葎草药理活性部位的筛选-结题报告

葎草药理活性部位的筛选-结题报告申请人：聂娟指导教师：张丹第一部分：[课题提出的背景及意义]葎草（Humulusscandens(Lour．)Merr．）为桑科葎草属植物[1]，始载于《唐本草》，名为葛葎蔓[2]。葎草来源于被子植物桑科葎草属，中国葎草属植物包括两种、一变种，为葎草（Humulusscandens(Lour．)Merr．）、忽布（HumuluslupulusLinn.）及其变种华忽布。全草具有清热解毒、利尿消肿等功效，内用主治肺结核潮热、胃肠炎、痢疾、感冒发热、膀胱炎、肾盂肾炎、泌尿系结石、痔疮等症，外用治疗痈疥肿毒、湿疹、虫蛇咬伤等症[9]。但是葎草药效物质基础并不明确，本实验拟通过药理筛选确定其药理活性部位。第二部分：[研究的主要内容和目标]确定葎草药理活性的有效部位第三部分：[研究方法]采用系统溶剂萃取的方法制备葎草不同极性部位，采用抗炎镇痛药理模型筛选葎草药理活性部位。第四部分：[研究工作的组织与实施]张丹老师作为指导，本研究小组讨论提出研究方案，通过预实验确定了葎草药液的浓度，经过修改完善，确定研究方案。研究的阶段分为实验准备阶段，绿草不同极性部位的制备，葎草药理活性部位的筛选二个阶段，最后进行数据分析，撰写实验报告。第五部分：[研究结论与成果]实验结果表明葎草乙酸乙酯提取部位具有明显的抗炎镇痛作用，且存在一定的量效关系。第六部分：[质量与效果分析]对研究结果进行分析：本实验通过抗炎镇痛药理模型筛选，基本确定葎草药理活性部位，为葎草的开发利用奠定基础。二甲苯致小鼠耳肿胀实验和醋酸扭体实验是两种用于抗炎镇痛药初筛的常用方法，均为成熟的药理模型，药理实验设计合理。研究的自我评价：葎草为民间习用药物，分布于全国各地，资源量很大，目前常作为农业杂草被除去，如能挖掘其药用价值，将具有较广阔的开发前景。本实验证明其乙酸乙酯提取物具有明显的抗炎镇痛药理作用，已知葎草乙酸乙酯提取物中含有多种黄酮类化合物，如木犀草素、牡荆素等，其抗炎镇痛药理作用可能与黄酮类化合物有关。研究中的主要问题是动物实验中个体差异较大，造成实验误差较大，药理数据统计分析较困难。收获与体会：通过本实验，同学们学习了中药药理活性部位筛选的方法，为以后新中药资源的研究奠定了基础，学习了一些药理实验中的基本知识以及中药药液配制的基本常识。第七部分：[进一步要研究的问题]本实验初步研究表明葎草乙酸乙酯部位为抗炎镇痛活性部位，但需要药理重复实验进一步证明，同时其抗炎镇痛的作用机制尚不明确。附：实验报告一、实验目的确定葎草药理活性的有效部位二、实验内容1.葎草不同极性部位的制备。2.葎草抗炎活性部位的筛选。3.葎草镇痛活性部位的筛选。三、试验方法1.葎草提取液的制备取1Kg十月份葎草全草用95％乙醇冷浸三次每次三天，合并提取液，回收乙醇，即得。2.不同部位的分离浸膏加蒸馏水，超声波助溶，分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收有机溶剂得到不同部位，称重。3.抗炎部位的筛选取乙酸乙酯层、正丁醇层、水层的浸膏，每个极性部位分别按60公斤重的人的生药量为7.5克、15克、30克，用生理盐水配制成高、中、低三个浓度的样品液。将小鼠55只，随机分为空白组、阳性对照组及乙酸乙酯、正丁醇、水3个葎草部位高、中、低组，每组5只，用制备好的样品液分别给三个葎草部位高、中、低组灌胃一周，空白组用生理盐水。最大量为0.4ml。灌胃一周后阳性对照组用阿司匹林灌胃，其剂量为300㎎/㎏。灌胃一小时后，用0.1ml二甲苯涂小鼠左耳，40分钟后用乙醚将小鼠麻醉，在小鼠的两只耳朵同一位置打洞，用分析天平称重。4.镇痛部位的筛选取乙酸乙酯层、正丁醇层、水层的浸膏，每个极性部位分别按60公斤重的人的生药量为7.5克、15克、30克，用生理盐水配制成高、中、低三个浓度的样品液。将小鼠55只，随机分为空白组、阳性对照组及乙酸乙酯、正丁醇、水3个葎草部位高、中、低组，每组5只，用制备好的样品液分别给三个葎草部位高、中、低组灌胃一周，空白组用生理盐水。最大量为0.4ml。灌胃一周后阳性对照组用阿司匹林灌胃，其剂量为300㎎/㎏。灌胃一小时后用0.7%的乙酸灌胃，用量为0.3ml。观察小鼠开始扭体的时间及10分钟内扭体次数。四、实验结果1．抗炎1234左右左右左右左右水低0.00830.00940.01650.0085死死0.01070.0085水中0.00850.01010.01100.00780.01320.0080.00780.008水高0.01230.00680.01070.0080.01350.00820.00950.0062乙低0.00940.00750.01090.00670.00940.00740.01190.0127乙中0.00950.00660.01220.01110.01430.00710.00910.0074乙高0.01270.00820.01150.00670.01370.00750.00890.0070正低0.01040.00860.01230.00780.01230.00720.01360.0099正中0.01130.00560.01630.00810.01360.01140.01510.0088正高0.00940.00740.00870.00750.01820.00850.01550.009阴0.01120.00750.00940.00920.01320.01270.00950.0098阳0.00890.00800.00880.00870.00750.00760.00730.009512342．镇痛五、实验结论实验结果表明葎草乙酸乙酯提取部位具有明显的抗炎镇痛作用，且存在一定的量效关系。六、实验讨论本实验所用小鼠未经筛选，当中可能存在不敏感个体，同时小鼠大小不一存在个体差异导致实验结果不够准确，尚需药理重复实验进一步证明。点评：1、各部分有点简单。2、实验数据列表分析。3、缺乏参考文献。4、完成论文并投稿。开始时间次数开始时间次数开始时间次数开始时间次数水低死死死死4′15″234′47″20水中3′00″294′17″83′49″264′09″25水高3′58″374′00″343′17″292′43″30乙低3′23″313′16″342′30″373′25″24乙中4′58″263′50″332′12″53″3′09″23乙高3′22″372′34″222′33″373′38″27正低3′42″334′24″252′54″192′55″38正中3′22″324′18″187′38″2死死正高2′40″264′10″263′37″24死死阴3′16″315′00″334′8″83′00″40阳4′8″234′46″244′21″254′40″23