植物全氮磷钾的测定

植物全氮、磷、钾含量测定—待测液制备（H2SO4+H2O2消煮法）本方法不包括硝态氮的植物全氮测定，适合于含硝态氮低的植物样品的测定。试剂：浓硫酸(化学钝，比重1.84)；30％H2O2(分析纯)300g/L操作步骤:称取磨细烘干植物样品(0.5mm筛)0．1000g~0．2000g，装入100mL开氏瓶或消煮管的底部，先用水湿润样品，然后加浓H2SO45mL，摇匀，放置过夜。第二天，在瓶口放弯颈漏斗，在消煮炉上先小火加热，待H2SO4发白烟后再升高温度，当溶液呈均匀的棕黑色时取下。稍冷后加10滴H2O2，并充分摇动消煮管。再加热至微沸，消煮约10～20min，稍冷后重复加H2O25-10滴，再消煮。如此重复数次，每次添加的H2O2应逐次减少，消煮至溶液呈无色或清亮后，再加热约10min，除去剩余的H2O2。取下冷却。用水将消煮液无损地转移入100mL容量瓶中，冷却至室温后定容。用无磷钾的干滤纸过滤，或放置澄清后吸取清液测定氮、磷、钾。每批消煮的同时，进行空白试验，以校正试剂和方法的误差。植物全氮测定——半微量蒸馏法试剂：NaOH溶液：10mol／L、H3BO3—指示剂溶液：20g／L、酸标准溶液(c(HCI或1／2H2SO4)：0.01mol／L。H3BO3—指示剂溶液：20gH3BO3溶于1L水中，每升H3BO3溶液中加入甲基红-溴甲酚绿混合指示剂5ml，调ph至微紫色。甲基红-溴甲酚绿混合指示剂：0.5g溴甲酚绿和0.1g甲基红溶于100ml乙醇中。仪器设备：蒸馏装置或半自动蒸馏仪。蒸馏:1、检查蒸馏装置是否漏气，并通过水的馏出液将管道洗净。2、打开蒸馏仪开关，空蒸30分钟。准确吸取定容后的消煮液10.00mL，注入半微量蒸馏器的消化管内。3、另取150mL三角瓶，内加5mLH3BO3指示剂溶液，放在冷凝管下端，管口置于H3BO3液面以上3～4cm处，然后向蒸馏器内慢慢加入20mLNaOH溶液，通入蒸气蒸馏(注意开放冷凝水，勿使馏出液的温度超过40'C)。待馏出液体积约达50—60mL时，停止蒸馏，用少量已调节至PＨ4.5的水冲洗冷凝管末端。4、用酸标准溶液滴定馏出液至由蓝绿色突变为紫红色(终点的颜色应和空白测定的滴定终点相同)。与此同时进行空白测定的蒸馏、滴定，以校正试剂和滴定误差。空白所用标准酸体积一般不超过0.4ml结果计算全(N)，g/kg=c(HCl)×(V—V0)×0.014×D×l00／m；式中：c(HCl)—酸标准溶液的浓度，mol／L；V—滴定试样所用的酸标准液体积，mL；V0—滴定空白所用的酸标准液，mL：0.014—N的摩尔质量，kg／mol；m—称样量，g：D—分取倍数(即消煮液定容体积V1／吸取测定的体积V2)。植物全磷的测定（钼锑抗吸光光度法）适用范围：适合于含磷量较低的植物样品的测定(如茎秆样品等)。试剂：4mol／LNaOH溶液、二硝基酚指示剂、2mol／L(1／2H2SO4)硫酸溶液、钼锑抗试剂。二硝基酚指示剂：溶解二硝基酚0.25g于100ml水中。4mol／LNaOH溶液：溶解NaOH16g于100ml水中。2mol／L(1／2H2SO4)硫酸溶液：吸取浓硫酸6ml，缓缓加入80ml水中，边加边搅动，冷却后加水至100ml。钼锑抗试剂：A：称取0.5g酒石酸锑钾，溶解于100ml水中。B：称取10.0g钼酸铵溶于450m水中，缓慢加入153ml浓H2SO4，边加边搅。将A溶液加入到B溶液中，最后加水至1L。充分摇匀，储存于棕色瓶内。此为钼锑混合液。临用当天，称取左旋抗坏血酸1.5g，溶于100ml钼锑混合液中，混匀，此为钼锑抗试剂。有效期24h。主要仪器设备：分光光度计。分析步骤：吸取消煮液5.00mL于50mL容量瓶中，用水稀释至约30mL，加2滴二硝基酚指示剂，滴加4mol／LNaOH溶液中和至刚呈黄色，再加入1滴2mol／L(1／2H2SO4)溶液，使溶液的黄色刚刚褪去。然后加入钼锑抗试剂5.00mL，用水定容50ml，摇匀。在室温高于15℃的条件下放置30min后，用lcm光径比色槽在波长700nm处测定吸光度，以空白溶液为参比调节仪器零点。校准曲线或直线回归方程：准确吸取(P)=5ug/mL标准工作溶液0，1，2，4，6，8，10mL，分别放入50mL容量瓶中，加水至30mL，同上步骤显色并定容，即得0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0ug／mLP标准系列溶液，与待测液同时测定，读取吸光度。然后绘制校准曲线或直线回归方程。结果计算：全(ｐ)，g/kg=P×V×（V3／V2）)×10-3／m；式中：P——从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷的质量浓度，ug／mL：V——消煮液定容体积，mL；V2——吸取测定的消煮液体积，mL；，V3——显色的溶液体积，mL：m——称样量，ｇ：10-3——换算因数。植物全钾的测定一火焰光度法主要仪器设备：火焰光度计。试剂：100ug/mlK标准溶液。准确称取KCl0.1907g溶解于水中，在容量瓶中定容至1L,储存于塑料瓶中准确吸取100ug／mLK标准溶液2，5，10，20，40，60mL，分别放入100mL容量瓶中，加入定容后的空白消煮液5或10mL(使标准溶液中的离子成分和待测液相近)，加水定容。即得2，5，10，20，40，60ug/mLK的标准系列溶液。分析步骤：吸取定容后的消煮液5.00～10.00mL(V2)放入50mL容量瓶中，用水定容(V3)。直接在火焰光度计上测定，读取检流计读数。校准曲线或直线回归方程：以浓度最高的标准溶液定火焰光度计检流计的满度，然后从稀到浓依次进行测定，记录检流计读数。以检计读数为纵坐标，钾浓度ug/ml为横坐标绘制校准曲线或求直线回归方程。7结果计算全(K)，g/kg=K×V×（V3／V2）×l0-3／m式中：K——从校准曲线或回归方程求得的测读液中K的浓度，ug／mL；V——消煮液定容体积，mL；V2——吸取体积，mLV3——测读液定容体积，mL：m——干样质量，g10-3——换算因数。植物中铜锌的测定——AAS法主要仪器设备：高温电炉，石英坩埚，原子吸收分光光度计试剂：（1）100ug/mlCu标准溶液。溶解纯铜0.1000g于1:1HNO350ml溶液中，用去离子水稀释定容至1L。（2）Cu标准系列溶液。将100ug/mlCu标准溶液用去离子水稀释10倍，即为10ug/mlCu标准溶液。准确吸取10ug／mLCu标准溶液0、2、4、6、8、10、15、20mL，分别放入100mL容量瓶中，用去离子水定容，即得0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.5、2.0ug/mLCu的标准系列溶液。（3）100ug/mlZn标准溶液。溶解纯Zn0.1000g于1:1HCl50ml溶液中，用去离子水稀释定容至1L。（2）Zn标准系列溶液。将100ug/mlZn标准溶液用去离子水稀释10倍，即为10ug/mlZn标准溶液。准确吸取10ug／mLZn标准溶液0、2、4、6、8、10mL，分别放入100mL容量瓶中，用去离子水定容，即得0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ug/mLZn的标准系列溶液。分析步骤：称取过0.5mm筛孔的烘干植物样品0.5~1.0000g置于石英坩埚中，在电炉上加热炭化，再移入高温电炉中500℃2~3h，灰化后冷却。准确加入1:1硝酸溶液5ml溶解灰分，溶解后无损的移入50或100ml容量瓶中，用水定容。用干滤纸过滤，滤液收集在干塑料瓶内。可直接用原子吸收分光光度计进行测定。标准曲线的制作：拿上述铜、锌的标准系列溶液配制标准系列溶液，加入与待测溶液相同量的硝酸和盐酸，用水定容。在样品测定的同时，在完全相同的条件下，测定其吸收值，制作标准曲线。结果计算：Cu或Zn（mg/kg）=ρ·V/m式子中：ρ——从标准曲线查得Cu或Zn的质量浓度（ug/mL)V——灰化溶解后定溶液体积（mL）m——干样品质量（g）