薏苡仁炮制工艺及质量标准规范化研究进展及研究设计

薏苡仁炮制工艺及质量标准规范化研究进展及研究设计第三组：李晓菲张娜李姝影薏苡仁1、炮制工艺2、研究设计3、质量标准研究草案简介薏苡仁为禾本科（Gramineae）植物薏苡Coixlachryma-jobiL.var.mayuon（Roman）Stapf.的干燥成熟种仁。始载于《神农本草经》，列为上品，其味甘、淡，性凉。具有健脾利湿，清热排脓之功效。薏苡仁全国各省区均产，以福建、河北质量最好，习称蒲米仁或祁苡仁。临床应用1镇痛，抗炎，抗血栓形成作用2抗病毒作用3促进排卵作用4抗溃疡，止泻和缓慢的促进胆汁分泌作用5增强免疫功能6降血糖作用7抗肿瘤作用（一）炮制工艺：历史沿革1清炒法：清炒法是不加任何辅料或药物进行炒制的方法。宋最早提出清炒薏苡仁。2盐炒法：盐炒即以盐为辅料与薏苡仁进行炒制的方法。《雷公炮炙论》最早提出盐炒3姜汁炒：姜汁炒法即将薏苡仁与姜汁拌炒。清代最早提出姜汁炒。4土炒法：是指薏苡仁与土拌炒的方法。清《得配本草》提出“壁土炒”。5糯米共炒法：即将薏苡仁与糯米共炒的方法。薏苡仁的炮制历史可以追溯到南北朝时期。但是，对于其炮制工艺及原理一直没有进行科学的研究。这攸待我们进行进一步深入的科学研究。现代炮制研究：2019/12/181麸炒法：取麸皮，撒入热锅中，加热至冒烟时，加入薏苡仁，迅速翻动，炒制微黄色，取出，筛去麸皮，放凉。每100kg薏苡仁用麸皮10kg。此法已成为现行《中国药典》的法定方法。2烫制此法现代有两种方法。2.1《湖南省中药材炮制规范》有，取净薏苡仁，置锅内隔火蒸熟，取出，晒干，用油砂炒至发泡，取出，筛去油砂，放凉即得。2.2《中药炮制经验集成》有，先将砂炒热，加入薏苡仁与食油少许炒至发胖，筛去砂即可。3蒸制《中药炮制经验集成》中有，取薏苡仁加水浸24小时，蒸3-4小时，蒸透后晒干（冬季须霜露1-2天后再晒干）；或浸1-2昼夜，用大火蒸4小时，边蒸边洒水（约每小时洒1次），蒸后放凉即可。现今《中国药典》收载的唯一法定炮制饮片的麸炒薏苡仁，但其炮制程度如何控制，尚缺乏明确的工艺参数和控制指标，这直接影响饮片的质量及临床应用。薏苡仁中抗肿瘤和提高机体免疫力的主要成分甘油三油酸酯和总多糖的含量，并以此为含量测定的考察指标，确定了麸炒薏苡仁的最佳炮制工艺，并对其质量标准做了初步的制定，希望为薏苡仁饮片的生产及应用提供理论基础。（二）研究设计研究设计1对薏苡仁的炒制温度、炒制时间及加麸量做单因素考察2以炒制温度、炒制时间及加麸量作为因素，以甘油三油酸酯和总多糖的含量为指标，运用L9（34）正交实验进行分析，优选最佳炮制工艺。3验证试验水平因素炒制温度(。C)炒制时间（min）加麸量（g）123指标含量测定1甘油三油酸酯含量测定照高效液相色谱法(附录ⅥD)测定。色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-二氯甲烷(65：35)为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按甘油三油酸酯峰计算应不低于5000。对照品溶液的制备：取甘油三油酸酯对照品适量，精密称定，加流动相制成每1ml含0.14mg的溶液，即得。供试品溶液的制备：取本品粉末(过三号筛)约0.6g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入流动相50ml，称定重量，浸泡2小时，超声处理(功率300W，频率50kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用流动相补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法：分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液5～10μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。精密度实验考察：精密吸取上述配制的甘油三油酸酯对照品溶液，连续进样6次，每次10μL，按上述色谱条件，测定色谱峰面积稳定性实验：精密吸取同一供试品溶液各10μL，分别在0时、1时、2时、4时、6时、8时，进样分析，测定色谱峰面积重现性实验取薏苡仁样品粉末六份，制备供试品溶液，连续进样六次，每次10μL，计算含量加样回收率实验取已知甘油三油酸酯含量的麸炒薏苡仁样品6份，每份约0.5g精密称定，分别精密加入甘油三油酸酯对照品适量，制成供试品溶液，测定2薏苡仁总多糖的含量测定照紫外-可见分光光度法（《中国药典》2010版一部附录ⅤA）测定。光谱条件测量波长：490nm。显色：硫酸-苯酚法。空白：纯净水。对照品溶液的制备称取D-无水葡萄糖适量，精密称定，定容于250mL量瓶中，加蒸馏水溶解并稀释至刻度，制成浓度为0.6012mg·mL-1的储备液。供试品溶液的制备取薏苡仁样品适量，粉碎，取过三号筛者约1g，精密称定，置于150mL圆底烧瓶中，精密加入石油醚（60-90℃）50mL，加热回流2h放冷，滤过，滤渣用相同体积石油醚（60-90℃）再加热回流提取2h，滤过，滤渣挥干石油醚后精密加入80%乙醇50mL，加热回流2h放冷，滤过，滤渣用80%乙醇洗涤3次，每次10mL，滤渣挥干乙醇后精密加入蒸馏水50mL回流提取2h后取出，放凉，滤过，用蒸馏水洗涤3次，每次10mL，合并各次蒸馏水滤液，定容于100mL量瓶中。精密吸取上述提取液5mL加蒸馏水定容于100mL量瓶中，即得供试品溶液。测定法取供试液2mL于具塞试管中，加入1mL5%苯酚试液，摇匀后，迅速加入7mL浓硫酸，摇匀后放置5min，置50-60℃水浴保温30min，于冰水浴中放置5min，取出，供紫外测试。取2mL纯净水为空白液，于488nm下测定吸光度。根据回归方程计算供试品液的浓度，并换算成百分含量。精密度实验取一定浓度的标准品溶液，按上述条件，连续6次测定吸光度稳定性实验取供试品溶液2.0mL，按照6.2.4项下方法显色后，室温下放置，在上述光谱条件下于0、10、20、30、40、50、60min时间间隔，分别进行分析，测定样品吸光度重现性实验取薏苡仁样品粉末六份，制备供试品溶液，显色后连续分析六次，计算总多糖含量加样回收率实验取已知多糖含量的薏苡仁样品6份，每份约0.5g，精密称定，分别精密加入D-无水葡萄糖对照品适量，测定样品吸光度。浸出物的测定：分别取薏苡仁生品及放大的炮制品，粉碎，过60目筛，精密称取2g，按《中国药典》2010版一部（附录XA）醇溶性浸出物测定法项下的热浸法操作，用乙醇作溶剂包装和储存条件：根据饮片成分的性质，对包装材料、包装规格和储存条件进行必要的研究。在研究基础上对包装材料、包装规格和储存条件做出说明。检查：含杂质、水分、总灰分、酸不溶灰分、铅(Pb)、砷(As)、汞(Hg)、镉（Cd）、铜（Cu）等重金属、有机农药(有机氯、有机磷)残留量、微生物、真菌毒素（主要是黄曲霉素）等方面的限度要求。（三）麸炒薏苡仁质量标准研究草案麸炒薏苡仁FuchaoyiyirenSEMENCOICISWITHWHEATBRAN本品为禾本科植物薏苡Coixlachryma-jobiL.var.mayuen（Roman.）Stapf的干燥成熟种仁。秋季果实成熟时采割植株，晾干，打下果实，再晒干，除去外壳、黄褐色种皮及杂质，收集种仁。【制法】取麸皮20g，撒在热锅中，加热至冒烟时，加入薏苡仁100g，于210-220℃炒制60s，取出，筛去麸皮，放凉。【性状】本品呈宽卵形或长椭圆形，长4～8mm，宽3～6mm。表面黄色，微鼓起。一端钝圆，另端较宽而微凹；背面圆凸，腹面有1条较宽而深的纵沟。质坚实，断面白色，粉性。有焦香气，味微甜。【鉴别】（1）粉末鉴别：本品粉末淡类白色。主要为淀粉粒，单粒类圆形或多面形，直径2～20μm，脐点星状；复粒少见，一般由2～3分粒组成。（2）理化鉴别：按薏苡仁项下的[鉴别]（2）试验，显相同的结果。（3）色谱鉴别：按薏苡仁项下的[鉴别]（3）试验，显相同的结果。（三）麸炒薏苡仁质量标准研究草案【含量测定】按薏苡仁[含量测定]项下的方法测定，含甘油三油酸酯（C57H104O6），不得少于0.70%，总多糖不少于3.5%。【检查】杂质不得过0.7%。水分照水分测定法（附录IXH第一法），不得过9.0%。总灰分不得过4.0%（附录IXK）。【浸出物】照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法（附录XA）测定，用乙醇作溶剂，不得少于10.0%。【性味与归经】甘、淡，凉。归脾、胃、肺经。【功能与主治】健脾渗湿，除痹止泻，清热排浓。用于水肿，脚气，小便不利，湿痹拘挛，脾虚泄泻，肺痈，肠痈；扁平疣。【用法与用量】9～30g。【贮藏】置通风干燥处，防蛀。