饼粕类饲料蛋白质降解率的研究

饼粕类饲料蛋白质降解率的研究饲料蛋白质降解率是反与家畜蛋白质营养新体系的基本参数，目前国际尚无统一评定方法，常用的方法有体内法，瘤胃尼龙袋法，人工瘤胃模拟技术，酶解率饲料蛋白质在瘤胃中降解率的测定方法是由真胃或十二指肠收集食糜样品，从总非氨态氮(NAN)中把微生物氮(M-}V/和内源氮分开，计算饲料蛋白质降解率。要测定单一饲料的降解率则采用差异法，就是将被测饲料加入到墓础日粮中，被测饲料的非降解蛋白质量为被测饲料的日粮与墓础日粮的非降解蛋白质之差，从而计算被测饲料蛋白质在瘤胃的降解率。体内法耗费大量财力物力，一般只在科研中使用。尼龙袋法是将若干个尼龙袋通过瘤胃屡管放人瘤胃，测定不同时间点饲料蛋白质消失率，再根据饲料外流速度(K)计算蛋白质的降解率。国际上已广泛应用尼龙袋法估测饲料蛋白质降解率，因为它比体内法简单、易行;但该方法要进行技术标谁化，使影响准确性的因素得到控制和定量，同时得到的估测结果必须用体内法校正1材料与方法5头分别装有瘤胃和真胃疾管的绵羊(体垂在37.5^-41.2kg，手术后15天开始试验)按单因子水平试验饲喂7种不同口粮:一为基础口粮，另6种是在基础日粮中加入被测饲料豆饼、芝麻粕、大豆、花生粕、处理豆饼.黄豆粉组成被测日粮(见表1)。动物每隔8h饲喂1次，自由饮水，侮次祠喂精料和干草各200g/头，何期试验为15天;第8天改喂带食糜标记物的精料(PEG和Cr=0。分别占精料的1%和0.5%，并按参考文献[1〕进行尼龙袋方法;第12^-13天惊隔2h连续48h收集真胃食糜，样品于一20`C下保存以备分析;第14，15天分别在饲喂前和饲喂后4h对瘤胃液和固形物采样。食糜标记物的分析和食糜量的计算及微生物标记物RNA的分析分别见参考文献在本试验的计算中，真胃食糜的日粮非降解蛋白质氮(UDN)包括内源氨，在假定内源氮一致的基础上，被测饲料UDN=被测日粮UDN一对照组UDN}2结果2.1尼龙袋法估测被测蛋白质补充料的蛋白质降解率，豆饼、芝麻粕、大豆粕、花生粕、处理豆饼、黄豆粉的蛋白质在瘤胃中各个时间点的消失率见表2，当外流速度(K)取0.033时，相应有效降解率分别为(%)75.77,66.36,67.64,75.12,35.51和90.2502.2体内法测定日粮和蛋白补充料的蛋白质降解率，当RNA作瘤胃微生物标记物估测微生物蛋白质氮产量时，豆饼组、芝麻粕组、大豆粕组、花生粕组、处理豆饼组、黄豆粉组、对照组的日粮蛋白质氮降解率(%)分别为67.89,69.82,66.56,70.70,63.03,72.17,18.05，豆饼、芝麻粕、大豆粕、花生粕、处理豆饼、黄豆粉的蛋白质降解率(%)分别为48.33,49.18.51.26,60.77,31.70和68.22(见表3)从表2和表3的6种被测蛋白质补充料的蛋白质氮降解率的结果中，体内法测定的降解率(Y)与尼龙袋法估测的有效降解率(X)有如下相关关系:Y=7.95+0.64X(r=0.94,=s,P。3讨论由真胃总非氨态氮和微生物氮之差确定日粮的非降解蛋白氮，可能由于忽略内源氮(包括在非降解蛋白氮内)而高估日粮真非降解蛋白氮，低估日粮蛋白质氮的降解率〔8〕。在定内源氮可忽略的基础上测定日粮蛋白氮降解率不真实，但校正依赖于内源氮的估测，目前内源氮的测定多用真胃灌注的方法〔’、’。〕。除了内源氮估测外，造成日粮降解率测定误差的因素还有真胃食糜流量的代表性和微生物氮的估测〔6-9]，因为微生物氮占到达真胃或十二指肠氮的50^-9000。目前估测真胃或十二指肠微生物氮没有确定方法，使用的方法都取决于测定在瘤胃中得到一个代表到达真胃或十二指肠微生物的微生物样品，使用不同标记物估测的值不同〔7.8.10]0由真胃总非氨态氮与微生物氮之差得到的降解率是估测整个日粮蛋白质的降解而不是单一饲料，要测定单一饲料蛋白质在瘤胃的降解则采用差异法间接估测;差异法假定到达真胃或十二指肠的非降解蛋白质氮是可加的，基础日粮在瘤胃有稳定的降解率。当基础日粮加入被测饲料时，仅间接证明被测饲料的加入不影响基础日粮在瘤胃的消化，对照组的食糜非微生物非氨态氮认为是基础日粮非降解氮与内源氮之和，用差异法测定单一饲料降解率时内源氮不需估测。在本研究中，对照组用酪蛋白代林被测饲料，对照组的真胃非降解日粮氮为基础日粮的非降解氮，酪蛋白在瘤胃中是完全降解的川。目前蛋白质补充料的蛋白质瘤胃降解率测定多用差异法，由于使用的微生物标记物和实验条件的不同，测定结果差异较大〔1.1B.l。〕。虽然尼龙袋法已被各国普遍使用，但真正系统地与体内法对比研究较少，Siddons等对比体内法和尼龙袋法估测蛋白质降解率时指出结果相近〔‘〕;Zinn等测定了6种饲料的体内法和尼龙袋法的降解率，结果高度相关(r=0.98);Madsen和Hvelplud进行了较系统的对比试验，两方法测得的结果相关系数为0.79''。我们测定结果的相关系数为0.94，尼龙袋法的值偏高，这可能与我们使用的尼龙袋有关，我们使用的国产尼龙袋孔径为50^-52Etm，国外报道都普遍使用30^-40}tm}5'`Z',Lindberg也指出体内法与尼龙袋法有偏差〔5]。尼龙袋法估测饼粕类饲料蛋白质降解率能很好