血流感染的实验室诊断.

血流感染的实验室诊断1血流感染概述2自动化血培养系统3标本采集和运送4阳性报警后处理方法5如何判断是否污染一、血流感染概述（一）血流感染的定义血流感染（bloodstreaminfections,BSI）是指各种病原微生物侵入血循环，释放毒素和代谢产物，并诱导细胞因子释放，对机体所有脏器造成损害，严重者可导致休克、多脏器衰竭、弥散性血管内凝血，甚至死亡，是一种严重的全身感染性疾病。（二）血流感染的类型菌血症（bacteremia）：细菌侵入血流，尚未大量繁殖且未引发临床症状，往往是一过性的。败血症（septicemia）：细菌进入血液大量繁殖，分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状。脓毒败血症（pyemia）：细菌进入血液大量繁殖，分泌毒素或代谢产物，产生严重的临床症状，常伴有多发性脓肿或败血性休克。毒血症（toxemia）：细菌毒素或代谢产物进入血液引起的临床病症。（三）血培养的现状送检率低送检量（瓶/日）床位中国大陆三甲医院20～501000中国香港玛丽医院2001400中国台湾台大医院3002000美国JohnHopinks300～4001039（三）血培养的现状不正确采样污染问题皮肤定植菌群是血培养污染的最常见细菌。阳性检出率低检验周期长二、全自动血培养系统二、自动化血培养系统我院使用的是BacT/ALERT3D全自动细菌、分枝杆菌培养系统工作原理：细菌在培养基中代谢基质时产生CO2,并水解成H+，H+透过瓶底滤过膜，瓶底乳胶感应器颜色由墨绿色变成黄色。二、自动化血培养系统仪器培养孔底的光电探测器测量反射光变化并按相应公式计算。判读公式：加速度法速率法起始阈值法三、标本采集和运送（一）标本采集采集时间1.尽可能在抗菌药物使用前；2.对已经使用抗菌药物的病人，最好在下次用药前采集；3.寒战和发热初起时采血可提高培养阳性率，心内膜炎（持续性菌血症）例外；4.怀疑血流感染时应尽早采血，不要强调体温超过39℃才抽血，而错过时机。（一）标本采集寒战后体温高峰前细菌含量最高。血液细菌含量随着体温从最高峰逐渐下降而越来越少。血液采样的最佳时间是在寒战后和发热高峰前，此时阳性检出率最高。（一）标本采集采血量成人采血量为5～10ml/瓶，分别采取需氧瓶和厌氧瓶，双部位抽血。儿童采血量为3～5ml/瓶，采取儿童瓶。采血量对阳性检出率的影响020406080100120010203040506070采血量（ml）阳性检出率（%）（二）标本运送采血后的血培养瓶应立即送检，不得超过2h。不能放入冰箱或冷冻，有些苛养菌如肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌等遇冷很容易死亡。如在培养之前不得不放置一段时间，应置于室温。四、阳性报警后处理方法血培养阳性报警后，如何处理？观察培养曲线涂片、转种血平板革兰染色镜检报告危急值若革兰染色镜检未发现细菌，怎么办？重新涂片，作瑞氏染色以培养曲线作初步判断是否假阳性，次日观察血平板上是否生长阳性曲线阴性曲线假阳性曲线五、如何判断是否污染？五、如何判断是否污染？（一）阳性检出瓶数（二）细菌种类（三）阳性检出时间（四）重复培养结果（一）阳性检出瓶数两瓶血培养，检出一瓶，考虑污染两瓶血培养，检出两瓶，即使是凝固酶阴性的葡萄球菌，也应考虑为致病菌（二）细菌种类检出金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌及其他肠杆科细菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌时，90%以上是致病菌。检出化脓性链球菌、无乳链球菌、产单核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌、新生隐球菌及其他假丝酵母菌，污染的可能性更低。检出棒杆菌、微球菌、气球菌、芽胞杆菌、凝固酶阴性葡萄球菌，污染的可能性很大。（三）阳性检出时间阳性检出时间与血标本中含菌量呈反比关系。阳性报警出现时间小于24h，一般为血流感染大于48h，多为污染（四）重复培养结果与病人静脉导管培养或其他部位标本的培养结果相比较，2次以上分离细菌的菌种与药敏谱相同时，考虑血流感染。