自身抗体检测及临床意义(宁夏)李永哲

自身抗体检测及临床应用进展北京协和医院风湿免疫科李永哲LOGO临床经验积累和实验诊断技术进步,发病率↑其总体发病率占世界人口的3%美国:5%~8%；中国:3-4千万“5D”疾病：残废—disability死亡—death痛苦—discomfort药物副作用—drugreactions经济损失—dollarlost自身免疫性疾病（AID）AutoimmunehemolyticanemiaIdiopathicthrombocytopenicpururaNervoussystemMultiplesclerosisGuillain–BaresyndromeAutoimmunethyroiditisThyrotoxicosisThyroidAutoimmunehepatitisPrimarybiliarycirrhosis(PBC)LiverPancreasInsulin-dependentdiabetesmellitusGoodpastureSydromeCrescenticglomerulonephritisKidneyPemphigusvulgarisPemphigusfoliaceusSkinStomachIntestinesAtrophicgastritisUcerativeColitisCoellacDiseaseAdrenalAddisons’sdiseaseMuscleMyastheniagravisBloodHeartDilatedcardiomyopathyChronicmyocarditisOvaryTestisAuto-immuneinfertilityorgan-specificautoimmunedisease自身免疫病、风湿病和风湿免疫病风湿免疫病自身免疫病风湿病疾病诊断证据叠加特征性临床表现相关实验室检查疾病分类标准﹑诊断标准﹑专家共识自身免疫性疾病(AID)诊断体外诊断实验-实验室检查临床检验常规检查临床免疫学常规检查特殊实验室检查影像学检查组织病理学检查相关实验室检查自身免疫性疾病(AID)诊断自身抗体（autoantibidies）自身抗体:指抗自身细胞内、细胞表面和细胞外抗原成分的免疫球蛋白自身免疫应答和AID最重要特征某些AID伴有特征性自身抗体(谱)自身抗体临床意义诊断鉴别诊断病情评估治疗监测病程转归预后判断预警、预防个体化医疗自身抗体临床意义自身抗体相关性自身抗体标记性自身抗体生理性自身抗体非特异性自身抗体特异性自身抗体预警性自身抗体自身抗体临床价值分类临床应用：靶抗原特异性自身抗体总抗体特异性抗体纯化、合成肽、重组抗原检测方法：标准化、多元化、自动化检测质量：准确、快速，质量保证应用临床：迅速，临床应用周期变短自身抗体检测与临床应用进展1948:LEC50年代:ATM(1956)、ANA(1957)IIF60年代:anti-ENA,DID;AMA,ASMA70年代:IP,IB80年代:HEP-2;ANCA2000年代:自动化、高通量90年代:商业化40年代：RF（1940）自身抗体临床应用概况国外临床常规自身抗体检测项目已达百种以上系统性自身免疫病相关自身抗体ANAs、ANCAs、APLs、RF＆ACPs器官特异性自身免疫病相关自身抗体血液、消化、内分泌、神经、生殖、皮肤…特发性血小板减少紫癜、自身免疫性肝病、炎症性肠病、自身免疫性胃炎/恶性贫血、麦胶性肠病、自身免疫性甲状腺炎、1型自身免疫性糖尿病、副肿瘤综合征、多发性神经病变、重症肌无力、不孕/不育和自身免疫性大疱病等国内:临床常规项目少，普及性低，质量管理差自身抗体临床检测及应用ANCAsanti-PR3anti-MPO总抗体检测特异性抗体检测提高临床应用价值ASMAsanti-FactinAMAAMA-M2anti-Sp100anti-gp210anti-p62anti-LBR国家卫生计生委关于印发医疗机构临床检验项目目录（2013年版）的通知中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会国卫医发〔2013〕9号各省、自治区、直辖市卫生厅局（卫生计生委），新疆生产建设兵团卫生局：为适应医疗服务需要，提高临床检验水平，根据《医疗机构临床实验室管理办法》（卫医发〔2006〕73号），我委组织专家对2007年公布的医疗机构临床检验项目目录进行了修订，形成了《医疗机构临床检验项目目录（2013年版）》（请在国家卫生计生委网站“医政医管”栏目下载）。现印发给你们，自即日起执行，原卫生部印发的《医疗机构临床检验项目目录》（卫医发〔2007〕180号）同时废止。执行过程中遇到的问题请及时反馈我委医政医管局和卫生部临床检验中心。附件：《医疗机构临床检验项目目录》（2013年版）.xlsx国家卫生计生委2013年8月5日中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会临床准入注册证、收费自身抗体检测项目154项1100项自身抗体检测项目比较自身免疫病ARUP实验室克利夫兰实验室协和医院实验室CTD（SLE、MCTD、SS）ANA；dsDNA；ENA；C1q；核小体；组蛋白ANA；dsDNA；ENA；组蛋白ANA；dsDNA；ENA；核小体；C1q；组蛋白RACCPCCPCCP；AKA；APF、MCV；GPI；α-胞衬蛋白SScANA；ENA；PM/SCL；RNApolymeraseI/III；Th/To(7S/8SRNA)ANA；ENAANA；ENA；Mi-2；Ku；PM-Scl；Jo-1；PL-7；PL-12；Ro-52PM/DMJo-1;抗合成酶抗体：PL7,PL-12,EJ,OJ,KS,HA,Zo;非合成酶抗体：Mi-2,SRP,p155/140,HMGCR,MDA5,SA5,MJ;肌炎相关抗体：PM-Scl,U1RNP,U3RNP,Ku,pLA,topo,RO,5bKDa,hPMS1ANA；ENAANA；ENA；Mi-2；Ku；PM-Scl；Jo-1；PL-7；PL-12；Ro-52自身免疫病相关自身抗体自身抗体检测及临床应用存在问题实验室检测检测质量：定性，假阳性，假阴性，可比性差检测项目：不能满足临床需求，过度检测，收费临床应用项目选择：规范性报告解读：规范性ANA筛选试验抗dsDNA抗体抗ENA抗体抗Sm抗体：SLE标记性抗体（20%-30%）抗nRNP抗体：MCTD95-100%（高滴度）抗SSA抗体：PSS60-75%，其它CTD抗SSB抗体：PSS10-40%，其它CTD抗Scl-70抗体：SSc25-75%,标记性抗体抗Jo-1抗体：PM/DM25%，标记性抗体抗rRNP抗体：SLE特异性抗体（10%-30%）抗DNP抗核小体抗组蛋白抗体抗核抗体谱b抗核抗体谱（ANAs）分类根据细胞内靶抗原分子理化特性和分布部位将ANAs分类：抗DNA抗体（anti-dsDNA，anti-ssDNA）抗组蛋白抗体（histons:H1,H2A,H2B,H3,H4,H2A-H2B复合物）抗ENA抗体（抗体:Sm,nRNP,SSA/Ro,SSB/La,rRNP,Scl-70,Jo-1,PCNA,RA33,ANAs抗非组蛋白抗体Ku,RANA,Mi-1,Mi-2,PL-7,PL-12.）抗着丝点抗体（anti-CENP-A,B,C，D，F，G）抗核仁抗体（抗体:RNA-polymerase-1,PM-Scl/PM-1，Th/To,U3nRNP/Fibrillaria，4-6-S-RNA）抗其他细胞成分抗体（高尔基体，中心体，纺锤体，线粒体，溶酶体，肌动蛋白，Vimentin，细胞角蛋白，Lamin)系统性红斑狼疮(SLE)Lupusdoseseverything,butnoteverythingislupus.SLE自身免疫病典范发病范围广临床表现复杂多样实验室检查异常多见1982ACR1997ACR2012SLICCImmunologicabnormal2items2items6itemsPositiveanti-dsDNA,anti-SmorantiphospholipidantibodiesLEcellPositiveanti-dsDNA,anti-SmorantiphospholipidantibodiesPositiveANAPositiveANAPositiveANAPositiveanti-dsDNAAnti-SmAntiphospholipidantibodyLowcomplement(C3,C4orCH50)DirectCoombstestintheabsenceofhemolyticanemiaDiagnosisSatisfy4ormoreitemsSatisfy4ormoreitemsSatisfy4itemsClassificationCriteriaforSLEJournalofAutoimmunity48-49(2014)10-13Immunologiccriteria1.ANAlevelabovelaboratoryreferencerange2.Anti-dsDNAantibodylevelabovelaboratoryreferencerange(or2-foldthereferencerangeiftestedbyELISA)3.Anti-Sm:presenceofantibodytoSmnuclearantigen4.Antiphospholipidantibodypositivityasdeterminedbyanyofthefollowing:PositivetestresultforlupusanticoagulantFalse-positivetestresultforrapidplasmareaginMedium-orhigh-titeranticardiolipinantibodylevel(IgA,IgG,orIgM)Positivetestresultforanti–2-glycoproteinI(IgA,IgG,orIgM)5.LowcomplementLowC3LowC4LowCH506.DirectCoombs’testintheabsenceofhemolyticanemiaDerivationandValidationoftheSLICCClassificationCriteriaforSLEARTHRITIS&RHEUMATISMVol.64,No.8,August2012,pp2677–2686SLICC＝SystemicLupusInternationalCollaboratingClinicsAnti-Nucleosomesantibodies？Anti-ribosomalRNPantibodies？NegativeClinicalsuspicionofSLEANAaCL,LAPositivedsDNANucleosomeSmPCNARibPU1-RNPRo/SS-ALa/SS-B++++++++SLEverylikelySLEpossibleifotherconnectivetissuediseasesareexcludedSLEunlikelyK.MichealPollard.Autoantibodyandautoimmunity.2006-p264DecisiontreeofautoantibodytestinginpatientswithclincalsuspicionofSLEPathogenicAutoantibodiesinSLERahmanA.,etal.NEJM,24:172(2008)类风湿因子（RF）抗环瓜氨酸肽抗体（抗CCP抗体）抗角质蛋白抗体（AKA）抗核周因子（APF）抗聚角蛋白微丝蛋白抗体（AFA）抗MCV（Sa）抗RA33抗体葡萄糖-6-磷酸异构酶（GPI）抗原profilaggrin/filaggrin类风湿关节炎相关自身抗体