蛋白质化学习题参考答案

习题——蛋白质化学反应基团试剂主要产物应用α-NH2茚三酮紫色、红色物对氨基酸显色，纸层析实验α＝NH2茚三酮黄色物Pro的鉴定α-NH2HNO2N2等游离aa定量，蛋白质水解程度α-NH2DNFB二硝基氟苯Sanger试剂DNP-aa二硝基苯黄色物蛋白质N端测定一级结构分析标准图谱α-NH2PITC苯异硫氰酸酯Edman试剂PTC-aa在无水的酸中环化成PTH-aa蛋白质N端测定一级结构分析aa顺序自动分析仪标准图谱α-NH2甲醛羟甲基-aa和二羟甲基-aa甲醛滴定aa含量（封闭氨基）Arg的胍基α-萘酚次溴酸钠坂口试剂桃红色物鉴定Arg（二）化学性质Met的-S-CH3H2O2过氧化物吸烟有害，烟中的过氧化物，弹性蛋白酶，抑制剂Met，肺气肿。Cys的-SH巯基乙醇HSCH2CH2OH过甲酸HCOOOH碘代乙酸ICH2COOH巯基-SH磺基HS3O-肽链拆分，作用与Cyss上的二硫键His的咪唑基重氮苯磺酸Pauly试剂樱红色物（1His连2重）鉴定HisTyr的酚基重氮苯磺酸Pauly试剂桔黄色物鉴定TyrTyr的酚基磷钼酸、磷钨酸Folin酚试剂兰色物质定量测定蛋白质、Tyr，见生化实验。Trp的吲哚基对二甲基氨基苯甲醛兰色物质鉴定Trp-OHSer、Thr、Tyr激酶、ATPP-aa调节酶的活性，测定酶的活性中心一、选择题1、蛋白质一级结构的主要化学键是（C）A．氢键B．疏水键C．肽键D．二硫键2、蛋白质变性后可出现的现象是（D）A．一级结构发生改变B．构型发生改变C．分子量变小D．构象发生改变3、血红蛋白的氧合曲线呈（A）A．S形曲线B．抛物线C．双曲线D．直线4、蛋白质变性后出现的变化是（D）A．一级结构发生改变B．溶解度变大C．构型发生改变D．构象发生改变5、每分子血红蛋白可结合氧的分子数为（D）A．1Ｂ．2Ｃ．3Ｄ．46、不会导致蛋白质变性的方法有（A）A．低温盐析B．常温醇沉淀C．用重金属盐沉淀D．用三氯乙酸沉淀7、下列不具有手性碳原子的氨基酸是（D）A．丝氨酸B．丙氨酸C．亮氨酸D．甘氨酸8、下列氨基酸中，含有吲哚环的是（C）A．蛋氨酸B．苏氨酸C．色氨酸D．组氨酸9、某一蛋白质分子中一个氨基酸发生变化，这个蛋白质（A）A．二级结构一定改变B．二级结构一定不变C．三级结构一定改变D．功能一定改变10、煤气中毒主要是因为煤气中的一氧化碳（C）A、抑制了巯基酶的活性，使巯基酶失活B、抑制了胆碱酯酶的活性，使乙酰胆碱累积，引起神经中毒的症状C、和血红蛋白结合后，血红蛋白失去了运输氧的能力，使患者因缺氧而死亡D、抑制了体内所有酶的活性，使代谢反应不能正常进行11、肌红蛋白的氧合曲线呈（A）A．双曲线B．抛物线C．S形曲线D．直线12、测定蛋白质含量必需有完整的肽键的方法是（C）A．紫外吸收B．凯氏定氮法C．双缩脲法D．茚三酮反应13、下列氨基酸是必需氨基酸的为（C）．A．丙氨酸B．精氨酸C．赖氨酸D．谷氨酰氨14、维持蛋白质三级结构主要靠（D）A．范德华力B．氢键C．盐键D．疏水相互作用15、氨基酸与蛋白质共有的性质是（C）A．胶体性质B．变性性质C．两性性质D．双缩脲反应16、可分开抗体IgG分子的重链和轻链（-S-S-相连）的试剂是（B）A．胃蛋白酶B．巯基乙醇C．尿素D．乙醇胺17、Sanger试剂是指（B）A．PITCB．DNFBC．DNS-C1D．对氯苯甲酸18、蛋白质变性是由于（A）A．氢键被破坏B．肽键断裂C．蛋白质降解D．水化层被破坏及电荷被中和19、Edman试剂是指（A）A．PITCB．DNFBC．DNS-C1D．对氯苯甲酸20、下列氨基酸中，含有咪唑基的是（D）A．蛋氨酸B．苏氨酸C．色氨酸D．组氨酸21、下列是非必需氨基酸的是（B）A．亮氨酸B．丙氨酸C．赖氨酸D．异亮氨酸22、氨基酸有的性质是（C）A．胶体性质B．变性性质C．两性性质D．双缩脲反应23、蛋白质在等电点时，应具有的特点是（D）A．不具有正电荷B．不具有负电荷C．既不具有正电荷也不具有负电荷D．在电场中不泳动24、以下说法错误的是（A）A.pH增加，血红蛋白与氧的亲和力增加B.二氧化碳分压增加，血红蛋白与氧的亲和力下降C.氧气分压下降，血红蛋白与氧的亲和力下降D.α2β2解聚成单个亚基，血红蛋白与氧的亲和力降低25、每分子肌红蛋白可结合氧的分子数为（A）A．1B．2C．3D．426、下列氨基酸中，碱性氨基酸是（D）A．蛋氨酸B．苏氨酸C．丝氨酸D．赖氨酸27、人体内代谢生成γ-氨基丁酸的氨基酸是（B）A．苏氨酸B．谷氨酸C．谷氨酰胺D．赖氨酸28、为获得不变性的蛋白质，常用的方法为（D）A.常温醇沉淀B.用苦味酸沉淀C.用重金属盐沉淀D.低温盐析29、下列氨基酸中，极性最强的氨基酸是（A）A．酪氨酸B．苏氨酸C．丝氨酸D．缬氨酸二、填空题1、蛋白质二级结构的主要形式有α－螺旋、β－折叠、β－转角、无规则卷曲。2、氨基酸在等电点（pI）时，以__兼性__离子形式存在，在pHpI时以__阴__离子存在，在pHpI时以__阳__离子存在。3、组成蛋白质的20种基本氨基酸中，含硫的氨基酸有蛋（甲硫）氨酸、半胱氨酸。4、已知Gly的pKa1为2.34，pKa2为9.60，则其等电点pI为5.97。5、蛋白质的最大紫外吸收波长是280nm。6、肌红蛋白的氧合曲线是双曲线型曲线，而血红蛋白的氧合曲线S-型曲线。7、抗体就是免疫球蛋白。8、蛋白质的生物学功能归根到底取决于以一级结构为基础的三级结构。9、蛋白质是由氨基酸通过肽键相连而成的大分子物质。10、高浓度的盐溶液使蛋白质沉淀的方法叫盐析。11、因为蛋白质分子中的phe、tyr、trp三种氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力，通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量。12、已知Glu的pK1为2.19,pK2为4.25，pK3为9.67，其等电点为6.96。13、目前，测定蛋白质构象的常用方法是X-射线衍射法。14、已知Asp的pKa值为2.09、3.86、9.82，其等电点为3.48，它在pH7的缓冲液中电泳时，移动方向为朝向正极。15、胰岛素是由2条肽链，共51个氨基酸组成的蛋白质，分子中有3对二硫键。16、对哺乳动物而言，必需氨基酸有8种，其中为碱性氨基酸的是lys。17、维持蛋白质一级结构的主要作用力是肽键，维持蛋白质二级结构的主要作用力为氢键，而持蛋白质三和四级结构的主要作用力是疏水作用。18、合成血红蛋白中血红素的亚基有4条，分为α和β两种。肌红蛋白由1肽链组成。三、判断题1、一般情况下，亮氨酸的疏水性比丙氨酸弱。（＋）2、大多数蛋白质的主要带电基团并不是由于它的N-末端的氨基和C-末端的羧基形成的。（＋）3、胰岛素是由两个基因分别合成A链和B链，然后再通过氧化连接而成。（－）4、在水溶液中，蛋白质溶解度最小的pH值通常就是它的等电点。（＋）5、Ser和Tyr经脱氨后都产生α-酮酸，所以都是生糖氨基酸。（－）6、蛋白质的氨基酸顺序一级结构在很大程度上决定了它的构象高级结构。（＋）7、天然氨基酸都具有一个不对称α-碳原子。（－）8、变性蛋白质溶解度降低是因为蛋白质分子中的电荷被中和以及除去了蛋白质外面的水化层所致。（＋）9、在很高或很低的pH值时，氨基酸才主要以非离子化形式存在。（－）10、水溶液中蛋白质分子表面的氢原子相互形成氢键。（－）11、自然界的蛋白质和多肽均由L-型氨基酸组成。（－）12、蛋白质的变性过程是蛋白质一级结构被破坏从而导致理化性质和生物活性改变的过程。－13、蛋白质的肽链和亚基是同义的。（－）14、因为蛋白质分子中的杂环族氨基酸的共轭双键有紫外吸收能力，通常可用紫外分光光度法测定蛋白质的含量。（－）15、蛋白质等电点是指蛋白质处于净电荷为零时溶液的PH值。（＋）16、蛋白质的功能由蛋白质的三级结构或四级结构执行，所有一级结构的细微改变不会影响蛋白质的功能。（－）17、半必需氨基酸是指人需要量很少，所以是可有可无的一类氨基酸。（－）18、由氨基酸通式可知，组成蛋白质的20中氨基酸均为-氨基酸。（－）19、脯氨酸是一种含亚氨基的氨基酸。（＋）20、人体可以合成Arg，所以它是非必需氨基酸。（－）21、由于各种氨基酸都有在280nm的光吸收特征，据此可以作为紫外吸收法定性检测蛋白质的依据。（－）22、谷胱甘肽分子中含有巯基，故能参与体内一些氧化还原反应。（＋）23、蛋白质的生理价值主要决定于必需氨基酸的总量。（＋）24、具有四级结构的蛋白质，当它的每个亚基单独存在时仍能保持蛋白质原有的生物活性。－25、变性后的蛋白质其分子量也发生改变。（－）26、氨基酸间通过肽键连接而形成蛋白质。（＋）27．生物体内只有蛋白质才含有氨基酸。（－）28、人体中只含有20种氨基酸而不含有其他氨基酸。（－）29、蛋白质分子中个别氨基酸的取代未必会引起蛋白质活性的改变。（＋）30、Lys为必需氨基酸，动物和植物都不能合成，但微生物能合成。（－）31、可以采用透析和超过滤的方法分离蛋白质。（＋）四、名词解释1、结构域：肽链分子在二级或三级结构的基础上形成的特定区域。2、肽键：是由一个氨基酸的α氨基与另一氨基酸的α羧基缩合失去1分子水而形成的化学键。3、蛋白质二级结构：是指蛋白质肽链在一级结构的基础上按照一定方式规则的折叠形成的空间结构。4、波尔效应：血液中CO2浓度的增加、降低细胞内的pH,引起红细胞内血红蛋白氧亲和力下降，促进血红蛋白释放氧；反之，高浓度的氧气或者增加氧分压，都将促进脱氧血红蛋白分子释放H+和二氧化碳。这些相互有关的现象称为波尔效应。5、信号肽：常指新合成多肽链中用于指导蛋白质跨膜转移（定位）的N末端的一段疏水氨基酸序列（约20－30个，有时不一定在N末端）。完成功能后被水解。6、必需氨基酸：指人（或其他脊椎动物）自己不能合成，需要从饮食中获得的氨基酸，（1分）包括lys、trp、val、phe、thr、leu、Ile、met共8种。7、别构效应：又称变构效应，当某些寡聚蛋白与别构效应剂发生作用时，可以通过蛋白质构象的变化来改变蛋白的活性，这种改变可以是活性的增加或减少。变构效应剂可以是蛋白质本身的作用物，也可以是作用物以外的物质。8、pI：指氨基酸处于正负电荷数相等即净电荷为零（兼性离子状态）时溶液的pH值。9、蛋白质的变性：天然蛋白质分子受到某些物理、化学因素，如热、声、光、脲、酸等的影响，生物活性丧失，溶解度下降，物理化学常数发生变化。蛋白质的变性作用只是三维构象的改变，而不涉及一级结构的改变。10、蛋白质的三级结构：指一条多肽链在二级结构（超二级结构及结构域）的基础上，进一步的盘绕、折叠，从而产生特定的空间结构，或者说三级结构是指多肽链中所有原子的空间排布。五、问答题1、把一个氨基酸结晶加入pH7.0的纯水中，得到pH6.0的溶液，问此氨基酸的pI值是大于6.0？小于6.0？还是等于6.0？若一个氨基酸结晶加入pH7.0的纯水中，得到pH8.0的溶液，问此氨基酸的pI值是大于8.0？小于8.0？还是等于8.0？说明理由。答：把一个氨基酸结晶加入pH7.0的纯水中，得到pH6.0的溶液，pH下降，溶液中H＋浓度增加，表明氨基酸解离释放了H＋，所以此时氨基酸带负电荷，只有加酸才能使氨基酸的解离平衡向净电荷为零的方向移动，而加入酸后溶液的pH一定小于6.0，（2分）所以此氨基酸的pI值是小于6.0。（1分）若一个氨基酸结晶加入pH7.0的纯水中，得到pH8.0的溶液，此氨基酸的pI值是大于8.0。（1分）原理同上。2、什么是内肽酶，什么是外肽酶？蛋白质消化过程中有哪些内肽酶与外肽酶，各自的作用位点有何不同？答：外肽酶是指从肽链的N-或C-端向内逐个水解下氨基酸的酶，对于水解肽链中间肽键的酶则称为内肽酶。外肽酶有氨肽酶（作用于氨基末端肽键）、羧肽酶A（能释放除Pro、Arg和Lys之外的所有C-末端残基）、羧肽酶B（只作用于以碱性氨基酸为羧基末端的肽键）；内肽酶有胃蛋白酶、胰蛋白酶（作用于Arg、Lys羧基参与形成的肽键）、胰凝乳蛋白酶（作用于Trp、T