细胞工程-试题模板

一、填空题：（每空1分，共20分）1、Watson和Crick揭示了DNA分子的双螺旋结构和半保留复制机制。2、胚泡于受精后第4-5天形成，具备内细胞群、胚泡腔、滋养层等结构。3、细胞死亡的形式有细胞坏死和细胞凋亡。4、植物胚胎培养是指对植物的胚、子房、胚珠和胚乳进行离体培养，使其发育成完整植物的技术。5、人工种子结构上从外向里包括三部分：（1）人工种皮外层（2）人工胚乳（3）胚状体或芽。6、植株脱毒的的生物方法有，茎尖培养脱毒、愈伤组织培养脱毒、茎尖徽体嫁接脱毒、珠心胚培养脱毒和花药培养脱毒。7、植物细胞同步化常用方法（1）体积选择法，（2）冷处理法，（3）饥饿法，（4）抑制法（用尿苷、5-氟脱氧尿苷或秋水仙素抑制细胞分裂）。8、悬浮植物细胞的生长曲线大致经历延迟期（适应期）、对数生长期、直线生长期、减缓期、平台期和衰亡期。9、原生质体纯化的方法有过滤-离心法，漂浮法。（或离心沉淀法、漂浮法、界面法中其二）10、植物转基因的受体可以是叶盘、原生质体、悬浮细胞、愈伤组织、胚状体、胚轴、茎尖、茎段等。（或植物组织、原生质体、生殖细胞、叶绿体）11、将外源基因转入植物的方法有(1)化学刺激法、电击法、显微注射法、基因枪法、脂质体介导法、微激光束法、花粉通道法和农杆菌介导法。12、转基因植物鉴定的方法包括选择性培养检测和报告基因检测和分子生物学检测方法。13、动物细胞小规模培养的方法有：14、动物细胞体外培养一般经过：组织获得与消化、接种、原代培养、传代培养几个环节。15、动物细胞小规模培养的方法有：悬滴培养、小室培养、培养板培养、转管培养、转瓶培养等。16、干细胞按照分化潜能大小分类可以分为：全能干细胞（如受精卵），多能干细胞（骨髓造血干细胞），专能干细胞（肌肉中的成肌细胞）。17、细胞融合的方法有化学法，如PEG诱导融合，物理法，如电脉冲，生物法，如仙台病毒诱导细胞融合法。二、判断题：（每题1分，共10分，正确请用√表示，错误请用×表示）1、真核染色体具备端粒，所以真核细胞的分裂不是无限的。（×）2、蝌蚪尾巴慢慢消失是由于多种致病因子、物理、化学、和生物因子的作用，而产生的急性损伤致死，亦称病理性死亡。（×）3、细胞凋亡的生理和病理学意义可以清除衰老细胞、DNA损伤的细胞、和被病原体感染的细胞。（√）4、细胞分化具备稳定性，所以已经分化的细胞不能逆转回复到胚性状态。只有胚性细胞才具备分化能力。（×）5、胚乳培养的后代，常发生细胞染色体数目变化，形成多倍体、非整倍体等。（√）6、植物组织培养中，常会出现一些半透明状的畸形试管植物，被称为“玻璃苗”其是组培中变异植株的主要来源。（×）7、检测原生质体常用到双醋酸盐荧光素(FDA)染色法，在荧光显微镜下有荧光的即为有活性的原生质体。（√）8、检测原生质体常用到0.1%酚番红或Evans蓝染色，有活力的被染上色，死亡的不被染色。（×）9、原生质体杂交可实现远缘杂交，获得种间杂种，克服有性杂交配子不亲合性。（√）10、原生质体融合，是使分离下来的两个的不同亲本的原生质体，在人工控制条件下，相互融合成一体，目前存在的问题是多个细胞不能融合。（×）11、植物的体细胞具有全能性，即单个细胞经过合适的培养，通过愈伤组织器官分化或体细胞胚胎分化途径再生出完整的植株。（√）12、植物基因转化的Ti质粒衍生的一元载体系统和双元载体系统分别需要一个质粒和两个质粒。（√）13、植物基因转化的Ti质粒衍生的一元载体系统的上具备T-DNA但是没有vir区基因。（×）14、转基因植物利用GUS酶活性检测，如果有发色或荧光，就说明外源基因转入植物。（√）15、PCR技术检测转基因植物方法快捷、灵敏，但是存在假阳性问题，所以不能确认是不是有外源基因。（√）16、动物和植物细胞都存在接触抑制、密度抑制和贴附等特点。（×）17、动物细胞的培养需要氧气，二氧化碳是呼吸的产物，要尽可能降低培养箱中的浓度。（×）18、动物细胞主要靠范德华力贴附在固体表面，贴壁培养的固体表面要求具有高表面活性和不带电荷。（×）19、胰蛋白酶溶液可以水解细胞间的蛋白质，分散单个细胞，加血清终止其反应。（√）20、一种抗原在动物体内免疫产生单克隆抗体，因此从免疫动物血清中分离的抗体是单克隆抗体。（×）21、一种抗原具备多个抗原决定簇，因此在动物体内免疫产生多种抗体，因此从免疫动物血清中分离的抗体是多克隆抗体。（√）22、在体外，动物精子和卵细胞相遇既可以进行受精，形成受精卵。（×）23、多倍体动物高度不育，染色体异常通常会造成胚胎死亡，因此很难得到多倍体的子代个体。（√）24、干细胞分裂后只能形成一个干细胞和一个祖细胞。（×）25、干细胞对称分裂后形成两个干细胞，不对称分裂形成一个干细胞和一个祖细胞。（√）26、成体干细胞的培养不用考虑伦理道德问题，所以应用前景较好。（√）27、成体干细胞相对胚胎干细胞更容易获得，而且不存在伦理问题，数量众多。（×）三、不定向选择题：（每题1分，多选和少选均不得分，共1０分）1、发现鸡的神经细胞在生理盐水中可以存活，并使用了“组织培养”一词科学家是？（A）A、RouxB、HarrisonC、WentD、Kotte2、发现胡萝卜的体细胞可以分化成体细胞胚，验证了细胞全能性学说的科学家是？（A）A、StewardandReinertB、StewardandHarrisonC、HarrisonandReinertD、RouxandReinert3、组成细胞的大量元素占到90%以上的是（A）A、C、H、O、NB、H、O、N、PC、K、Cl、Ca、MgD、C、S、O、N4、细胞内含量最多的化合物是？（D）A、蛋白质B、脂肪C、无机盐D、水5、真核细胞内起遗传功能的细胞器是？（ＡＣＤ）A、细胞核B、内质网C、质体D、线粒体６、正常人细胞内有46条染色体，每条染色体的DNA双螺旋若伸展开，核内全部DNA连结起来长度为？（A）A、1.7~2.0mB、1~5cmC、0.5~1mD、0.5~1mm7、植物细胞有而动物细胞没有的结构是(D)A、细胞质B、线粒体C、内质网D、叶绿体8、拥有接触抑制的是(B)A、原核细胞B、动物细胞C、植物细胞D、真核细胞9、人的卵母细胞发育在五个月胎儿以后进入停滞期，而一直到排卵都停在那个时期？（B）A、细线期B、双线期C、偶线期D、S期10、常用的植物激素有(ABC)A生长素B细胞分裂素C赤霉素D维生素11、细胞分化具备以下特点？（ABCD）A、稳定性B、普遍性C、可逆性D、时间性和空间性12、受精卵最初卵裂形成的桑葚胚是实心球，而后形成的是囊胚的细胞数量是？（A）A、100多个B、2个C、8个D、64个13、植物组织培养的培养基所需要的元素浓度大于0.5mmol/L为大量元素，主要有（A）A、N，P，K，Ca，Mg和SB、N，P，Mn，Cu，Zn和SC、N，P，Cu，Zn，Mg和OD、O，P，K，Ca，Mg和Fe14、精子的细胞核出于什么位置(A)A、头部B、尾部C、鞭毛上D、不定15、下列细胞不具全能性的是(D)A、胡罗卜根尖细胞B、羊胚胎细胞C、杉树叶尖细胞D、牛肠壁上皮细胞16、分离原生质体常用的酶包括以下哪些？（ABC）A、果胶酶B、崩溃酶C、纤维素酶D、蛋白酶17、原生质体融合的方法有以下几种？（ABCD）A、PEG融合B、电融合C、NaNO3诱导D、高pH的高浓度的Ca2+18、动物血清在动物细胞培养中的功能有？（ABCD）A、提供氨基酸、维生素等物质。B、提供激素和各种生长因子等C、提供结合蛋白D、对细胞起到某些保护作用19、动物细胞培养时生长条件的控制主要有以下：（ABD）A、37℃左右B、pH为7.1-7.3C、高渗溶液D、O2和CO2等气体20、世界上第一种克隆成功的生物是？(C)A、牛B、人C、羊D、鸡21、组织工程的基本要素是(ACD)A、种子细胞B、实施人员C、支架材料D、生长因子22、下列不是单倍体产生途径的是(B)A、假受精B、胚胎嵌合C、雄核发育D、雌核发育四、名词解释：（每题3分，共18分）1、细胞工程（cellengineering）指应用细胞生物学和分子生物学的方法，通过某种工程学手段，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合技术科学。2、细胞全能性：是指细胞在一定条件下所表现出分化为各种类型细胞的潜能或重新发育成完整个体的能力。3、体细胞胚：又叫胚状体，是指离体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物。4、人工种子：又称合成种子或体细胞种子，是指将植物离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒。5、看护培养法：从悬浮培养物或脆弱愈伤组织上用针或玻璃毛细管分离单细胞，每个细胞放在一个方形滤纸片的上表面，而滤纸片放在活跃生长的愈伤组织上进行培养的方法。6、细胞同步化：同一悬浮培养体系的所有细胞都同时通过细胞周期的某一特定时期。7、原生质体(Protoplast)通过一定方法除去细胞壁，而得到一个裸露的球形细胞。8、细胞融合是指使用人工方法使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的技术。9、体细胞杂交是指将不同来源的体细胞融合并使之分化再生、形成新品种的技术。10、染色体工程是指人们按预先的设计，消减、添加或替换同种或异种染色体，从而达到定向改变遗传特性和选育新品种的一种技术。11、转基因植物：将外源基因转入到植物的细胞或组织中获得的具有新的遗传性状的植物。（是指利用基因工程(DNA重组技术)技术，在离体条件下对不同生物的DNA进行加工，并按照人们的意愿和适当的载体重新组合，再将重组DNA转入生物体或细胞内，并使其在生物体内或细胞中表达的植物。）12、干细胞:是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。13、传代培养方法原代培养的细胞继续转接培养的过程。14、杂交瘤技术将骨髓瘤细胞与免疫的动物脾细胞融合得到即能够分泌抗体又能在体外长期繁殖的杂交瘤细胞，经过克隆化培养得到可以分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞。15、单克隆抗体经过免疫的哺乳动物的单一的B淋巴细胞分泌的、具备特异性和同质性的抗体。16、转基因动物（transgenicanimal）是指在基因组内稳定地整合外源基因，并且外源基因可以稳定地遗传给后代的基因工程动物。17、种子细胞(Seedcell)：是组织修复或再生的细胞材料。五、问答题：（共42分）1、根据干细胞的特性畅想一下其应用前景。参考答案：（1）细胞替代如治疗角膜病、糖尿病、帕金森病等实例。（2）组织替代如治疗如皮肤、软组织、骨骼等组织病变等。（3）器官替代如无排斥反应的器官移植。2、在一株古细菌中发现了一个同时具有抑制细菌和真菌生长的蛋白质，而且是单基因控制。试根据自己掌握的知识，设计合情合理的实验步骤构建转基因水稻。参考答案：本题涉及到植物的转基因，包括目的基因的获得、载体的制备、外缘DNA和载体的消化酶切、连接反应、基因的转入、重组体的筛选等方面。设计方案合理的加分，方案原则错误的减分。3、简述克隆羊多利的基本过程。为什么多利的寿命短于同品种的羊？参考答案：答：（1）取妊娠期的6岁母绵羊（FinnDorset白品种母羊）的乳腺细胞作核供体细胞，用饥饿法使其进入休眠状态而使全部基因具有活性。（2）注射促性腺激素，促使母羊（SottishBlackface黑面母绵羊）排卵，28~33小时取其未受精卵，快速去核，放入10%FCS、1%FCS和0.5%FCS连续5天，使其进入G0期做受体细胞。（3）乳腺细胞与无核卵放入同一培养皿中，在微电流的作用下，将乳腺细胞融入卵中，形成一个含有新的遗传物质的卵细胞。（4）新的卵细胞植入羊的结扎的输卵管内，6天后发育为桑椹胚或囊胚（8~16个细胞）。（5）将此早期胚胎移入假孕母羊子宫中，产下多利即为6岁母羊的复制品，也为白色。寿命短于同品种的羊的原因在于：染色体末端端粒比同龄的普通绵羊短。端粒是决定细胞老化的主要因素，端粒越短的细胞越接近死亡。4、简述试管婴儿培育流程。参考答案：（1）精子采集与体外获能、卵子采集