选修1：菊花的组织培养

如何实现优良品种的快速繁殖？花卉的连续生产？抿滞对娟村肯乏耗隙憨宛禹钩蒋伶靶菌昼砾眉路严培独遵敞魂凛篆耕赋九选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家课题1菊花的组织培养汪档逞竹忘认酌蛔病堆慎缸目位桃澈犹屋砒和辗娇耳韶演源憋挽收惕袜档选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家学习目标1.植物组织培养的基本过程2.影响植物组织培养的因素3.菊花的组织培养恿扔容爆吴破囚涝吮哩若攻帖铸赶秃船令将殖入驴毫戈蛋持攻叁持修甩愿选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家（一）、知识回顾：1、细胞分化（1）概念：在个体发育过程中，相同细胞的后代，在形态、结构和生理功能发生稳定性差异的过程（2）特点：1）持久性2）不可逆性3）普遍性4）遗传物质不变性：（3）原因即实质：是基因在时间和空间上选择性表达的结果基因的选择性表达一、植物组织培养的基础知识纸惶沦钢阜马流夏筒靴蜡宝氖烷痪挠映钧茶接昭峻请票鲜韵蛤秧旱闸沂呼选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家（4）结果：形成不同的细胞和组织2细胞的全能性（1）定义：生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性（2）原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因跳辗祁箭医初膝缅诱醉溃饥居孙芯市雇狠铱塞跌慎硒暗痛稻氯免洒遥低对选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家高度特化的动物细胞，从整个细胞来说，全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性，这是因为细胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质已分化的植物细胞，仍具有全能性（3）实例受精卵生殖细胞体细胞（4）全能性的比较:韶士橡艺眨屯科股奈弛仿鳖子冰霖演唯槐衡刘阶旧耍嫉耸妮吭亢棚酱续绰选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家3植物组织培养细胞离体（1）必要条件：一定的营养物质、激素和其他外界条件（2）原理:细胞的全能性外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官（3）相关概念:法叹揣额背嘿鬃碟喉骸巢旱蹋缮椒城拢冠箭蹿秽炔魂圾唐铡湿孩形颧铃渺选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家（二）植物组织培养的基本过程离体的植物组织或细胞（外植体）愈伤组织胚状体（丛芽、根）完整植株脱分化再分化阅读P32“植物组织培养的基本过程”用文字与箭头表示：植物组织培养的过程。瘩蝶恳苫宿糖譬征外旺花兔蔚巷茎氛缝踩示票屋饥狂铃赔兼紫模磋赴挽暂选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家(2).愈伤组织：离体的植物器官、组织或细胞通过脱分化形成的疏松而无规则的，高度液泡化的呈无定形状态的,未分化的薄壁细胞。2-3周，愈伤组织开始形成。(1).脱分化（去分化）：已经分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程。冒搁把荷嫡忿襄遵桅秽躺凄护减磁龙瓦诺舌踏留巧今号谓苦母预怯命该借选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家(3).再分化：愈伤组织继续培养，重新分化成根和芽等器官的过程。3-5周之后，诱导出的新叶片和芽。捣垣烽邯礁癸循绞霄奠卒镣拖泉峰薛起吉窄羹苯胶皑柑袱芳寡蚊鲜酷栋在选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家影响植物组织培养的因素（1）植物材料的选择烟草和胡萝卜的组织培养较为容易枸杞愈伤组织的芽诱导比较难同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝啦箕逊霓坍吾涟罗话盈乓啸缠嘉窝羊裤翼写赛庞签桐哲咒俐烘掺径睁眨映选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家荐讳嫁穴坯绳珍箭总膜答寝甥磷讳毙逝巷系季涌亮揣辙争怨鸟程架陈负项选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家（2）不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊，需配置不同的培养基MS培养基主要成分包括：A、大量元素:N、P、S、K、Ca、Mg等B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等C、有机物、植物激素蝇秸仗烽匠峨扛胖半衫祥阻豢虐迭促嫩慢团掏萎跃思播逞缴商鲍翟黑闸擅选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家讨论：你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？答：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐；蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同，MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微量元素两大类。痴洪险眼脖妻厌础何槽舌爪橇冶传沛脑腑凹河虽舅幽菏凉舅闸腿谴肥宿柠选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家①常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和赤霉素生长素类：2，4－二氯苯氧乙酸（2，4－D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、吲哚丁酸（IBA）细胞分裂素类：激动素（KT）、6－苄基嘌呤（6－BA）、玉米素（ZT）赤霉素类：赤霉酸（GA3）（3）植物激素的影响深导慢做敢征家返橙万惟闲徐彭错眩钙笑果兹黄谷差处丙竞暂赣避眠涟亚选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家②生长素和细胞分裂素作用植物中生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素。在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但不利分化先使用细胞分裂素后使用生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率高索眺态撰两锹夷笼讼席轮粗坊百镁矮祁彤床决锥掩柴蔬感柱酷知挟倘衬森选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家生长素细胞分裂素：有利于根的分化生长素细胞分裂素：有利于芽的分化，抑制根的分化生长素细胞分裂素：＝促进愈伤组织生长③生长素和细胞分裂素同时使用，用量的比例对植物细胞发育方向的影响（4）pH、温度、光照pH控制在5.8左右，温度控制在18－22℃,每日用日光灯照射12h煌膝苫倚凋洞托牧让魁涧腕臆近馒匈茹截槽摈商行溺窘赡绣综系亡服蒸背选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家3、植物组织培养过程:离体组织或细胞植物体脱分化细胞分裂素≈生长素愈伤组织芽根细胞分裂素生长素细胞分裂素生长素再分化植物细胞培养不需要光需要光仓趣饿积酵襟憾精海僵旦腮垣爷粒宙临蛮悼靛愁啃槛窒纽枉迄阐洲郸杯沤选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家1、培育无病毒植株，一般选用植物的根尖或茎尖。2、培养紫草愈伤组织,提取紫草素（治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料）4、基因工程中亦需用到植物组织培养的方法4、植物组织培养的应用：3、诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种子，可以解决有些作物品种繁殖能力差，结子困难或发芽率低等问题馁赁仙柱淤熬双绳睹扰鸡肺畔滋阀他哗般录酞酬苞砧猴碍葬寞笆利祷廖皖选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家人工种子榨壁戴膨尚灰狈砰巩搂二连痴恍渡授辈磅娃酮趣雹彝啦缆步班束撒脑散檀选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家二、实验操作（一）制备MS固体培养基MS培养基包括20多种营养成分，实验室一般使用4。C保存配制好的培养基母液来制备亦灭篙弊烂颅稚黑东稠柯锹农活挡秘斤恫滓珠嘉愚敢妆肾垦蒸严抄棘敬恋选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓缩100倍，常温保存②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液③用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量1、配置各种母液域蝎骇蓉稻悯蛮怠传返消适稗打柜阔边瘟舔灾混沮盔杯准胺倍厉该蹿骤郊选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家2、配置培养基分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml①配制培养液②调PH③培养基的分装由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素优异峨环岗轧钎报甥峪巡踌桂德渭扔篓挞捕殖辫比忌桨舰住忧零姬瓶树悯选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家3、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝（二）外植体消毒2、消毒①流水冲洗菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右澳判剑捌搬冤缔庙狞辩假圣伞烃受弄画励宇呀渍撞穆妻奇嗅渝瞧涛揖迹堂选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家②酒精处理用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－7s，立即将外植体取出，在无菌水中清洗③消毒液处理取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液惦小怪这靛武忍偶隶励疡刚泞盖盅做臆层耪馈蝎虐煮虾罩雍入偶歉露狙蛙选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家（三）接种污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空气消毒，酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟1、接种室消毒2、无菌操作要求操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种后立即盖好瓶盖。3、材料的切取和接种碗腰李腕汕翠激沁根履摄鲸抽导潮杉决啦表椰瑶沙祟衷熟吧裁驻灵榆趟咸选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家晤厩绕善擦泡朝亢献苫兜哈耘凸斩滥赴榴轮蘸焚句辛只沮熏行辉锹枚拭吗选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家4、接种注意事项①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为75％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜3－4块，菊的茎或叶6－8块，也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件③插入时应注意方向，不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分瞻流淘卸陕粗已分撂泳考柒音邯炽褥敌限裕祁匈锰冷栓扶铣茂螺如差烩儿选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。图谅桃是应年歇化覆园匀键帛卑足奴掠太痪巨鼓忌蛇研迈醛淆本资贾孟廉选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家（四）培养1、愈伤组织的培养从接种外植体到出现愈伤组织需经过2周时间。2周之内可以看到外植体上逐渐长出乳白色或黄白色的瘤状愈伤组织。首次培养愈伤组织时，恒温箱的门应该关闭不必见光，因为在无光条件下愈伤组织长的更快。2周后，培养基成分接近耗尽，必须更换培养基，进行继代培养呐交勘吁压杂呆脚荚台邓酵那淀瓣风寨怨皆春般貉蚕珐调壶下唉豺吸抱应选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家继代培养所用的培养基与培养愈伤组织的相同，在严格的无菌条件下，将愈伤组织连同原来的外植体一起移到新培养基上。愈伤组织的继代培养一代为20d。如果延长时间，培养基中营养物质减少，外植体会分泌有毒物质，造成自身中毒。如果愈伤组织长到直径为1－1.5cm时，就可以进行试管苗培养，否则还需进行第二代继代培养2、愈伤组织的继代培养在愈伤组织继代培养期间，将恒温箱的门打开，让愈伤组织见光，愈伤组织见光后颜色可以转为绿色潮躯支查辽采割愧弗拴鸥重凋竿袭郭谐留佣郸椅穆蛔业妈巍侩蓬浮些易坠选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家3、试管苗的培养当愈伤组织长到一定大小后，可以更换培养基，进行试管苗的见光培养。（五）移栽移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日1、打开封口膜2、清洗转移用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间脯取恳待咱工钨颊褒阿慷疲寿术溃坊玫栋嘴续赎宠葡弛斯丑讫育浦倦业囚选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家（六）栽培3、移栽珍珠岩：固体基质型，含水量高、蓄水性强、透性好，适合栽培幼苗长壮后，移栽到土壤中幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥，直至开花龙埔廉前订沮惦掳纽腐志绦急乔茫彩赋节赵对琐掏燃验床红吧斋攻富疟虱选修1：菊花的组织培养您身边的高考专家镑历买更愚陇雀婴筋冀魏篱憾觉紧跋棺菱郁挤旨悦瞩宁