苯并二氮杂卓类药物的分析

2016苯并二氮杂卓类药物的分析结构与性质（了解）1鉴别试验（掌握）2特殊杂质检查（熟悉）3含量测定（掌握）4一、苯并二氮杂卓类药物的结构与性质苯环与七元含氮杂环稠合而成的有机药物NN1234571,4-苯并二氮杂卓类1.白色或微黄色结晶或结晶性粉末；不溶或极微溶于水，溶于丙酮或三氯甲烷等有机溶剂2.苯并二氮杂卓母核：弱碱性，UV3.具有内酰胺和亚胺结构，遇酸、碱或受热易水解开环。NNClH3CO1234567892’★和某些生物碱沉淀剂反应产生沉淀★可用非水溶液滴定法测定含量NNOCH3Cl地西泮ClNHNOOH奥沙西泮ClNHNOOHCl劳拉西泮(二)典型药物氯硝西泮氯氮卓三唑仑NHNOClO2NNNNHCH3ClONNNNCH3ClCl1.沉淀反应氯氮卓橙红色沉淀阿普唑仑盐酸氟西泮＋KBiI4生成橙红色沉淀氯硝西泮后者放置后，沉淀颜色变深阿普唑仑遇硅钨酸白色沉淀二、鉴别试验（一）、化学鉴别2.硫酸-荧光反应本类药物溶于硫酸后，在紫外光（365nm）下，显不同颜色的荧光地西泮黄绿色黄色+H2SO4若+稀H2SO4氯氮卓黄色紫色示例10-27地西泮的硫酸-荧光反应鉴别：取地西泮约10mg，加硫酸3ml，振摇使溶解，在紫外光灯(365nm)下检视，显黄绿色荧光1.芳伯胺的反应(水解后，重氮化-偶合)本类药物如N1位上未取代者，与盐酸共热水解后，生成芳伯胺，可发生重氮化-偶合反应显色NNHNCH3ClClNH2OOHNOClNHOClONN+Cl-NaOHNaNO2H+O地西泮无此反应C1位氮原子上有甲基取代，水解产物没有芳伯氨基橙红色（二）、特征基团反应2.氯化物的鉴别反应本类药物大多为有机氯化合物，用氧瓶燃烧法破坏，生成氯化氢，以5%氢氧化钠溶液吸收，加稀硝酸酸化，并缓缓煮沸2分钟，显氯化物反应。•具有较大共轭体系，利用紫外最大吸收波长，以及最大吸收波长处的吸光度或吸光度比值进行鉴别•红外吸收光谱用于大多数1,4-苯并二氮杂卓类药物的指纹鉴别(三)吸收光谱特征(四)色谱法•结构与性质相似，不易区分鉴别。色谱法用于本类药物原料和制剂的专属鉴别三、特殊杂质检查氯氮卓主要有关物质NHNClOONNClClOONH2Cl4-氧化-7-氯-5-苯基-1,3-二氢-2H-1,4-苯并二氮杂-2-酮3-氧化-6-氯-2-(氯甲基)-4-苯基喹唑啉(2-氨基-5-氯苯基)苯甲酮TLC检查-BP、USPHPLC检查-ChP苯并二氮杂卓类药物在生产或储存过程中易引入药物的中间体、副产物和分解产物等有关物质。氯硝西泮主要有关物质(2-氨基-5-硝基苯基)(2-氯苯基)甲酮3-氨基-4-(2-氯苯基)-6-硝基喹啉-2(1H)-酮OClNH2NO2ClNO2NHNH2O四、含量测定•本类药物多为弱碱性，非水溶液滴定法•有大的共轭体系，UV法•HPLC-UVNNClH3CO1234567892’1,4-苯并二氮杂卓类非水溶液滴定法（掌握）1.非水碱量法•在水中碱性较弱，不能顺利地进行中和滴定。在非水酸性溶剂中（如HAc中），则能显示出较强的碱性，滴定突跃增大，可以顺利地进行中和滴定。药物碱性非水酸性溶剂pKb8~10冰醋酸pKb10~12冰醋酸与醋酐的混合液pKb12醋酐多采用高氯酸非水溶液滴定法测定此类药物及其盐类的原料药14YOURSITEHERE紫外分光光度法•优点：简便易行，灵敏度高，10-7~10-4g/ml，准确度较高，0.5%~1%。•局限性：专属性较差•ChP中，本类药物中多种药物的制剂用UV法测定含量，原料药仅奥沙西泮用UV法测定。•对照品比较法•吸收系数法为百分吸收系数，L为吸收池厚度1.对照品比较法RRXXCAAC)/(2.吸收系数法LEACcm%11CX和CR分别为供试品溶液和对照品溶液的浓度，AX和AR分别为供试品和对照品溶液的吸光度%11cmE16YOURSITEHEREHPLC优点：分离模式多样、适用范围广、选择和专属性强、检测手段多样、灵敏、重复性好、分析速度快等能十分有效地分离苯并二氮杂卓类药物及其降解产物。本类药物分析大多采用反相高效液相色谱法，以不同配比的甲醇-水或甲醇（乙腈）-缓冲液等为流动相，进行测定。2016