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探究:培养液中酵母菌种群数量的变化目的要求1、学习利用血球计数板进行微生物计数的方法2、实验探究培养液中酵母菌种群数量的变化3、注意样方法的应用4、体会影响种群数量变化的因素探究过程•1.提出问题:•2.作出假设:•3.设计实验:•4.进行实验:•5.分析结果和表达交流:•6.得出结论:培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的?酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长,随着时间的推移,由于资源和空间有限,呈“S”型增长。连续培养5天,每天用显微镜和血球计数板计数出酵母菌种群密度各小组汇报实验结果,结合前4天的结果,画出酵母种群增长的曲线图并进行分析。酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长,但随着时间的推移,由于资源和空间有限,将呈“S”型增长,并最终将全部死亡。三)设计并完成实验:(1)实验材料:酵母菌菌种,无菌马铃薯培养液或肉汤培养液,试管,血细胞计数板,滴管,显微镜(2)实验原理:①酵母菌是兼性厌氧微生物,有氧条件下能产生较多CO2,在无氧条件下产生酒精和少量的CO2。②在理想环境中,酵母菌种群呈“J”型增长;自然界中,酵母菌呈“S”型增长。③计算酵母菌数量可用抽样检测的方法。(3)实验步骤:①配制培养基:将10ml一定浓度的马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中。②接种:将酵母菌接种到试管中的培养液中,并放在适宜条件下连续培养培养7天。③计数:每天定时取样,采用抽样检测法,用血细胞计数板计数。一、血细胞计数板血细胞计数板血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数量的仪器,由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面刻有一个方格网。血细胞计数板的使用方法步骤③计数:稍待片刻(约5min),待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后,将计数板放在载物台的中央,先在低倍镜下找到计数室所在位置后,再转换高倍镜观察、计数并记录。①镜检计数室:在加样前,先对计数板的计数室进行镜检。若有污物,则需清洗,吹干后才能进行计数。②加样品:将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片,用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行缓缓渗入,一次性充满计数室,防止产生气泡,充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖玻片之间的矩形边缘为宜。多余培养液可用滤纸吸去。血细胞计数板大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,即1mm×1mm×0.1mm,其容积为0.1mm3;大方格的长和宽各为2mm,深度为0.1mm,即2mm×2mm×0.1mm,其容积为0.4mm3计数室通常也有两种规格16×25型:即大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格25×16型:即大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。不管计数室是哪一种构造,其每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。2、计数16×25型:一般取四角的四个中方格(100个小方格)计数25×16型:一般计数四个角和中央的五个中方格(80个小方格)的细胞数。3、计算以1mm×1mm×0.1mm型为例计数室容积为0.1mm3,则每个小方格的容积为1/4000mm3。100个小方格细胞总数/100×400×10000×稀释倍数酵母细胞个数/1mL=80个小方格细胞总数/80×400×10000×稀释倍数例1通常用血球计数板对培养液中酵母菌进行计数,若计数室为1mm×1mm×0.1mm方格,由400个小方格组成。若多次重复计数后,算得每个小方格中平均有5个酵母菌,则10mL该培养液中酵母菌总数有个。2×108例2检测员将1mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16=400个小格组成,容纳液体的总体积为0.1mm3。现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻个/mL。5n×105问题1:从试管中吸出培养液进行计数之前,建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么?使培养液中的酵母菌分布均匀,减少误差。问题2:本探究需要设置对照吗?如果需要请讨论对照组应怎样设计和操作;如果不需要,请说明理由。不需要,本实验旨在探究培养液中酵母菌在一定条件下的种群数量变化,只要分组实验,获得平均数值即可。问题3:需要做重复实验吗?要重复,获得平均值。(也可分组实验)问题4:怎样记录结果?记录表怎样设计?第1天第2天第3天第4天第5天第6天第7天第1组第2组------第n组平均值问题5:如果一个小方格内酵母菌过多,难以计数,应采取怎样的措施?摇匀试管取1mL酵母菌培养液稀释几倍后,再用血球计数板计数。问题6:对于有压在小方格界线上的酵母菌应当怎样计数?相邻两边及顶角“左上原则”四)分析结果,得出结论:将所得数据用曲线图表示出来,分析结果是否支持你所做的假设。探究结论:
本文标题:培养液中酵母菌种群数量的变化探究实验(公开课)
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