7500-2.0相对定量简易操作流程

                                                                appliedbiosystems7500荧光定量PCR仪 相对定量实验简易操作流程 SDS2.0  相对定量实验简易操作流程  7500定量PCR仪相对定量实验简易操作流程 1.双击桌面图标，或从StartAllProgramsAppliedBiosystems7500Software7500V2.0开启软件。进入主界面后选择AdvancedSetup。2.默认进入Setup下的ExperimentProperties界面2.1输入实验名称（ExperimentName）2.2确认仪器型号3.22.3在实验类型中，选择Quantitation-ComparativeCT(△△CT)   2.4选择试剂种类 2.5确认运行模式3.进入Setup下的PlateSetup界面，编辑基因（Target）及样本（Sample）： 3.1在新中选MG如果还可以(Dele的基因，并选择所标记GB探针，请果是其他形以利用其他teTarget)。界并在Target记的荧光基请选择NFQ形式的非荧他按钮将之前利用界面中设置Name中编团及淬灭基Q-MGB；如果光淬灭基团前已添加的添相对定置基因及样品编辑基因名称基团。对于Q果是TAMR团（如BHQ的基因进行保添加新的样本定量实验简品。利用称，ReporQuencher的RA探针，请Q），请选择保存(SaveT本，并编辑简易操作流rter和Quen的选择，如请选择TAMR择None。Target)或删辑样品名称。流程 添加ncher如果是RA；删除。相对定量实验简易操作流程  3.2在进行样品板的排布。利用鼠标单击或拖拽以选择反应孔，然后勾选左侧的基因及样本，同时在Task选项中指定该反应孔的类型（U代表未知样本，N代表阴性对照）。4.在“Selectrelativequantitationsetting”中设置内参基因及对照样本。相对定量实验简易操作流程  5.进入RunMethod界面，设定反应条件及反应体积。6.点击，文件储存成ExperimentDocumentSingleFiles（*.eds）格式，然后在Run界面按下按钮，反应即开始进行。相对定量实验简易操作流程  7.实验结束后，点击界面右上角的Analyze按钮，软件将会显示实验结果：7.1在扩增图中（见上图），可通过更改PlotSettings来改变扩增图的显示方式。如果想查看阈值线或基线，请将Threshold及Baseline打勾。7.2查看相对表达量结果时，利用PlotSettings选项，可以以不同方式显示相对表达量的结果。相对定量实验简易操作流程  7.3对于SYBRGreen法实验，可以在MeltCurve界面中查看熔解曲线。Fig97.4检测QCSummary结果，可以快速查看实验中是否有反应孔存在异常情况。黄色三角形中的数字1代表有一种异常情况，2代表有两种异常情况，以次类推。详细信息及解决方案可以在FlagDetails中看到。8.分析之后的结果，可以利用菜单中的FileExport功能，导出Excel格式的结果。若想存储图片结果，可直接在图片上单击鼠标右键，选择Saveas，存成JPEG格式的图片。相对定量实验简易操作流程  相对定量实验简易操作流程