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1、《实验诊断学》实验报告实验一红细胞、白细胞计数一.实验原理一定量的血液经一定量等渗性稀释液稀释后,充入血细胞计数池中,于显微镜下计数一定体积内的红细胞数。用稀醋酸液将血液稀释并破坏红细胞,混匀后充入计数池中,于显微镜下计数一定体积内的白细胞数。根据稀释倍数和计数的容积,换算求得每升血液中的红细胞数量以及白细胞数量。二.实验内容与步骤实验材料:显微镜、微量吸管、毛细吸管、改良Neubauer计数板、盖玻片、小试管、RBC稀释液、WBC稀释液、正常人的全血、纱布实验步骤:1、红细胞计数准备:①加稀释液,用微量吸管吸取RBC稀释液蒸馏水2.0ml加到小试管内。②取血,毛细吸管取血10μl。③用纱布擦去管外的血,轻吹入试管底部,再清洗吸管2-3次,立即混匀。2、白细胞计数准备:WBC稀释液:冰醋酸3.0mL(破坏红细胞)蒸馏水97.0mL亚甲蓝(染色)①小试管加WBC稀释液0.38mL。②采血,微量吸管取血20μL。③擦去管外的血,轻吹入试管底部,再清洗吸管2-3次,立即混匀。3、充池、观察:①将计数板及盖玻片檫净,将盖玻片覆盖在计数板上。②用滴管吸取混均的红细胞悬液充入上方计数室,静置3-。
2、5min,高倍镜下计数;白细胞悬液充入下方计数室,静置2-3min,低倍镜下计数。③观察计数,红细胞,高倍镜下计数中央大方格内四角的4个中方格和正中的1个中方格的红细胞,压线细胞的计数按照数上不数下,数左不数右的原则。计数时按照弓形的计数方式,以免漏数或多数。④用低倍镜计数出计数池内四角大方格中的白细胞总数。三.实验结果1、红细胞计数实验结果:5个中方格内RBC的计数/个=24+27+32+22+25根据计算公式:RBC/L=5个中方格内RBC数×5×10×200×106=5个中方格内RBC数/100×1012推算得出RBC:1.3×1012/L正常人群的红细胞计数参考区间:人群红细胞计数(×1012/L)成年男性4.3~5.8成年女性3.8~5.1新生儿6.0~7.0结论:实验结果和参考区间比较得出,实验结果所得的红细胞计数偏低2,、白细胞计数实验结果:4个大方格内WBC数/个=11+7+9+7根据计算公式:WBC/L=4个大方格内WBC数/4×10×20×106=4个大方格内WBC数/20×109推算得出WBC:1.7×109/L正常人群的白细胞计数参考区间:人群白细胞计数(×10。
3、9/L)成年人3.9~9.5新生儿15.0~20.06个月至2岁11.0~12.0结论:比较得出白细胞计数偏低四.讨论注意事项:1.吸管、试管要注意清洁、干燥以防溶血。2.取血量须准确,动作要迅速,防止血液凝固。3.血液加入稀释液后,应立即混匀。充液前,红、白细胞复液要充分摇匀,细胞悬液注入计数池内要求分布均匀,不可有多余液体外溢,亦不可有气泡。4.压线细胞应数上不数下,数左不数右。讨论:1.取量不准:取血量少于实验标准血量、所取稀释液量超过实验添加的量,导致悬液浓度降低2.计数偏差过大:计数时漏数3.细胞破坏较多:混均时用力不当,导致细胞损伤较多4.中方格内红细胞分布应均匀,健康成人每中方格红细胞数约为80—100个,各中方格内之红细胞相近,如悬殊过大(超过10个细胞以上的)应重混匀再充填。。
本文标题:红白细胞计数实验报告
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