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临床输血学与检验09级医学检验(3)班绪论1、概念:血液是一种特殊的药物,输血是一种治疗措施。目的:安全,有效,经济2、输血过程中需要解决的问题:①血液凝固→抗凝剂(枸橼酸钠)②污染→无菌技术③血型→ABO血型④保存→建立血库(添加保存液,低温保存)⑤器材改进3、输血的基本内容:管理体系,血源,血液免疫学(血型),血液制备(预备,成分输血),临床输血(成分输血),不良反应与传染疾病。4、输血的发展趋势:①进一步提高输血的安全性②采供血集中化③无偿献血:义务献血和建立固定的无偿献血人群④合理输血(成分输血)⑤新技术的应用:血液代用品;胰岛素;EPO⑥输血的信息化管理输血安全输血的主要风险:1、经血液传播的传染病:肝炎、HIV等2、免疫性不良反应:血型不符输血安全的措施:1、输血管理:固定无偿献血人群,献血者的筛查。2、血液的制备:为成分输血做准备,保证输血的质量管理。3、血液的检测:实验室管理体系。严格规范操作,降低输血传播疾病,确保输血安全的有效手段。4、输血管理:a血液免疫学检查b强制性的筛查:血型鉴定,传染性疾病的筛查c合理用血:严格把握输血特征,输血新技术(成分输血、自身输血、白细胞过滤),血液替代用品d输血不良反应的检测与报告,形成制度化。安全献血1、献血者种类:无偿献血者:风险最小,包括固定无偿献血者和志愿无偿献血者有偿:风险最大替代:也叫家庭献血者,血液有明确的去向。特殊:非常稀有的血型。2、固定无偿献血者:至少献血三次并且保持每年至少献血一次的人(或一有电话联系就前来献血的人)3、建立一支无偿献血者队伍是保证血液供应的有效方法:建立相关的法律法规体系,提高全民族的修养,全方位动员,教育,招募献血者。4、献血者的检查:病史,体检(年龄、体重、血压、脉搏、呼吸等),实验室检查(血型、血红蛋白、ALT、传染病)。5、为什么提倡无偿献血?无偿献血整体素质高,有稳定收入,存在高危行为情况少,新感染病毒几率低,因而处于窗口期的几率低,所以无偿献血者为“低危”献血者。从他们身上采集的血液安全性好。有偿献血者的素质决定他们新感染病毒的几率高,处于窗口期的几率远高于无偿献血者。免疫血液学血型:至一个人红细胞上所带有或缺乏的某一类特异性物质ABO血型系统:㈠抗原①种类:H、A、B②遗传:——a、基因——Hh基因此为基础基因,产生H抗原ABO基因——A-AgB-AgSeSe基因-分泌型b、ABO基因遗传规律③生化——结构:磨砂的糖蛋白→结构差异决定抗原的特异性多肽决定抗原的强弱转化:H→基础抗原,形成A、B抗原血型物质(血液中存在的ABO血型,也称分泌型):包括:a、醇溶性,位于细胞膜上b、水溶性,存在于体液中。作用:辅助血型的鉴定、混合血浆的使用、注射动物得到高效价的抗血清④亚型:A1和A2两种亚型——A1:A-Ag与A1-AgA2:A-Ag用抗A1的血清来鉴定A1与A2型意义:血型鉴定、干扰交叉配型㈡抗体:体内——天然抗体(不明显原因产生)—IgM为主(冷抗体、完全抗体、室温下反应)免疫抗体—IgG为主(温抗体、不完全抗体、37度反应)体外→McAb、人工抗体检测:取唾液:含有大量血型物质㈢血型鉴定:①正定型:标准血清与受检红细胞②反定型:标准红细胞与受检血清原则:正定型与反定型相统一为什么说ABO血型最重要?1、ABO血型抗原存在于各个细胞中(除神经细胞),此外体液中也含有ABO血型物质2、ABO血型抗体中天然抗体与红细胞膜上的抗原对应Rh血型系统抗原种类:D、C、E、e、c抗原强弱:DECce遗传:基因→Dd基因Ee、Cc连续基因生化:结构为结膜多肽,仅存在于红系中,没有水溶性物质(不存在血型物质)亚型:D型产生原因Ig检测条件介质血型反应是否通过胎盘主成天然抗体不明IgM室温、冷抗体盐水介质法被中和不能抗A、抗B免疫抗体明显IgG37度、温抗体特殊介质法不被中和能抗A、抗B、抗H抗体:几乎都是免疫抗体,只有极少数天然抗体血型血清学鉴定血型鉴定:1、ABO血型:①正定型(试管法、玻片法)a、标准血清b、单抗标准血清的条件:特异性,亲和力,效价抗A1:128、抗B1:64,灭活补体(56度、30分钟),不能存在冷抗体、冷凝集素1:4②反定型条件:室温,盐水介质法(只能检测ABO血型的天然抗体)2、Rh血型:只有正定型(无天然抗体)a、标准血清b、单抗方法:①酶介质法(只能检测免疫抗体):生理盐水加酶原理:降低zata电位,使红细胞凝集直接法:37度,1h离心观察间接法:先处理红细胞②抗人球蛋白实验:被检者红细胞充分洗涤(生理盐水8次以上),将膜上蛋白质充分洗去,其他球蛋白除去直接法:红细胞+抗人球蛋白试剂。阳性说明含有与红细胞膜抗原相对应的免疫球蛋白。间接法:免疫抑制实验,待测红细胞+已知抗体血清,37度孵育一小时,加入生理盐水洗涤,再加抗人球蛋白试剂。发生凝集为阳性。既能检测免疫抗体,也能检测天然抗体直接combs与间接combs区别。直接为体内致敏,间接为体外致敏,检测不完全抗体。配血试验目的:①对反定型的补充②找到受血者的其他抗体方法:主侧管:受者血清+供者红细胞次侧管:供者血清+受者红细胞ABO血型→试管法—盐水介质法Rh血型——酶介质法IAT聚酰胺介质法(配血试验主要方法)原理——聚酰胺液(高价阳离子液)—中和zata电位LISS(低离子强度溶液)—加强聚酰胺液的作用解聚液—解聚则没有抗原抗体反应,反之则有评价:优点:可检测免疫性抗体、不能检测天然抗体,简单、快捷缺点:假阳性高,不适宜做血型鉴定血型鉴定与配血试验错误分析假阳性:①红细胞凝集:假凝集②H凝集:全凝集血清—病人血清中出现抗H,可与所有O型血红细胞发生凝集反应③T凝集:全凝集红细胞—正常人血清中存在抗T,RBC膜表面存在无活性的T抗原,在微生物感染情况下转变为有活性的T抗原,此种红细胞能够与所有的A,B型血清发生凝集反应。假阴性:①抗体封闭:②存在大量的血型物质③新生儿红细胞抗原弱新生儿溶血病概念:广义→所有先天性的狭义→母婴血型不合而引起胎儿或新生儿的免疫性溶血疾病(HDN)发生机制:孕妇体内产生抗胎儿红细胞的免疫抗体临床特点:贫血(溶血)、黄疸主要症状:水肿,黄疸,贫血,肝脾肿大,胆红素胆病诊断:1、常规:血常规、血胆红素2、①产前学检查:母亲是否有IgG存在②产后检查:即新生儿检查,是否存在抗自身抗体,方法:ABO、Rh血型定型,DAT,释放试验(检测致敏红细胞),游离抗体检测治疗:药物治疗,血浆置换术,宫内输血,剖宫产HLA系统1、基因——I类:A、B、CII类:DP、DQ、DRIII类2、结构:糖蛋白3、分布:I类:所有有核细胞表面,淋巴细胞含量最高II类:APCIII类:以可溶性形式存在于血浆中。4、遗传特点:1、单体型遗传方式2、二倍体3、多态性现象4、连锁不平衡规律5、检测方法:①血清学→微量淋巴细胞毒试验②细胞混合培养③分子生物学6、应用:1、临床:输血,器官移植,与疾病相关,法医2、生物学血液成分制备定义:将采集出来的全血,用物理方法分离成体积小,纯度高,临床疗效好,不良反反应少的单一血液成分,如红细胞、血小板、血浆等的技术成为血液成分制备。可分为手工法和血液成分单采机方法。血液制品:①红细胞制品:a浓缩制品:适用于重度贫血患者b:悬浮红细胞:目前应用最广泛c:洗涤红细胞:适用于输全血或血浆蛋白过敏而又要输全血,AIHA,HDN,宫内输血和缺乏同型血时进行不同型红细胞相容性输注等患者d少白细胞的红细胞/去白细胞的红细胞:前者采用离心方法制备,仅可用于预防非溶血性发热反应,后者采用白细胞过滤制备,被广泛用于多次妊娠或反复输血产生非溶血性发热反应的患者,准备做器官移植的患者e年轻红细胞(Ret):主要适用于需长期反复输血者②血浆制品:a新鲜冰冻血浆b冷沉淀:新鲜冰冻血浆在4℃融化时底部有一层白色不融化的胶状物质,含有原血浆中大部分凝血因子VIII,保存温度不低于18℃,用于治疗甲型血友病。C血浆蛋白,常见的有白蛋白免疫球蛋白,凝血因子。单采术:将单采者或患者的血液成分从体内抽出,对立体的血液进行血液成分的分离,为了采集和治疗的目的,将分离的血液成分一种或多种保留下来,其他成分再回输给被采者的过程。新鲜血:根据治疗目的的不同,时间的不同,最长不超过7天,短的12小时内的血液,一般指保存5天内的全血血液保存保存液:抗凝剂(枸橼酸钠)+营养物(葡萄糖)=ACD保存液,PH5.0,低PH对ATP的保存有利,而对2、3-DPG,后者具有使红细胞以有效方式释放氧气的功能,有效期为21天ACD+磷酸二氢钠=CPD保存液,PH上升为5.6,改善了2、3-DPG保存环境,有效期为28天CPD+腺嘌呤=CPDA,进一步提高了ATP的保存和红细胞的存活,是保存期延长至35天保存温度:2度到6度容器:玻璃瓶或塑料袋为什么全血不全?全血不全即全血中各种成分虽然在同一采集器内,但包括红细胞在内的各种成分的生物活性,生理功能随保存液时间的延长,在不同程度的衰减,起不到它们在循环中的作用,另外目前用于全血的保存液主要是针对红细胞的特点设计的,并未考虑在4℃时对白细胞、血小板和不稳定凝血因子的保护作用。即使为红细胞设计的保存条件,随着时间的延长,其活力的丧失,氧亲和力也会下降。临床输血1、输注全血:㈠自体输血,包括新鲜血。优点:不考虑血型问题,传染病传播几率小,节约学源。缺点:技术局限,仪器设备不稳定,操作不当和人为差错。㈡异体输血,包括贮存式,稀释式,回收式2、输注全血的缺点①增加负荷,尤其大量输血②增加代谢负担③不良反应多④疗效差⑤资源浪费3、成分输血优点①疗效好②不良反应少③减少传染病的发生④便于保存,使用方便⑤一血多用4、成分输血的应用①补充血容量(血浆制品)②提高携氧能力(输注RBC)③提高止血能力(输注血小板,凝血因子)④提高免疫力(免疫球蛋白)⑤提高胶体渗透压(血浆蛋白)5、为何贮存血比新鲜血好?①输血主要的目的是纠正贫血,改善组织氧气的供应,保存期内的任何一天的全血均能达到这一要求②保存血能进行充分的检测③经血传播传染病的几率明显降低。6、更新一些观念①全血不全②贮存血比全血好③需要数新鲜血未必要输全血④尽量减少WBC的输注,特别是淋巴细胞⑤输血有风险,不良反应,传染病输血不良反应分类:按时间分:即发型反应,迟发型按发病机制分:免疫性:速发型,迟发型。非免疫性:急性,慢性常见输血反应:①发热,与HLA有关,最多见的即发型反应②过敏反应③溶血反应,最严重,死亡率最高④中毒反应,输入大量ACD保存血引起枸橼酸钠中毒,中毒性休克。发血程序常规:临床提出申请(24h内,特殊血型需要3d)→血型的鉴定(ABO,不完全抗体的筛查)→储存血液,先存先发(新鲜血除外)→配血试验→检查所发血液应无:标签不清、血袋无破损、溶血、凝块和气泡→查对核实(两人以上)→发出去的血原则上不退→保存血样急诊:①详细记录为什么不做配血试验②需将两者标本保存好,出问题后复查,必要时间向领导打电话,两人共同鉴定,同临床保持联系。
本文标题:临床输血学考试重点
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