银杏叶黄铜及萜类化合物提取方法简述

北京化工大学现代中药制药论文现代中药制药论文姓名：季志华学号：2015201188班级：生研一班北京化工大学现代中药制药论文1银杏叶黄酮及萜类化合物提取及利用摘要银杏(Ginkgo)，系银杏科，银杏属。又名白果树，是我国所特有的一多年生落叶乔木树种，其植株的基本形态：树干端直，叶片单个侧生于枝条，雌雄异株，雌性银杏植株的大枝相较于雄性银杏植株的大枝更加的广袤，银杏叶成扇形，在长枝上呈螺旋状散生，在短枝上簇生。叶脉有两个叉，叶的柄部通常3-6厘米。银杏叶中含有大量有机活性药用成分，如黄铜，萜类内酯等，经研究表明，银杏黄酮类化合物具有舒张血管使血管扩张的显著作用，银杏总黄酮对于抑制脂质过氧化物，清除机体自由基效果很好，此外，银杏内脂能够有效阻止血小板活化因子的形成。利用银杏叶研制而成的药类制剂与其他药物相比较具有，药效强，副作用少，使用安全等一系列巨大优势。目前，银杏叶活性成分提取方法非常之多，常见的有：水寖法，有机溶剂抽提法，微波提取法，超声波提取法等。通过对诸如提取温度，提取剂，提取剂用量等提取条件的适度调整可有效提高其活性成分提取的效率。关键词：1，银杏叶2，活性成分3，提取4，应用银杏叶中主要活性成分以及其药用价值银杏多种活性成分目前已被发现于银杏叶片及其他部位中，具有极其重要的要用及经济价值。黄酮类活性成分及萜类内酯类活性成分为银杏叶中含量较大且较为重要的两大活性成分，其中，银杏黄酮类化合物能够舒张血管，而且对于扩张增加血管壁的韧性具有显著地临床及药理学之功效，此外，银杏总黄酮不但可以清除机体自由基的含量，并且对于机体抗氧化作用延缓机体衰老放面亦具有非常优良的表现，据目前医学研究，血小板活化因子可激活集体中所含的一整套与血凝有关的凝血系统，而银杏叶中所含的内酯类化合物则可有效抑制血小板活化因子的形成，从而对于老年人中经常出现的脑溢血脑血栓具有良好的治疗及防治的功效。1，黄酮类化合物酮类化合物是指与羰基相连的两个集团均是烃基的有机化合物。至少有一个北京化工大学现代中药制药论文2相连基团为氢原子的化合物为醛。羰基很活泼，可以发生多种多样的化学反应，所以羰基化合物在有机化学反应中有极其重要的意义，同时也是动植物生长代谢中重要的中间代谢产物。黄酮类化合物（flavonoids）是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮（flavone）结构的化合物。银杏黄酮类化合物又名黄碱素，其化学结构式中包含一个酮基及一个能和酸类化合物脱水形成盐的碱性氧原子。银杏黄酮类化合物在银杏中通常是通过不同种类的糖苷键与各类糖结合而成糖苷的形式而存在着的，亦有一小类的银杏黄酮类化合物是不与糖类结合，而是单独以游离的状态而存在的，此类黄酮类化合物通常称之为苷元。黄酮类化合物常见于多种植物当中，广泛产生于植物生长的各个时期当中，对于植物的抗菌防病等方面具有重要的调剂及控制的作用。银杏双黄酮化合物各成分主要因母体中甲基取代基的不同而变化的，其甲基取代基的位置如下表，北京化工大学现代中药制药论文32.萜类化合物银杏中所含的萜类化合物是一类由异五二烯或者异戊烷通过某种方式相连接而成的分子通式为(C5H8)n的一类天然有机化合物。萜类化合物广泛存在于多种木本及草本植物各个生长阶段，常见于植物的根，颈，叶，花果实等处，对植物的生长调节发挥着巨大的调节作用，银杏叶中萜类化合物的提取较之于上面所述的银杏黄酮类化合物的提取较为复杂，但由于其同为有机脂类化合物，故在提取及精炼过程中的诸多环节存在着很多相似之处，比如都可以用有机溶剂抽提的方法对其进行初步的提取，精致都可以通过过色谱柱的方法加以实现。被广泛用以研制香精等产品的银杏萜类化合物具有自身特殊的香味，因为可经适当的提取精致而进一步加工成诸如驱蚊，除湿等功效的药用及日用产品。萜类化合物为银杏叶中所含的另一种重要的具有重要用途的活性物质，而其中二萜类化合物及倍半萜类化合物是构成银杏叶萜类化合物的两大最主要的活性成分。其中，二萜类化合物主要有，银杏萜类内酯M，银杏萜类内酯A，银杏萜类内酯C，银杏萜类内酯B。四类活性有机化合物。银杏叶倍半萜类化合物亦被有些学者称之为银杏白果内脂或者银杏内脂J，是化学结构上与银杏二萜类化合物在结构上相似的一类活性有机化合物，他们的母体结构式以及各单体之间的差别名称表述如下图式：银杏倍半萜内脂又名白果内脂是目前世界上发现的唯一一种仅在银杏中发现的一类半萜类内脂化合物，其对血小板活化因子具有强烈的拮抗作用，故可广泛应用于心脑血管以及心血管类疾病的临床预防及治疗上来，从而可有效降低和北京化工大学现代中药制药论文4减少心脑血管类疾病对家庭及国家造成的巨大灾难，提高国家经济发展速度，提高国民的健康生活水平具，为国家和人民带来不可估量的利益，其更多重要的临床及药用价值目前仍在全世界科研院所中被研究。银杏叶中主要萜类内酯类化合物及其组成如下表所示：银杏黄酮及萜类化合物分离提取方法银杏叶活性物质通常为有机物，因其结构的差异可选取适当的有机溶剂对各有机活性物质进行提取，银杏叶活性化合物提取和分离中常用有机溶剂主要有：乙醇，丙酮，水，甲醇，乙酸乙酯，等。根据对应的待提取有机化合物来选取适当的有机溶剂可大大提高提取效率及提取纯度。此外，国内外的很多学者及研究人员在提取过程中亦使用了各种物理场，这样一来有的可大大提高银杏叶活性成分的提取率。银杏叶活性成分提取方法非常之多，常见的有：水寖法，有机溶剂抽提法，等，目前银杏叶活性成分提取中较为先进的有微波提取法，超声波提取北京化工大学现代中药制药论文5法等。通过对诸如提取温度，提取剂，提取剂用量等提取条件的适度调整可有效提高其活性成分提取的效率。据国外有关资料报道，银杏叶中各个较为重要且研究的较为充分的银杏活性成分的含量依次为：黄酮类为百分之二十四，萜类内酯为百分之六，羧酸类为百分之七，原花青素类为百分之十三，非黄酮类化合物为百分之二十，无机化合物为百分之五，其他的常因季节地理位置的不同有较大变化故不做参考标准。1.黄酮类提取方法（1）有机溶剂对银杏叶中黄酮类活性成分的提取及分离：实验材料：经干燥处理过的银杏叶，实验主要试剂：百分之七十的乙醇溶液，亚硝酸钠溶液，硝酸铝实验中用到的设备及器具：剪刀，微分天平，烧杯各型号，蒸馏瓶，回旋冷凝管，酒精灯，牛角管，铁架台，分光光度计等。对于银杏叶黄酮类物质的提取实验可大致分为两大部分：一，黄酮类化合物的提取实验。二，提取效果的检测试验。主要试验步骤有：提取1）将采摘下的新鲜无病虫害没有被施以农药的银杏叶用水冲洗干净，并晾干加以备用。2）利用微分天平称取一定量干燥后的银杏叶，并剪碎以备用，用微分天平称取银杏叶质量6倍的浓度为70%的乙醇溶液。3）将称量好的银杏叶置于乙醇溶液中水浴加热保持在80度左右一小时，一小时后将银杏叶重新置于上述乙醇溶液中80度左右再浸提一小时。4）将上述亲体液通过含有硅藻土的色谱柱，分离得到纯度较高的黄酮类化合物。纯度检测黄酮类化合物的检测方法为目前被广泛使用的“络合物分光光度检测法”其主要步骤为：1）利用微分天平精确称取银杏叶黄酮化合物提取液适量，及适量亚硝酸钠，硝酸铝溶液，北京化工大学现代中药制药论文62）将上述溶液均匀混合，室温下以芦丁为标准溶液测银杏叶黄酮类提取物的吸光度。3）做标准吸收曲线，通过对应点的查找得到待测黄酮类物质的浓度。乙醇作为有机溶剂对银杏叶中活性成分提取的方法是相当经典的，通过适当的改变及调整浸提过程中的浸提时间，浸提温度，浸提次数等提取分离条件可明显提高银杏叶黄酮类化合物的提取效率。目前，国内许多学者对于银杏叶黄酮类化合物有机溶剂提取液法提取条件研究有很多，较有代表性的有田成瑞等的乙醇作为有机溶剂对黄酮类化合物进行提取的方法，这些学者引入科研研究中经常使用的单因子正交试验，进过一系列的研究得出，应用乙醇浸提的方法来对银杏叶中所含黄酮类化合物进行提取的最佳条件如下：乙醇，银杏叶液固质量比为6:1，浸提温度保持在80度，浸提时间1小时，连续浸提两次浸提效果最佳，浸提率可达到84%以上。该方法的主要优点是：操作简便，原理简单，过程清晰易懂，提取终目的产物纯度较高，杂质含量少等的优点。但该方法的缺点也很突出，主要是：提取步骤繁琐，浪费量较大，提取过程历时较长，提取效率低下等弊端。2.超临界流体萃取法(SFE)此方法以前经常被用于多种植物有机活性物质物质的提取及分离当中，我国学者中，崔星明等[i]，雒廷亮等[ii]，都曾采用过此方法来对芦荟，山茱萸等植物中所含的有机活性物质做过提取分离方面的研究，通过高效液相色谱质谱检测相连用发现，目的活性有机化合物中几乎不含杂质，且对分析所要求的样品量极其微小，并且具有计生能耗之优点。因只能对小部分样品进行处理，因为无法实现工业化大生产当中而目前仅停留在实验室用以植物活性成分定性及定量的研究阶段。3.半仿生提取目前对此方法用以对银杏萜类化合物提取的报道及研究还不是很多，但就其具体提取工艺理论比较简单易懂。该方法主要是模拟体内药物代谢过程，将萜类化合物先用盐酸经行初步溶解，然后用碱类化合物经行进一步浓缩，然后分液分离等。此种方法经济实用，可保证疗效[iii]。龚慕辛等[iv]通过比较水、不同浓度的乙醇、半仿生法及碱水提取对齐墩果酸提出量的影响，结果显示，半仿生提取齐墩果酸，提出量远高于一般水提。以pH=12的碱液提取女贞子可以使齐墩北京化工大学现代中药制药论文7果酸提出量大于75%乙醇的提出量，并且齐墩果酸不是以游离的形式存在，吸收利用率将提高，提取成本也大大降低。4.超声循环技术我国著名学者黄书铭等[v]曾用超生循环提取技术对灵芝中萜类化合物做过较为深刻的研究，通过研究其发现应用此法提取的灵芝萜类化合物杂质含量明显降低了很多，而提取效率较传统提取方法能提高40%之多，通过同传统方法的对比此法也大大简化了传统提取过程中繁琐的操作步骤，进而大大的缩短了提取时间。参考文献[i]崔星明,王勇为,陈光宇.超临界流体萃取芦笋中熊果酸的研究[F].上海农业学报,2004,21(1):123123.ii雒廷亮,张景伟,曹文豪,等.山茱萸中熊果酸提取工艺研究进展［J］.河南化工,2005,22(2):68.[iii]易中宏,郑一敏,胥秀英,等.分光光度法测定茯苓中总三萜类成分［J］.药,2005,16(4):847848.[iv]龚慕辛,贾富霞,王敏,等.不同提取方法对女贞子中齐墩果酸提出量的影响［J］.北京中医,1999,10(3):53.[v]黄书铭,杨新林,张自强,等.超声循环提取灵芝中三萜类化合物的研究［J］.中草药,2004,35(5):508510.