岛津液相色谱维护教材

岛津液相色谱仪维护教材岛津液相色谱仪维护教材岛津液相色谱仪维护教材岛津液相色谱仪维护教材岛津企业管理（中国）有限公司分析中心液相色谱故障排除经验第一部分液相色谱常见问题液相色谱简易流程图输液泵输液泵输液泵输液泵进样器进样器进样器进样器色谱柱色谱柱色谱柱色谱柱柱温箱柱温箱柱温箱柱温箱检测器检测器检测器检测器溶剂溶剂溶剂溶剂废液废液废液废液数据处理数据处理数据处理数据处理1.等度系统储液瓶储液瓶储液瓶储液瓶脱气机脱气机脱气机脱气机泵单元泵单元泵单元泵单元123手动进样器手动进样器手动进样器手动进样器色谱柱色谱柱色谱柱色谱柱检测器检测器检测器检测器废液瓶废液瓶废液瓶废液瓶4567储液瓶储液瓶储液瓶储液瓶脱气机脱气机脱气机脱气机泵单元泵单元泵单元泵单元低压梯度单元低压梯度单元低压梯度单元低压梯度单元2.低压梯度系统1234泵单元泵单元泵单元泵单元自动进样器自动进样器自动进样器自动进样器色谱柱色谱柱色谱柱色谱柱检测器检测器检测器检测器废液瓶废液瓶废液瓶废液瓶混合器混合器混合器混合器456789储液瓶储液瓶储液瓶储液瓶脱气机脱气机脱气机脱气机泵单元泵单元泵单元泵单元3.高压梯度系统123自动进样器自动进样器自动进样器自动进样器色谱柱色谱柱色谱柱色谱柱检测器检测器检测器检测器废液瓶废液瓶废液瓶废液瓶混合器混合器混合器混合器45678液相色谱故障排除经验•故障的确定—至少要重复出现两次以上•初步判断故障引起的原因—方法或硬件•由经验或平时的积累确定故障原因—平时做好观察和记录•当不能确认故障原因时—采用排除法逐一考察可能引起故障的因素•确定故障能否自行处理—不要贸然拆卸不熟悉的部件常见故障因素仪器环境：—实验室的温度、湿度、酸度等—实验室震动、灰尘等问题—电源及地线问题使用条件：—流动相（pH值、均匀度、气泡等）—流动相（pH值、均匀度、气泡等）—样品（样品分解、氧化、样品溶剂等）—色谱柱（污染、堵塞、塌陷等）硬件问题：—输液泵—进样器—检测器日常保养-做好平常的保养可以有效的降低故障的发生率-做好平常的保养可以延长仪器的使用寿命常做的保养—保证仪器的使用环境（经常清洁仪器，尤其是灰尘）—泵的保养（使用缓冲盐时要清洗柱塞，水和盐不要长期保存在泵里）—进样器要经常清洗，避免污染物吸附或堵塞管路—尽量进行样品前处理—色谱柱要定期清洗，保证柱效及使用寿命—系统中不要长期保存水和盐，长时间不用时应将仪器所有部分全部更换为70％以上的甲醇，避免细菌的滋生及盐的析出。液相色谱常见问题压力异常（偏高、波动）漏液保留时间漂移基线问题（漂移、噪声）峰形异常压力压力是液相色谱中最重要的指标，要经常关注压力的变化。保留时间的变化经常是由于压力问题引起的。不同溶剂即使在相同流速和温度的情况下压力也是不同的。记下仪器正常状态时，在固定条件下（流动相、流速、温度等）的压力显示值。压力高首先要确认是色谱柱堵塞还是系统堵塞色谱柱堵时，确认可能造成堵塞的样品的性质，相应选择合适的清洗溶剂。系统堵塞，首先应确认是哪一部份堵塞，依据情况由后向系统堵塞，首先应确认是哪一部份堵塞，依据情况由后向前进行排除。容易发生堵塞的部件
保护柱及色谱柱
线路过滤器
混合器过滤组件
管路连接处
进样器
检测器流通池压力低如果压力为零：泵头中没有液体，充满气泡单向阀完全堵死柱塞杆折断压力传感器损坏(流动相流动正常，但无压力)如果有压力但是压力比正常时低：漏液单向阀堵塞压力波动压力在短时间内剧烈波动。泵头中有气泡单向阀脏单向阀脏柱塞密封圈漏液经常漏液的部件泵：柱塞密封圈排液阀手动进样器：转子密封圈磨损检测器：流通池窗口（垫片损坏、透镜破碎）检测器：流通池窗口（垫片损坏、透镜破碎）接头处漏液：（接头松动，接头脏，接头磨损，部件不匹配）保留时间不稳定吸滤头脏泵输液不正常（压力波动、气泡等）流动相组分变化流动相缓冲能力不够流动相缓冲能力不够色谱柱平衡时间不够柱温的变化柱子问题噪音大流动相污染、变质或由低品质溶剂配成漏液流动相、泵、检测器流通池内有气泡流动相各溶剂不相溶或混和不均匀检测池能量不足流通池被污染温度影响（检测器和柱温差别太大）其他电子设备的影响或电源、地线等基线漂移流动相污染，变质或由低品质溶剂配成流动相不均匀(脱气，使用纯度更高的溶剂)温度波动系统平衡时间不够流通池被污染或有气泡流通池窗口破裂峰形问题死体积太大柱子被污染或堵塞色谱柱塌陷色谱柱化学或次级保留（硅羟基效应或重金属污染）色谱柱化学或次级保留（硅羟基效应或重金属污染）流动相缓冲不足或不合适样品溶剂选择不当，与流动相之间极性差异太大样品过载（浓度或体积）柱温过低鬼峰流动相被污染进样阀残余峰样品中未知物色谱柱中的污染物日常使用注意点硬件基础知识第二部分容易出故障的部件及常见故障的排除液相系统维护流程图单向阀线路过滤器检测器色谱柱吸滤头柱塞密封圈手动进样器色谱柱一、输液部分管线选择材料不锈钢TeflonPEEK(聚醚醚酮)尺寸0.1mmI.D.x1.6mmO.D.0.3mmI.D.x1.6mmO.D.0.5mmI.D.x1.6mmO.D.0.8mmI.D.x1.6mmO.D.管线材料不锈钢(可用于所有连接)能承受几千kgf/cm2压力酸性或高浓度盐环境中易腐蚀(尤其在pH小于2时)PEEK(可用于所有连接)PEEK(可用于所有连接)能承受高达250kgf/cm2压力可在整个pH范围(pH1-14)内使用不适用于高溶解性溶剂如氯仿等Teflon(用于柱后阻尼管、反应管和排液管)化学惰性大能承受5kgf/cm2压力接头不锈钢接头/垫圈主要用于输液泵、进样器的连接能承受400kgf/cm2压力一旦固定，垫圈不可再动PEEK接头不锈钢接头垫圈PEEK接头主要用于色谱柱、检测器的连接易于安装能承受250kgf/cm2压力容易产生死体积PEEK接头死体积死体积可能会引起分离度变差和重现性变差等问题.公螺母死体积管线好的连接差的连接选择原则1、采用“HPLC”级溶剂2、避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂流动相3、对试样有适宜的溶解度4、溶剂粘度要小5、与检测器相匹配溶剂的等级HPLC级优级纯分析纯微量分析、梯度洗脱流动相都经过蒸馏和0.45μm过滤(除纤维毛,未溶解的机械颗粒）优级纯的纯度比分析纯大,但里面含有防腐剂和抗氧化剂HPLC级经过0.22μm过滤,且除去有紫外吸收的杂质水/甲醇梯度鬼峰鬼峰的出现流动相水/甲醇梯度ODS柱1mL/min,10mins内，0-100%甲醇，在最高点保持5mins.水的等级纯水蒸馏水去离子水纯水去离子水水水水吸光率流动相波长(nm)纯水因为不纯物的存在，去离子的吸光率较高纯水中去除了无机和有机的污染物选择缓冲液的步骤1确定最佳分离状态时的流动相pH2.选择具有与流动相的pH相近的pKa的缓冲液（即使浓度稀也具有较强能力的缓冲液）流动相3.确认检测波长下缓冲液是否有大的吸收（在波长210nm附近进行检测时，不能用醋酸和柠檬酸的缓冲液）代表性弱酸的pKapK1pK2pK3醋酸4.87流动相醋酸4.87柠檬酸3.134.766.40磷酸2.167.2112.32使用前必须过滤使用后一定要进行清洗，以免造成腐蚀、磨损、阻塞:用含5%甲醇的水溶液冲洗30min（1mL/min），再用甲醇冲洗30min缓冲液的使用用纯水冲洗泵头清洗管路易受到细菌和霉菌的影响不能直接用有机溶剂冲洗缓冲盐溶液流动相的更换不互溶的流动相不能直接更换缓冲盐不能直接用有机溶剂更换水缓冲盐正己烷异丙醇有机溶剂水过滤：0.45μm或更小孔径滤膜目的：除去溶剂中的微小颗粒，避免堵塞色谱柱，尤其是使用无机盐配制的缓冲液时。滤膜类型：溶剂前处理聚四氟乙烯滤膜：适用于所有溶剂，酸和盐。醋酸纤维滤膜：不适用于有机溶剂，特别适用于水基溶剂。尼龙66滤膜：适用于绝大多数有机溶剂和水溶液，可以用于强酸，不适用于二甲基甲酰胺。再生纤维素滤膜：蛋白吸收低，同样适用于水溶性样品和有机溶剂吸滤头吸滤头部件号：228-45707-91吸滤头部件号：228-21984-01吸滤头材料：不锈钢(或陶瓷)烧结，孔径10μm故障：堵塞表现：管路中不断有气泡生成表现：管路中不断有气泡生成措施：用异丙醇（或5％稀硝酸），超声波清洗，再用蒸馏水清洗泵工作示意图凸轮泵头流动相出口流动相出口流动相出口流动相出口柱塞杆柱塞密封圈单向阀流动相入口流动相入口流动相入口流动相入口LC-20AT串联式柱塞往复泵串联式柱塞往复泵串联式柱塞往复泵串联式柱塞往复泵LC-20AD并联式微体积柱塞往复泵并联式微体积柱塞往复泵并联式微体积柱塞往复泵并联式微体积柱塞往复泵柱塞泵的基本结构LC-10ATvpLC-10ADvp单向阀单向阀单向阀LC-20AT输液泵选配件支架压力传感器泵头泵头固定座辅助进口单向阀串联式柱塞往复泵串联式柱塞往复泵串联式柱塞往复泵串联式柱塞往复泵主进口单向阀辅助进口单向阀主泵头主泵头主泵头主泵头副泵头副泵头副泵头副泵头单向阀LC-20AD输液泵选配件支架出口单向阀泵头固定座泵头压力传感器并联式微体积柱塞往复泵并联式微体积柱塞往复泵并联式微体积柱塞往复泵并联式微体积柱塞往复泵进口单向阀进液口定座泵头泵头泵头泵头泵头泵头泵头泵头单向阀单向阀单向阀单向阀单向阀单向阀结构吸液冲程排液冲程出口单向阀宝石球单向阀工作原理球座进口单向阀泵头抛光面流动相单向阀结构请不要分解阀心A和阀心B重新组装后性能不被保证，输液可能不稳定注意：LC-20AT主入口阀部件号部件号部件号部件号:228-45704-92LC-20AD入口阀LC-20AT副入口阀LC-20AD出口阀部件号部件号部件号部件号:228-45705-91单向阀LC-2010入口阀部件号部件号部件号部件号:228-37149-91部件号部件号部件号部件号:228-45704-92LC-20AT副入口阀部件号部件号部件号部件号:228-45704-91部件号部件号部件号部件号:228-45705-91LC-10ADvp出口阀LC-10ATvp出口阀部件号部件号部件号部件号:228-34976-91LC-10ADvp入口阀部件号部件号部件号部件号:228-39093-92LC-10ATvp入口阀部件号部件号部件号部件号:228-32166-91LC-2010出口阀部件号部件号部件号部件号:228-37147-92部件号部件号部件号部件号:228-37149-91单向阀清洗-污染故障：宝石球或球座受污导致密封不好表现：系统压力波动大措施：
打开排液阀，用注射器推异丙醇清洗
取下柱子，换上阻尼管，以异丙醇为流动相输液
拆下单向阀，放入异丙醇中，超声波清洗注意注意注意注意：：：：超声清洗时开口端向上放置超声清洗时开口端向上放置超声清洗时开口端向上放置超声清洗时开口端向上放置。。。。
故障：宝石球粘附于垫片
表现：泵无法吸液或排液，流路不通
措施：1)用针筒抽出口单向阀以产生负压，使宝石球与垫片分开单向阀清洗-粘结2)打开排液阀，用注射器推异丙醇清洗3)拆下单向阀，放入异丙醇或水中，用超声波清洗柱塞密封圈柱塞密封圈LC-20ADLC-20ABLC-10ADvpLC-2010部件号：228-35146柱塞密封圈LC-20ATLC-10ATvp部件号：228-35145取下和安装柱塞密封圈工具柱塞密封圈的更换故障：密封圈磨损导致密封不良现象：系统压力波动大或漏液措施：更换密封圈注意点：密封圈注意点：1、拆卸泵头前，柱塞杆复位（P－SET）2、新密封圈用异丙醇浸泡15min后再安装流动相泵头清洗管路柱塞杆柱塞杆柱塞杆LC-10ADvp用柱塞杆LC-10ATvp用柱塞杆LC-2010用LC-10ADvp用部件号部件号部件号部件号：：：：228-35281-91LC-10ATvp用部件号部件号部件号部件号：：：：228-35009-92柱塞杆LC-20AD/LC-20AB用部件号部件号部件号部件号：：：：228-35281-95柱塞杆LC-20AT用部件号部件号部件号部件号：：：：228-35009-93LC-2010用部件号部件号部件号部件号：：：：228-