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特殊染色技术特殊染色简介特殊染色-----弹力纤维染色Gomori醛品红染色法----弹力纤维(实验操作)常规染色(普通染色)在组织制片技术中,苏木精和伊红染色(简称HE染色),又称为常规染色。为了显示组织或细胞中的正常结构或病理过程中出现的病变、异常物质、病原体等,需要选用相应的染色方法进行染色以显示这些目的成分,这是HE染色不能显示的,故称特殊染色,简称特染。特殊染色常规染色(HE)特殊染色染料苏木精伊红各种染料目产物胞核胞浆正常组织成分及病变、异常物、病原菌颜色蓝色红色红、黄、蓝、绿、紫等多种颜色方法单一种类多复杂常用的特殊杂色方法染色方法显示的目的物VG–VanGieson(苦味酸酸性复红法)---------胶原纤维、平滑肌Masson三色染色法--------------------------------胶原纤维、平滑肌Gomori银染色法------------------------------------网状纤维Gomori醛品红染色法-------------------------------弹力纤维、肥大细胞磷钨酸苏木素(PTAH)----------------------------横纹肌过碘酸-Schiff反应(PAS)-----------------------糖原、中性粘液、霉菌阿利辛蓝-过碘酸-Schiff反应(AB-PAS)-----------酸性粘液与中性粘液苏丹III、油红0-------------------------------------脂类普鲁士蓝反应---------------------------------------含铁血黄素Gram甲紫染色法------------------------------------纤维素Ziehl-Neeleen抗酸杆菌法---------------------------结核杆菌麻风杆菌刚果红法----------------------------------------------淀粉染色原理化学反应在组织细胞中,酸性物质部分能与溶液中的阳离子结合,碱性物质部分能与溶液中的阴离子结合。物理作用毛细管作用及渗透作用吸收或溶液作用吸附作用特殊染色的意义观察常规HE染色切片中不能区别的病变。例如:VG染色可区别胶原纤维和平滑肌。苏丹染色可区别胞浆内脂肪变性与水样变性。特殊染色的命名发明者---VanGieson染色(VG染色)染色剂---油红O染色、苏丹IV染色目的物---网状纤维染色,肥大细胞染色混合命名---过碘酸雪夫氏反应(试剂+人名)1、特染对目的物的选择是相对的有时一种方法可以显示多种目的物例如PAS染色可显示糖原、中性粘液、霉菌等醛品红法可显示弹力纤维、肥大细胞等特染的特点2、有时一种目的物可以用多种方法显示如:弹力纤维染色可以用维多利亚蓝染色、醛品红法、地衣红法等3、但有的特染也具有特异性如:油红O对脂质的染色呈阳性特染的特点选择的特染试剂品种少配制简单操作简便效果好弹力纤维染色弹力纤维染色主要用于观察弹力纤维有无增生、肿胀、断裂、破碎及萎缩或缺如等病变。应用常用于显示皮肤组织增殖和变化;呼吸道的支气管扩张,老年性肺气肿的纤维断裂、变性或萎缩;心血管的心内膜弹性纤维异常增殖症和高血压小动脉的异常增生,动脉粥样硬化弹性纤维的崩解断裂与消失;肾脏组织和肿瘤组织中的纤维病变,各种实验动物组织中的血管壁纤维损害或增生情况。常用的特殊染色方法Gomori醛品红染色法醛品红法间苯二酚品红法地衣红法Gomori醛品红染色法---弹力纤维染色材料:动脉组织固定于是10%缓冲甲醛溶液常规脱水、石蜡包埋切片厚度4um。试剂盒试剂A:Lugol碘液(8ml);试剂B:硫代硫酸钠(8ml);试剂C:醛品红染液(8ml);试剂D:橙黄G染液(8ml);染色步骤:1、石蜡切片脱蜡至水。2、滴加一滴(100ul)Lugol碘液(试剂A)孵育5分钟,稍水洗。3、滴加一滴(100ul)硫代硫酸钠(试剂B)处理5分钟。流水冲洗5分钟,70%酒精稍洗。4、滴加一滴(100ul)醛品红染液(试剂C)染色3~10分钟,70%酒精浸洗2次(每次30秒,至切片不再脱色为止)稍水洗。5、滴加一滴(100ul)橙黄G染液(试剂D)染色1秒(依背景深浅而定),稍水洗。6、95%酒精、无水酒精脱水,透明、封固。注:(龚志锦,詹洲。病理组织制片和染色技术,上海科学技术出版社。1994年10月第1版。P83~84)醛品红染液对特殊的蛋白质及含硫酸根的粘多糖具有很强的亲合力。它和弹力纤维结合得很好。此外,对肥大细胞颗粒,脂褐素,肝表面抗原、脑垂体的嗜碱细胞等也能有很好的着色效果。弹力纤维呈深紫色底色为不同程度的黄色肥大细胞呈紫蓝色结果注意事项1、不同的固定液或固定时间长短不一的组织,染色效果可有差异,可根据镜下控制来掌握染色或分化时间。2、染色液必须充分覆盖组织。3、橙黄G染液要淡染,若过染则会掩盖弹力纤维,对比度不强。4、每次染色宜用阳性片作对照。病理实验技术学习相关的网站1、中华病理技术网2、联合病理网【AllPath】3、病理学园地4、病理之家5、丁香园6、中国病理学网7、华夏病理1、梁英杰,凌启波,张威编著,临床病理学技术,人民卫生出版社。2011年12月第1版。2、龚志锦,詹洲。病理组织制片和染色技术,上海科学技术出版社。1994年10月第1版。参考文献
本文标题:2015-特殊染色技术(学)资料
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