单克隆抗体

单克隆抗体什么是单克隆抗体单：克隆：抗体：单个细胞无性繁殖抗原————抗体特异性结合1.抗体是由何种细胞产生的？2.抗体是如何产生的？？单克隆抗体抗原动物体内刺激浆细胞抗体抗体不纯筛选单一浆细胞不能增殖产生大量抗体产量少、纯度低、特异性差单克隆抗体3、传统制备抗体的缺点是？3、传统制备抗体的方法是？如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？单克隆抗体问题讨论提示：1.什么样的细胞可以产生抗体？2.什么样的细胞可以无限增殖？瘤细胞和癌细胞有何区别？共同点：两者都有无限增殖的能力不同点：瘤细胞不能转移设计方案：一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖杂种细胞单克隆抗体单克隆抗体制备过程注射抗原B淋巴细胞骨髓瘤细胞细胞融合、筛选杂交瘤细胞细胞培养筛选，继续培养足够数量的、能产生特定抗体的细胞群体外培养注射到小鼠腹腔单克隆抗体（选择性培养基）选择性培养基：使亲本细胞不能存活而杂种细胞可存活单克隆抗体诱导其融合的方法有哪些？2.制备过程：诱导其融合的方法有哪些？融合后培养液中有几种细胞?怎样筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞有何优点?注射抗原的目的是什么?为何要进行克隆化培养和专一抗体检测，并多次筛选？获得单抗的方法有哪些？BBBB瘤瘤瘤瘤细胞融合后培养液中有几种细胞？筛选杂种细胞已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两条DNA合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，加PEG促融，获得杂种细胞。单克隆抗体思考：单克隆抗体思考：1.小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合？2.制备过程中应用哪些细胞工程技术手段？细胞的同源性越近，融合形成的杂种细胞越易成活细胞融合技术、细胞培养技术单克隆抗体①在基础理论研究中具有重要意义②在疾病诊断、治疗和预防方面，具有特异性高、灵敏度高等优越性。③生物导弹（作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤）单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用•应用:疾病的诊断、治疗和预防。•优点:特异性强、灵敏度高。•实例:1、各种癌症、肝炎病毒、SARS病毒、细菌及血吸虫等数百种疾病的诊断；2、在疾病治疗方面，单克隆抗体犹如人体卫士,能识别“自己”与“异己”，一旦发现致病因素便与之结合将其杀死。3、若在单抗上带上抗癌药物制成“生物导弹”，将药物定向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。小结两个过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法——灭活病毒一个新细胞——杂交瘤细胞一个优势——单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势单克隆抗体