探究培养液中酵母菌种群数量的变化

培养液中酵母菌种群数量的变化基础回扣1、酵母菌酵母菌是单细胞真核生物。生长周期短，增殖速度快，还可以用酵母菌作为实验材料研究（探究酵母菌的呼吸方式，判断细胞的死活探究膜的透性）2、种群数量的变化种群数量的变化包括增长、波动、稳定、下降等“S”型曲线有一个K值，即环境容纳量。种群数量的增长也受到许多环境因素（如温度、培养液的pH、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等）的影响。探究过程•1．提出问题：•2．作出假设：•3．设计实验：•4．进行实验：•5．分析结果和表达交流：•6．得出结论：培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长，随着时间的推移，由于资源和空间有限，呈“S”型增长。连续培养5天，每天用显微镜和血球计数板计数出酵母菌种群密度各小组汇报实验结果，结合前4天的结果，画出酵母种群增长的曲线图并进行分析。酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长，但随着时间的推移，由于资源和空间有限，将呈“S”型增长，并最终将全部死亡。3．设计实验：•①将10mL无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中；•②将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀；•③将试管在28℃条件下连续培养5d；•④每天取样计数酵母菌数量；•⑤分析结果，得出结论。是否设置对照组和多组重复实验？如何取样计数？记录表怎样设计？计数时有哪些注意事项？计数室计数室（中间大方格）的长和宽各为1mm，深度为0.1mm，其体积为______mm3，合_________mL。1mm0.11×10-4血球计数板:一种专门计数较大单细胞微生物的仪器计数室计数室分为25中格（双线边）每一中格又分为16小格计数室是由___________个小格组成25×16=400如何计数？五点取样法样方法每mL培养液中酵母菌数量==A(平均每个中格酵母细胞数)×25×104×稀释倍数A1A2A5A3A4第1天第4天第6天第7天死亡酵母菌数量变化记录表计数时有哪些注意事项？①从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几次；如果酵母菌浓度过大，应先稀释。②对于压在中格界线上的酵母菌，一般只取相邻两边及夹角计数；③对于已经出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半时，即可作为两个菌体计算；已死亡的酵母菌不计数※。④每个样品一般计数三次，取其平均值。培养液中酵母菌种群数量的变化酵母菌种群个体数量变化0200040006000800010000120001234567时间／d酵母菌数量／万个·mL-1酵母菌种群个体数量变化0200040006000800010000120001234567时间／d酵母菌数量／万个·mL-1死亡在计数前，还应有哪些步骤？需注意些什么？•培养液配制•灭菌•接种•培养无菌操作培养条件试管编号培养液/mL无菌水/mL酵母菌母液/mL温度（℃）A10—0.128B10—0.15C—100.128针对“培养液中酵母菌种群数量的动态变化”，有人提出了新的问题，某同学按下表完成了有关实验。温度、营养物质对酵母菌生长的影响试管编号培养液/mL无菌水/mL酵母菌母液/mL温度（℃）A10—0.128B10—0.15C—100.128以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.血球计数板的使用(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和左方线上的酵母细胞(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.3.计算公式(1)16格×25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数1怎样进行酵母菌的计数？对一支试管中的培养液(可定为10ml)中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测的方法：先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算计算中的酵母菌总数，盖玻片下，培养液厚度为0.1mm，可算出10ml培养液中酵母菌总数的公式：2.5×104x(x为小方格内酵母菌数)2从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么？3本探究需要设置对照吗？如果需要请讨论对照组应怎样设计和操作；如果不需要，请说明理由。4需要做重复实验吗？目的是使培养液中的酵母菌均匀分布，以保证估算的准确性，减少误差。不需要，本实验旨在探究培养液中酵母菌在一定条件下的种群数量变化，只要分组实验，获得平均数值即可。不用重复，只要分组实验获得平均值即可。5、怎样记录结果？记录表怎样设计？6如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应采取怎样的措施？第1天第2天第3天第4天第5天第6天第7天第1组第2组第3组------第n组平均值摇匀试管取1mL酵母菌培养液稀释n倍后，再用血球计数板计数，所得数值乘以n×2.5×104，即为10mL酵母菌液中酵母菌个数。只计数相邻两边及其顶角的酵母菌数。7对于压在小方格界线上的酵母菌，应当怎样计数？设计实验：A组为实验组，装培养液10mL，酵母菌母液0.1mL,环境温度28℃。B组装培养液10mL，酵母菌母液0.1mL,环境温度5℃，与A组形成温度条件对照。C组不装培养液，只装无菌水10mL,酵母菌母液0.1mL,环境温度28℃，与A组形成营养条件对照。计数计数：首先取样，每天取样时间大体一致，并要遵守无菌操作规范。每次取样前要试管振荡摇匀，正确地使用1mL刻度吸管将lmL酵母菌培养液移入1支干净的试管里，然后用滴管吸取1滴培养液滴在已盖在血球计数板网格上的盖玻片的边缘，待培养液自行渗入并充满网格后，再放在显微镜下进行细胞计数，后立即将数据填到记录表格中。如记数时发现，细胞数较多，不易分辨，吸取的样液应当稀释。参考1：一次实验数据记录表参考2：出A、B、C各个处理的曲线图