓冲液为柠檬酸缓冲液.共固定化酶的性质为:最适pH值为5.0;最适温度为55℃;米氏常数Km=16.830mg/ml;最大反应速率Vmax=1.500mg/(ml·min),其稳定性良好.5.期刊论文顾旭炯.刘璘.朱巍.刘志强.张承丽.GUXu-jiong.LIULin.ZHUWei.LIUZhi-qiang.ZHANGCheng-li海藻酸钠包埋法共固定α-淀粉酶和糖化酶的研究-化学与生物工程2006,23(5)以海藻酸钠为载体,用包埋法共固定α-淀粉酶和糖化酶双酶体系,研究了共固定化过程中双酶的比例、pH值、温度对共固定化后体系稳定性的影响,并探讨了此双酶体系在热稳定性、储藏稳定性、连续使用稳定性方面的效果.6.学位论文史一一荞麦淀粉酶水解特性研究2007为掌握荞麦淀粉水解特性，本研究以商品荞麦淀粉为材料，在系统分析荞麦淀粉的颗粒形态、晶体结构及糊化特性等物理性质的基础上，对荞麦淀粉的酶水解条件及其动力学特性进行了研究，研究结果如下：中温α-淀粉酶与真菌α-淀粉酶对荞麦淀粉的水解转化率均超过99.5％，两种酶按不同比例混合使用对荞麦淀粉的水解转化率更高。以DE值为水解评价指标，真菌α-淀粉酶对荞麦淀粉的水解能力较强，水解度(DE)与温度(X,1)、pH值(X,2)、底物浓度(X,3)、酶用量(X,4)的二次回归方程为Y=63.31-1.80X,1+2.55X,2+0.79X,4-1.44X,1'2+1.95X,1X,2-1.41X,2'2-0.27X,3'2。真菌α-淀粉酶水解荞麦淀粉的适宜条件为温度54℃、pH6.0、底物浓度5％、酶用量为130U·g'-1，荞麦淀粉水解液DE值达65.80％。真菌α-淀粉酶在水解荞麦淀粉的初期，反应遵循一级反应规律，符合经典Michaelis-Menten方程的曲线特征，动力学参数V,m为1.587mg·(mL·min)'-1、K,m为5.470mg/ml。动力学模型在303.15～333.15K，即30～60℃的温度范围内适用。中温α-淀粉酶和糖化酶对荞麦淀粉具有明显的协同水解作用，适宜pH值为5.2、温度为55℃。两种酶对荞麦淀粉的水解反应均遵循Michaelis-Menten方程规律，中温α-淀粉酶的米氏常数K,m为21.200mg.mL'-1，最大反应初速度V,m为1.482mg·(mL.min)'-1：糖化酶的米氏常数K,m为3.131mg.mL'-1，最大反应速率V,m为0.600mg·(mL·min)'-1；抑制常数K,i为0.283mg.mL'-1。双酶水解荞麦淀粉的水解度(DE)与糊化前中温α-淀粉酶用量(X,1)、糊化后中温α-淀粉酶用量(X,2)、糖化酶用量(X,3)、糖化温度(X,4)的二次回归方程为Y=93.2567+0.9146X,1+3.4612X,3+2.3846X,4-1.1851X,1'2-0.6738X,2'2-2.0413X,3'2-2.9951X,4'2+0.9694X,2X,4-0.9744X,3X,4。在糊化前中温α-淀粉酶用量为61.87～66.26U·g'-1、糊化后中温α-淀粉酶用量20.89～24.64U·g'-1、糖化酶用量为30.98～37.14U·g'-1、糖化温度为60.85～62.28℃的条件下，荞麦淀粉的水解度达90％以上。耐高温α-淀粉酶水解荞麦淀粉遵循Michaelis-Menten方程，其米氏常数K,m为4.967mg.mL'-1，最大反应速度V,m为0.345mg·(mL.min)'-1。耐高温α-淀粉酶水解荞麦淀粉适宜液化条件为：荞麦淀粉质量分数25％，温度83℃，pH6.5，酶用量40U·g'-1淀粉，液化时间为15min，荞麦淀粉液化液糖化后的DE值可达89.87％。在糖化温度为60℃，pH4.5，糖化酶用量为100U·g'-1淀粉的条件下，荞麦淀粉糖化液的水解度达到96.52％。7.会议论文宜兴杰成生物工程有限公司杰成牌耐高温α-淀粉酶和高转化率糖化酶在淀粉制糖工业中的应用2001近年来,我国味精、柠檬酸、酒精以及淀粉糖等诸多生产企业,都应用了杰成牌耐高温α-淀粉酶和高转化率糖化酶,反应普遍良好.在生产应用过程中,公司和诸多企业的工程技术人员共同总结了一套液化糖化工艺,本文将工艺要点介绍,请领导和专家指正。8.期刊论文刘爱国.陈庆森.祁兵.林桂兰淀粉酶和糖化酶在冷冻食品中的应用研究-食品科学2004,25(4)本实验采用α-淀粉酶对冷食品中的淀粉进行水解,淀粉经α-淀粉酶液化水解生成糊精和一些还原糖,并用糖化酶糖化使其生成葡萄糖.由于葡萄糖的增加降低了浆料的冰点,使冷食品组织状态更加完善.同时由于改变淀粉的分子结构,可以防止淀粉老化返生,消除淀粉味感;增加淀粉的用量,降低白砂糖,奶粉,奶油的用量,从而降低产品的生产成本.9.学位论文顾旭炯双酶体系的共固定化及其动力学研究2006本文选取工业上较为常用、价格低廉的硅藻土和海藻酸钙为载体分别用吸附法和包埋法共固定化α-淀粉酶和糖化酶双酶体系。其方法简单，操作简便，成本低廉，更适合工业化大生产。本文研究了双酶比例和固定化条件对两种共固定化酶反应速率的影响。得到硅藻土共固定化双酶体系的最佳共固定