高效液相色谱仪验证方案STP-05-110

编号：STP-05-11076-01安徽天洋药业有限公司LC-10AT型高效液相色谱仪验证方案设备编号：TY05310方案制订姓名签字日期金兵方案审查姓名签字日期陈海军张广新方案批准姓名签字日期董金保目录1、概述2、验证小组成员及职责3、验证目的4、验证确认4.1检查有关资料完整性4.2.安装场地4.3.运行确认4.4.性能确认5．再验证周期6.验证评价1.概述LC-10AT型高效液相色谱仪为岛津公司生产的产品，1995年购买，配备单元泵和SPD-10A型紫外检测器，固定资产编号为：TY05310。为了确保使用该仪器检测数据真实可靠，确认该仪器的各项指标能达到该仪器所设计的性能指标，计划对该仪器进行必要的验证。2.验证小组成员及职责部门人员职责组长陈海军负责验证方案的审核与制定并督促其实施副组长金兵负责验证方案的起草与实施设备部李金玉负责计量器具的校验化验室高先玉负责方案的具体实施化验室朱文俊负责方案的具体实施3.验证目的确认LC-10AT高效液相色谱仪的运行、性能确认符合相应的要求，为日常检验提供准确的检测结果。4.验证确认4.1.检查有关资料完整性。名称是否齐全存放处LC-10AT高效液相色谱仪使用维护规程LC-10AT高效液相色谱仪使用说明书检定合格证仪器使用记录4.2.安装场地项目要求检查情况位置应无强震动源,无强电磁干扰源,通风良好，无明火环境洁净度室内应保持清洁,无腐蚀性气体温度20～30℃，全天温度变化较小相对湿度20～85%电路电源AC220V±22V、50HZ±1HZ接地应接地结论：检测人：日期：年月日复核人：日期：年月日4.3.运行确认：按《LC-210AT高效液相色谱仪使用维护操作规程》进行操作，对仪器进行运行试验，确认其运转性能，并将检查结果填于下表中。操作步骤合格标准结果打开/关闭电源1.按下电源开关“打开”电源，再次按下电源开关“关闭”电源2.首次打开电源开关，显示矩阵中所有点，所有指示灯亮起3.自动检测内存，通过后，短暂显示控制程序版本(ROM版本)4.显示ROM版本后，出现初始屏幕，状态指示灯变绿色5.以上程序完成后，可对仪器进行操作操作前准备1.将约500ml甲醇倒储液瓶中；将吸滤头放入储液瓶中；连接好管路。2.打开电源，仪器自动完成初始化3.将排液阀旋钮逆时钟旋转180°以打开排液阀，按“purge”，泵运行，泵指示灯亮4.清洗完成后，按一次“func”，以改变流速，将流速设定为1ml/min,顺时针方向旋转排液阀旋钮关闭排液阀5.按“pump”，泵运行，泵指示灯亮；约15分钟后，再次按“pump”，泵停止，泵指示灯灭6.以上程序完成后，操作的准备工作完成检查压力值在开始操作前检查压力上下限的值1.将流动相倒入贮液瓶，吸滤头放入贮液瓶中，排液管的一端放入废液瓶中2.打开排液阀，逆时钟方向旋转排液阀旋钮180°，按“CE”返回初始屏幕，检查显示压力值是否在-0.3至0.3MPa之间3.检查压力上下限的值是否合适，必要时更改这些值到符合要求4.按“purge”以记录的流速开始送液，观察从排液管末端流出的流动相约10秒钟，流动相应持续流动且没有气泡，按“purge”泵停止，泵指示灯灭结论：检测人：日期：年月日复核人：日期：年月日4.4.性能确认4.4.1.高压恒流泵4.4.1.1.流量准确度测试方法：将输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以蒸馏水为流动相，将流速稳定后，分别设定0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0ml/min六段，在流动相排出口用量瓶收集流动相，同时计时收集10分钟，称重，查表，即得。流速误差应不超过±3％。流量设定值（ml/min）0.51.01.52.02.53.010分钟收集量（g）收集量计算查表后的体积(ml)实际每分钟流出量（ml/min）流量准确度（%）结论：检测人：日期：年月日复核人：日期：年月日4.4.1.2.流量精确度测试方法：将输液系统、进样器、色谱柱和检测器连接好，以蒸馏水为流动相，将流速稳定后，设定流量为1.0ml/min，在流动相排出口用已恒重的比重瓶收集流动相，同时计时收集10分钟，称重，查表，即得，共收集5次。流量精确度应不得过±0.3％，即（0.997-1.003ml/min）次数1234510分钟收集量（g）收集量计算查表后的体积(ml)实际每分钟流出量（ml/min）流量精确度（%）结论：检测人：日期：年月日复核人：日期：年月日4.4.2.柱温箱4.4.2.1.温度准确度测试方法：将两个数显式温度计的探头放置于柱温箱内（约为安装色谱柱的进口及出口位置），探头导线由输液管路位置引出，盖上箱盖，分别依次设定温度25℃、30℃、40℃，待温度稳定后各记录30分钟，每隔2分钟记录打印一次，结果温度误差应不得超过±1℃。温度设定值（℃）25℃30℃40℃实测最高温度（℃）实测最低温度（℃）误差结论：检测人：日期：年月日复核人：日期：年月日4.4.3.SPD-10A紫外检测器4.4.3.1.噪声与漂移将仪器各部连接好，紫外检测器调至254nm，流动相为甲醇，流速为1.0ml/min，待柱平衡稳定后，进行基线的测试，测试时间1小时，观察并记录测试结果。噪声应＜±1.0×10-2mv，基线漂移应＜±5.0×10-2mv结果：最大噪声：最大基线漂移：（见测试图谱）结论：检测人：日期：年月日复核人：日期：年月日4.4.3.2.进样及保留时间精密度测试方法：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇：0.05％冰醋酸=10：90为流动相，检测波长：281nm，流速：1.0ml/min，柱温:30℃。精密称取丹参素钠对照品10mg于200ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，经0.45um过滤。精密量取续滤液20μl注入色谱仪中，连续进样5次，记录色谱图，计算，即得。5次峰面积及保留时间的RSD应不得大于2％，每次的理论塔板数应不低于5000，结果见下表：次数12345RSD%保留时间峰面积理论塔板数结论：检测人：日期：年月日复核人：日期：年月日4.4.3.3.定量限测试方法：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇为流动相，检测波长：254nm，流速：1.0ml/min，柱温:30℃。精密称定萘适量用甲醇溶解并稀释成1.0×10-8g/ml溶液，精密取此溶液20ul注入液相色谱仪，测试并记录色谱图。其主峰的峰高应至少大于其基线噪声10倍。结果峰高为：基线噪声为：比值为：结论：检测人：日期：年月日复核人：日期：年月日5．再验证周期：5.1.该设备在正常运行的情况下应每两年进行一次验证。5.2.设备大修或更换重要元件后应重新进行验证。6.验证评价：评价人：日期：年月日