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与组织炎症及损伤,参与多种疾病的病理生理过程。研论著Lunzhu《中国医学创新》第9卷第9期(总第219期)2012年3月血浆一氧化氮水平与支气管哮喘的相关性研究*陈嘉馨①陆家政②黎惠贞①吴荣华①杜一凡②麦燕瑜①臧林泉②【摘要】目的:观察支气管哮喘患者血浆一氧化氮水平的变化,研究其与支气管哮喘的相关性。方法:将70例支气管哮喘患者分为哮喘缓解期组30例,轻度急性发作期组10例,中度急性发作期组12例,重度急性发作期组18例;正常对照组15例,采用硝酸还原酶法测定血浆一氧化氮水平并检测肺功能和测定诱导痰细胞的计数及分类。结果:支气管哮喘患者的血浆一氧化氮水平显著高于正常对照组(P0.01),其中急性发作期组显著高于缓解期组(P0.01),急性发作期组中轻度、中度、重度三者之间比较差异均有统计学意义(P0.01)。线性相关性分析显示,一氧化氮水平与支气管哮喘发作有相关性。研究对象所处的状态(健康、哮喘缓解期及哮喘发作期)与血浆一氧化氮水平明显相关(r=0.786,P0.01)。急性发作期患者血浆一氧化氮水平与FEV1.0%预计值(r=-0.872,P0.01)和诱导痰巨噬细胞百分比(r=-0.820,P0.01)呈负相关;与诱导痰细胞总数、中性粒细胞百分比及诱导痰嗜酸细胞百分比呈正相关(分别为0.857、0.816和0.825,P0.01)。结论:血浆一氧化氮水平升高,与支气管哮喘发生、发展相关,可能参与哮喘的发病,内源性一氧化氮作为一种无创性指标监测疾病的严重程度和活动度具有一定意义。【关键词】一氧化氮;支气管哮喘;诱导痰StudyontheEffectofthePlasmaLevelofNitricOxideonPatientswithAcuteAsthma/CHENJia-xin,LUJia-zheng,LIHui-zhen,etal.//MedicalInnovationofChina,2012,9(9):6-8【Abstract】Objective:Toinvestigatetheeffectofnitricoxide(NO)onpatientswithasthma.Methods:LevelsofserumNO(nitratereductasemethod),lungfunction,andcelldifferentialcountininducedsputumwerestudiedin40patientswithacuteexacerbationofasthma,30patientswithstableasthmaand15healthsubjects.Results:TheserumNOlevelwas(43.28±4.06)μmol/Lincontrolgroup(15cases),(56.30±3.07)μmol/Linpatientswithstableasthma(30cases),(65.57±2.38)μmol/Linpatientswithmildofacuteexacerbationasthma(10cases),(71.73±6.08)μmol/Linthatwithmoderateofacuteexacerbationasthma(12cases),and(87.36±7.15)μmol/Linthatwithsevereofacuteexacerbationasthma(18cases).Statusofthesubjects(inhealth,stableasthma,andexacerbationofasthma)waspositivelycorrelatedwithNOinserum(r=0.786,P0.01).NOinserumwithsevereofacuteexacerbationasthmawasnegativelycorrelatedwithFEV1.0%(r=-0.872,P0.01)andthepercentageofsputummacrophages(r=-0.820,P0.01).Whileitwaspositivelycorrelatedwithtotalcountofsputumcells(r=0.857,P0.01),thepercentageofsputumneutrophils(r=0.816,P0.01)andthepercentageofsputumeosinophiles(r=0.825,P0.01).Conclusion:ThelevelofNOinserumwithacuteexacerbationasthmaisincreasesignificantly.Endogenousnitricoxidemaybeinvolvedinthepathogenesisofairwayobstructioninasthmaandmaybeanoninvasivemarkerofdiseaseactivityandseverity.【Keywords】Nitricoxide;Asthma;Induced-sputumFirst-author'saddress:TheSecondPepole’sHospitalofNanhaiDistrict,Foshan528251,Chinadoi:10.3969/j.issn.1674-4985.2012.09.003器官和细胞功能是在无数信号分子,包括脂质、肽、有机和无机分子、代谢中间物等作用下实现的,气体信号分子作为其中的成员对器官和细胞功能的维持起重要作用。一氧化氮(nitricoxide,NO)既是一种信号分子,又是一种细胞毒性分子,调节体内一系列生理病理过程,包括血管舒张、抑制血小板在内皮细胞表面粘附与血小板凝集、神经传递、宿主防御和细胞毒作用等,并在一定条件下参[1]究发现,在哮喘患者气道上皮细胞中NO的表达增加,其作为一种效应分子,能参与炎症与组织损伤修复,过量的NO能扩张血管,促进炎症细胞渗出及炎症介质释放,被认*基金项目:佛山市科技攻关项目(200908121).①广东省佛山市南海区第二人民医院广东佛山528251②广东药学院药科学院通讯作者:陈嘉馨为是哮喘炎症反应的前介质,NO在哮喘的发病机制中起着非常重要的作用[2]。本实验观察不同时期哮喘患者和健康人之间血浆NO水平的差异及其相关性,从新的角度探讨哮喘的病因及防治。1资料与方法1.1一般资料70例哮喘患者,诊断标准、急性发作期分级及缓解期的判断符合2006年哮喘全球倡议(globalinitiativeforasthma,GNA)标准[3]:气道可逆试验阳性系指吸入支气管扩张剂第1秒用力呼气容积(forceexpirationvolumeinonesecond,FEV1.0)增加15%以上且其绝对值增加200ml以上;缓解期系指经过治疗,患者症状、体征消失,肺功能恢复到急性发作前水平。其中哮喘急性发作期40例,男性21例,女性19例,平均年龄(43.1±5.1)岁;临床缓解期30例,男性14例,女性16例,平均年龄(40.5±6.3)岁;健康对照组15例,男性8例,女性7例,平均年龄(30.5±4.6)岁,无呼吸道症状及心肺等疾患。性别情况各组的差异无统计学意义-6-MedicalInnovationofChinaVol.9,No.9Mar,2012测定试剂盒,采用硝酸还原酶特异性地将NO还原为NO,(n=30)6.8±2.9*《中国医学创新》第9卷第9期(总第219期)2012年3月论著Lunzhu(P0.05),年龄情况各组的差异有统计学意义(P0.01)。所有研究对象均为非吸烟者,均获知情同意并签署知情同意书。NO测定试剂盒(Bioting-Tech公司),亚乙烯二胺(sigma公司),32.526、19.827,P0.01),诱导痰淋巴细胞百分比在各组之间差异无统计学意义(F=0.461,P0.05)。见表1。表1各组诱导痰细胞总数及分类计数(x-±s)其余试剂为国产,分析纯。1.2方法1.2.1肺功能测定所有对象入选时采用肺活量计法测定组别诱导痰细胞总数(×105/ml)中性粒细巨噬细胞嗜酸性粒胞(%)(%)细胞(%)淋巴细胞(%)第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1.0%百分比)、FEV1.0/FVC及呼气峰流速(peakexpiratoryflow,PEF)。1.2.2血浆一氧化氮水平测定血浆NO含量的间接测定,硝酸还原酶测定法。因NO化学性质活泼,半衰期极短,迅正常对照组(n=15)3.9±1.7哮喘缓解期22.0±1.663.2±2.10.12±0.1211.2±1.428.8±5.7*45.5±6.3*8.9±3.6*13.3±5.3速与分子氧反应生成NO2-和NO3-,故以血浆NO2-和NO3-之和检测NO的相对含量,应用Bioting-Tech公司提供的NO3-2-NO2-与显色剂亚乙烯二胺作用,生成粉红色偶氮化合物,通过比色测出NO2-/NO3-含量[4]。1.2.3诱导痰细胞计数分类参照文献[5]报道的方法进行:受试者测试肺功能FEV1.0FEV1.0pre的60%,可以进行痰液诱导,试验前受试者漱口后,吸入沙丁胺醇(万托林)400μg,15min后开始超声雾化吸入4%(质量分数)的高渗盐水40ml,20~40min后收集痰液,加入等量0.1%(质量分数)二硫苏糖醇(DTT)溶液,振荡至痰液完全均匀化开,取50μl痰液注入细胞池作细胞计数,其余痰液在常温下3500r/min离心10min,取上清液分装,-80℃保存待测。离心沉渣涂片行瑞氏-吉姆萨染色作细胞分类计数一氧化氮胶囊。1.3统计学处理采用SPSS10.0统计软件进行统计学分析,数据以(x-±s)表示,两组之间比较采用t检验,多组之间比较采用单因素方差分析(F检验),采用Pearson相关分析计算相关系数,以P0.05为差异有统计学意义。2结果预计值为(89.7±6.5),FEV1.0/FVC值为(81.7±8.5),PEF%预计值(95.7±13.5);哮喘缓解期组FEV1.0%预计值为(67.7±5.5),FEV1.0/FVC值为(65.7±3.5),PEF%预计值(69.8±19.5);轻度急性发作期组FEV1.0%预计值为(58.7±7.2),FEV1.0/FVC值为(59.6±7.5),PEF%预计值(57.6±18.5);中度急性发作期组FEV1.0%预计值为(50.7±4.9),FEV1.0/FVC值为(52.8±5.3),PEF%预计值(49.8±20.5);重度急性发作期组FEV1.0%预计值为(40.7±4.8),FEV1.0/FVC值为(48.8±7.8),PEF%预计值(40.3±21.6)。各组的FEV1.0%预计值、FEV1.0/FVC值及PEF%预计值比较差异均有统计学意义(F值分别为23.132、25.012、21.025,P0.01)。2.2血浆NO比较健康对照组的血浆NO水平为(43.28±4.06)μmol/L,哮喘临床缓解组为(56.30±3.07)μmol/L,急性发作期轻度组为(65.57±2.38)μmol/L,中度组为(71.73±6.08)μmol/L,重度组为(87.36±7.15)μmol/L,各组比较差异均有统计学意义(F=23.5,P0.101)。2.3诱导痰细胞计数分类诱导痰细胞总数、中性粒细胞百分比、巨噬细胞百分比及嗜酸性粒细胞百分比在各组之间的比较差异均有统计学意义(F值分别为8.753、21.856、MedicalInnovationofChinaVol.9,No.9Mar,2012轻度急性发作期组13.5±6.7*#37.8±2.8*#37.8±6.3*#10.3±2.7*13.8±2.9(n=10)中度急性发作期组16.9±3.6*#42.6±2.3*#3
本文标题:血浆一氧化氮水平与支气管哮喘的相关性研究
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