EB血清学检测

EBV检测的临床应用及产品简介王璐欧蒙中国总部技术支持专线：4008989616欧蒙中国总部技术支持邮箱[e-mail]主要内容•EBV简介•所致疾病特点•推荐的检测策略•欧蒙所提供的产品EUROIMMUNEBV的特点•一种常见的疱疹病毒•潜伏感染普遍存在•我国约90%的个体为病毒携带者，多为婴儿时期感染。（婴儿期感染EB病毒，不产生症状，病毒在体内长期存在，表现为潜伏感染）EUROIMMUNEBV相关疾病及临床应用•传染性单核细胞增多症(InfectiousMononucleosis,IM)•鼻咽癌(NasopharyngealCarcinoma)传染性单核细胞增多症(InfectiousMononucleosis,IM)——EBV原发感染导致的疾病传单的发病•在婴儿时期未感染EBV的个体，在少儿或青春期初次感染EBV，即有约50%的个体会出现“传单”病症。EUROIMMUN临床症状•发热（38-40度）•淋巴结肿大•咽部疼痛•肝脾肿大•皮疹•神经系统症状（少数严重病例）¾本病属于自限性疾病，致死病例罕见（多为并发症所致）。临床症状多样且不典型。发病人群•发达国家：15-25岁高发•我国：多为学龄或学龄前少儿发病检测方法—嗜异性抗体•由多克隆B细胞产生，多为IgM型，具有一定诊断价值。•阳性率为80%左右，但在儿童患者中经常出现假阴性结果（四岁以下儿童不能产生此抗体）。•在其他感染，如HIV、风疹、细小病毒等。甚至在SLE、淋巴瘤等患者中可能出现假阳性结果。不适合于中国人群检测检测方法—病毒载量检测•在原发感染两周内，DNA水平达到峰值，然后回落到低点（甚至检测不到）•变化曲线会有个体差异，有些患者会在曲线下落后出现反弹。•DNA检测对于免疫抑制的非常态患者是一种有效的补充。血清学检测（主流方法）JournalofMolecularDiagnostics,Vol.10,No.4,July2008（IF=3.643）壳抗原CA-IgM壳抗原CA-IgG早期抗原EA-IgG核抗原NA-IgG血清学检测——传统策略CA-IgM单项检测——有一定诊断意义。——信息量少，结果不可靠。传统检测策略的问题部分新近EBV感染不出现CA-IgM抗体在个别情况下CA-IgM会持续存在约20-30%的新近感染不出现EA-IgG抗体抗EBNA-IgG抗体可能呈现阴性，由于：-慢性活动性EBV感染-细胞免疫被抑制传统检测策略的问题其他：•在个别情况下，CA-IgM会在复发或持续感染过程中产生可测出的应答•CMV感染可能造成CA-IgM假阳性推荐检测策略多个抗体指标同时检测CA-IgGCA-IgMEA-IgGNA-IgGCA-IgG亲合力++++实验证据•对临床明确确诊的58例传单患者进行EBV多种抗体检测，结果：Everythingispossible!结论：单纯依靠抗EBV-CA-IgM阳性来诊断传单，敏感性较低，结合EBV抗体谱和亲合力检测科提高诊断的敏感性诊断标准注：关于亲合力检测:低亲合力:高亲合力¾根据机体的免疫应答区分新近感染和既往感染抗体亲合力•高亲合力抗体：再次免疫¾既往感染；感染后复发•低亲合力抗体：初次免疫¾急性（原发）感染低亲合力抗体尿素高亲合力抗体尿素欧蒙EBV产品系列总览完整的解决方案EUROIMMUNEBV血清学检测：ELISA•提供包括VCA、EA、EBNA等所有关注靶抗原的各种类型抗体检测•IgG亲合力检测有效区分原发感染，弥补IgM方法学缺陷ELISA系列产品靶抗原抗体类型抗原及来源亲合力检测CAIgA/IgG/IgM感染EBV的人B细胞裂解物(IgM-只含天然gp125)提供EAIgA/IgG大肠杆菌表达的重组EA-D不提供NAIgG昆虫细胞表达的重组蛋白不提供EBV血清学检测:IIFTPatient1EBV-CA(IgG)EBV-CA(IgG)withureaEBV-CA(IgM)EBV-EA(IgG)EBNA(IgG)亲合力检测早期既往z真正的全参数检测！z血清学检测的标准方法！IFT系列-特点•可提供检测样本的EB病毒抗体谱，对于EB病毒相关疾病的诊断更加全面，提供的信息量更大。•将5个检测项目整合在一起，保证项目检测的平行性。•对于IgM检测使用了RF吸附剂，对于NA检测，采用了补体放大，保证了高质量的检测结果。欧蒙印迹法EBV谱（第二代）•所有相关抗原包被在同一膜条•可提供IgG和IgM抗体检测•可实现全自动操作•可通过EUROLineScan软件进行数字化结果分析EUROIMMUN欧蒙印迹法EBV谱（第二代）•VCAgp125:抗体在感染早期出现(可能随时间而消失)•VCAp19:抗体在感染早期和晚期均可出现•VCAp22:抗体在感染晚期出现，也可在EBNA-1抗体丢失后出现EUROIMMUN传单检测——总结•传单是EBV原发感染直接导致的疾病。患者多数为儿童或少年。•EBV特异性抗体检测是传单血清学诊断的主要方法。•多种抗体联合检测可有效提高传单的检出率和可靠性。•欧蒙公司可提供全面的整体解决方案，为临床诊断提供最详尽，且最准确的信息。EUROIMMUN鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma)——与EBV有明确关联的疾病NPC：nasopharyngealcarcinoma•发生于鼻咽粘膜的上皮性恶性肿瘤•分布具有明显的地域和人种倾向性•高发于我国东南沿海、台湾、东南亚、北非等地区。NPC病因•遗传因素（家族与种族聚集现象）•环境与饮食（甲醛接触、咸鱼与腌制食品）•与EBV感染联系紧密（相关度100%）（所有NPC患者体液及血清中均存在高于正常滴度值的EBV抗体）NPC发病特点•早期基本无症状，出现症状就医时基本已到晚期•早期治疗，5年生存率可达90%以上。晚期治疗，不超过20%（癌转移）•高发区人群中的体检筛查意义重大检测指标及方案评价应用CA-IgA敏感度好、特异性也不错初筛EA-IgA特异性极好，但敏感度稍逊验证z方案1：CA-IgA用于初筛，EA-IgA用于验证。z方案2：CA-IgA、EA-IgA同时检测，最大限度保证检出率与可靠性。检测方法-ELISAzCA检测试剂盒采用的是感染EBV的人B细胞裂解物，含有各种相关特异性蛋白抗原，最大程度保证检测敏感度。zEA检测试剂盒采用的是重组的EA-D蛋白，单一的包被抗原，保证检测的特异性。zELISA：技术成熟、标准化程度高、可全程自动化操作，是大样本量检测的首选方法实验证据z第三方通过欧蒙公司产品所得到的结果高灵敏度高特异性用EB抗体筛查鼻咽癌普查总人数CA-IgA阳性人数鼻咽癌检出人数53（10年追踪）188（不包含追踪病例）20726（高发区）113646795714576在我国广西地区普通人群中进行的大样本量普查研究显示：CA-IgA可以做为鼻咽癌高危地区人群普查的指标CA-IgA是目前唯一进行过大样本量普查研究的筛查指标。鼻咽癌筛查——总结•鼻咽癌在我国东南沿海各省为高发区。其发病与EBV感染有明确关联。•在高危人群中进行体检筛查非常有意义。•高灵敏度的CA-IgA与高特异性的EA-IgA配合检测是筛查鼻咽癌的最佳组合。EUROIMMUNThanks&anyquestions