细胞生物学及其实验试题

1简答题：1.张建同学再观察变形虫临时装片时，发现视野中有一较大的变形虫，但在图像上有一小片污物，影响对变形虫的观察。（1）在不调换目镜和物镜的情况下，他应如何半段污物在何处？写出操作步骤（2）如果确认污物在装片内部，在既不允许重新制作装片又不能掰开盖玻片的情况下，如何清除污物或使污物与变形虫分开？答：（1）首先先转动目镜，若污物跟随者目镜转动，说明污物在目镜上；若转动物镜，在视野里看不到污物表明污物在物镜上；移动装片，若视野里的污物有移动表明污物在装片上面。（2）在临时装片的盖玻片的一端滴加几滴清水，在另一端用吸水纸将水吸出，同时也可将装片内的污物一块吸出。2.比较放大率与分辨率的含义答：二者都是衡量显微镜性能的指标。通常放大率是指显微镜所成像的大小与样本实际大小的比率；而分辨率是指分辨或区分出被检物体细微结构的最小间隔，即两个点间的最小距离。放大率对分辨率有影响，但分辨率不仅仅取决于放大率。3.为什么电子显微镜不能完全替代光学显微镜？答：电子显微镜用电子束代替了光束，大大提高了分辨率，电子显微镜相对光学显微镜是个飞跃。但是电子显微镜样品的制备更加复杂，镜筒需要真空，成本更高，只能观察“死的样品”，不能观察活细胞。光学显微镜技术性能要求不高，使用容易，可以观察活细胞，观察视野范围广，可在组织内观察细胞间的联系，而且一些新发展起来的额光学显微镜能够观察特殊的细胞或细胞结构组分。因此，电子显微镜不恩呢该完全代替光学显微镜。4.在做《用高倍镜观察线粒体、叶绿体以及细胞质流动实验》时，请回答：（1）为什么不用植物细胞来观察线粒体？（2）如果发现线粒体染色不足，该如何补色？（3）观察细胞质流动实验的首选材料有哪些？（4）为什么要用叶绿体的运动作为标记，观察细胞质流动？（5）在做观察细胞质流动实验时，如果发现细胞质不流动，或者流动很慢，应立即采取什么措施加速其细胞质流动？答：（1）植物线粒体相对较少，叶绿体颜色易掩盖线粒体被染成的蓝绿色（2）在盖玻片一侧滴加健那绿染液，另一侧用吸水纸将染液吸至盖玻片中，吸出盖玻片（3）黑藻、藓类、植物花丝的雄蕊（4）因为植物细胞的细胞质中叶绿体较多，呈绿色、扁平的椭球形或球形，较为明显，以叶绿体的运动作为标记，容易观察细胞质的流动，如果没有标志物，细胞质的流动难以观察（5）方法有三种：一是进行光照，即在阳光或灯光下放置15~20min；二是提高放置黑藻的水温，课加入热水将水温调至25℃左右；三是切伤一小部分叶片5.显微镜视野中的污染物，如何半段其实在目镜、物镜还是在玻片上？若污染物在物镜上，该怎么办答：移动载物台，动则在玻片上，转动目镜镜头，动则在目镜上，否则在物镜上若镜头被污染，可用牙签滚卷擦镜纸沾少量乙醚乙醇液（乙醚：无水乙醇=1:1）擦拭镜头上的灰尘、油脂、染料、粘合剂等混合污垢。为保护镜头本质，尽量不适用强有机溶剂（如二甲苯等）26.荧光显微镜和普通显微镜有什么主要区别？答：（1）照明方式通常为落散式，即光源通过物镜透射于样品上（2）光源为紫外光，波长较短，分辨力高于普通显微镜（3）有两个特殊的滤光片，光源前的用以滤除可见光，目镜和物镜之间的用于滤除紫外线，用以保护人眼其计算公式是σ=λ/NA式中σ为最小分辨距离；λ为光线的波长；NA为物镜的数值孔径。可见物镜的分辨率是由物镜的NA值与照明光源的波长两个因素决定。NA值越大，照明光线波长越短，则σ值越小，分辨率就越高。要提高分辨率，即减小σ值，可采取以下措施:（1）降低波长λ值，使用短波长光源。（2）增大介质n值以提高NA值（NA=nsinu/2）。（3）增大孔径角u值以提高NA值。（4）增加明暗反差。7.比较Giemsa染色和JanasGreenB染色（注意染色操作和结果的区别）答：（1）Giemsa染色前，细胞须固定（染死细胞），主要染的是核、细胞质（2）JanasGreenB染色染的是活细胞（染色前不用固定），主要染的是线粒体综合题（论述题）1.简述Feulgen反应的原理及做好本实验的关键答：（1）DNA经酸水解，其上的嘌呤碱和脱氧核糖之间的键打开，使脱氧核糖的一端形成游离的醛基，这些醛基在原位与Schiff试剂（无色品红亚硫酸溶液）反应，使细胞内含有DNA的部分呈紫红色阳性反应，从而显示出DNA的分布紫红色的产生，是由于反应产物的分子内含有醌基，醌基是一个发色团，所以具有颜色，该反应对DNA具有专一性（2）Feulgen反应成功的关键在于Schiff试剂的质量。Schiff试剂只能选用注明“DNA染色反应用”的碱性品红才行2.简述线粒体詹纳斯绿B活体染色原理答：线粒体是细胞内一种重要的细胞器，是细胞进行呼吸作用的场所。细胞的各项活动所需要的能量，主要是通过线粒体呼吸作用来提供的。活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法詹纳斯绿B是线粒体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态3.怎样根据细胞膜渗透性实验结果分析确定物质进入细胞的速度？物质进入细胞的快慢有什么规律？答：（1）测量溶血时间（2）主要取决于分子的大小和极性；细胞膜屏蔽：盐、无机离子、极性大分子；允许进入：脂溶性、水、非极性、有机小分子、NH4+小分子比大分子容易穿膜，非极性分子比极性分子易穿膜，而带电荷的离子跨膜运动则通常需要转运蛋白的协助34.土豆凝集素的实质是什么？简述其在土豆细胞中的合成和分泌的可能途径；它是如何使鸡血细胞发生凝集的？简述细胞凝集反应的原理答：土豆凝集素实质是一种糖蛋白；由内质网合成、糖基化，高尔基体进一步加工、分选，以分泌泡形式与膜融合；它能与鸡红细胞膜表面的糖链专一性结合细胞凝集反应的原理：凝集素使一类含糖的并能与糖专一性结合的蛋白质，它具有凝集细胞的作用凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集5.何为蛋白质分选？细胞内蛋白质分选的基本途径、分选类型是怎样的？答：蛋白质分选：大多数蛋白质均在细胞质基质中的核糖体上开始合成，随后或在基质中转至糙面内质网上继续合成，然后通过途径转运到细胞的特定部位并装配成结构与功能的复合体，参与细胞的生命活动的过程。基本途径有两条：一条是在细胞质基质中完成多肽链的合成，然后转运至膜围绕的细胞器，如线粒体、叶绿体、细胞核及胞质的特定部位；另一条是蛋白质合成起始后转移至糙面内质网，新生肽边合成边转入糙面内质网腔中，随后经高尔基体转运至溶酶体、细胞膜或分泌到细胞外蛋白质分选的四中基本类型：（1）蛋白质的跨膜转运：主要指在胞质合成的蛋白质转运至内质网、线粒体、叶绿体和过氧化物酶体等细胞器（2）膜泡运输：蛋白质通过不同类型的转运小泡从其糙面内质网合成部位转运至高尔基体进而分选至细胞不同的部位（3）选择性门控转运：指在胞质中合成的蛋白质通过核孔复合体选择性地完成核输入或从细胞核返回细胞质。（4）细胞质基质中的蛋白质的转运。6.细胞周期有哪些检验点？细胞周期检验点的生理作用是什么？（1）G1/S检验点：在酵母中称start点，在哺乳动物中称R点，检验DNA是否损伤、细胞外环境是否适宜、细胞体积是否足够大。（2）S期检验点：检验DNA复制是否完成。（3）G2/M检验点：检验DNA是否损伤、细胞体积是否足够大。（4）中-后期检验点：纺锤体组装检验点7.是比较细胞凋亡与细胞坏死的区别细胞凋亡细胞坏死诱因生理条件下剧烈刺激下细胞形态细胞缩小细胞膨大细胞膜起泡而形成凋亡小体，磷脂酰丝氨酸外翻，膜结构完整膜结构遭到破坏细胞质细胞质成分密度增高，发生凝集，最初细胞器保持完整性细胞器被破坏，溶酶体膜破坏，水解酶破坏胞内成分细胞核DNA片段化，电泳呈梯状条带弥散性降解，DNA被切碎，电泳呈均一DNA片状钙离子浓度增高没变化核酸内切酶活化没变化是否基因控制是否是否发生炎症不发生炎症发生炎症48.试比较有丝分裂和减数分裂的异同点区别有丝分裂减数分裂形成的细胞类型体细胞的增殖方式有性生殖的个体形成生殖细胞的分裂方式DNA复制DNA复制1次，细胞分裂1次，细胞核DNA的合成发生在S期DNA复制1次，细胞连续分裂2次，细胞核DNA的合成发生在减数分裂前间期S期（99.7%~99.9%）、偶线期和粗线期染色体数目分裂期后，染色体的数目恒定分裂后，染色体数目减半分裂过程有丝分裂间期和有丝分裂期减数分裂前间期、减数分裂期Ⅰ（其前期又分为细线期、偶线期、粗线期、双线期终变期）、减数分裂间期、减数分裂期Ⅱ联会复合体无有同源染色体非姐妹染色单体互换无有（果蝇等例外）生物学意义使细胞数目增多，多细胞生物体的体积得以增大确保世代间遗传的稳定性；增加变异机会，确保生物的多样性，增强生物适应环境变化的能力；减数分裂是生物有性生殖的基础，是生物遗传、生物进化和生物多样性的重要基础保证9.简述从DNA到染色体的包装过程从DNA到染色体经过四级包装过程：一级结构：核小体；二级结构：螺线管；三级结构：超螺线管；四级结构：染色单体DNA（5cm）→压缩7倍→核小体→压缩6倍→螺线管→压缩40倍→超螺线管→压缩5倍→染色单体（2-10um）通过四级螺旋包装形成的染色体结构，共压缩了8400倍5名词解释：1.显微镜的分辨能力：是指显微镜能够辨别两点之间最小距离的能力2.克隆：亦称无性繁殖系或简称无性系。对细胞来说，克隆是指由同一个祖先细胞通过有丝分裂产生的遗传性状一致的细胞群3.血影：红细胞经低渗处理后，质膜破裂，释放出血红蛋白和其他胞内可溶性蛋白后剩下的结构，是研究质膜的结构及其膜骨架的关系的理想材料4.细胞融合：通过培养和诱导，两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合或细胞杂交5.PCR技术：聚合酶链式反应（polymerasechainreaction，PCR）用于在体外将微量的目标DNA大量扩增，以便进行分析6.凝集素：是一类含糖的并能与糖专一性结合的蛋白质，它具有凝集细胞分裂的作用。凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝聚7.活体染色：活体染色是应用五毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法8.细胞化学染色：是利用染色剂可同细胞的某种成分发生反应而着色的原理，对某种成分进行定性或定位研究的技术9.Schiff反应：细胞中的醛基可使Schiff试剂中的无色品红变为红色，这种反应通常用于显示糖和脱氧核糖核酸10.电镜负染技术：用重金属（如磷钨酸、醋酸双氧铀）对铺展在载网上的样品进行染色，吸去染料，样品干燥后，样品凹陷处铺了一薄层重金属盐，而凸出的地方则没有染料沉积，从而出现负染效果，分辨力可达1.5nm左右11.差速离心：利用不同物质沉降速率的差异，在不同离心速度下分离和手机不同颗粒的离心技术。常用于分离细胞匀浆中的各种细胞器、12.载体蛋白：生物膜中运载离子或分子穿膜的蛋白质13.分子伴侣：一种与其他多肽或蛋白质结合的蛋白质，以防止蛋白质错误折叠、变性或聚集沉淀，对蛋白质的正确折叠、组装以及跨膜转运有意义14.光合磷酸化：光合磷酸化是植物叶绿体的类囊体膜或光合细菌的载色体在光下催化腺二磷（ADP）与磷酸（Pi）形成腺三磷（ATP）的反应15.氧化磷酸化：底物在氧化过程中产生高能电子，通过线粒体内膜电子传递链，将高能电子的能量释放出来转换成质子动力势进而合成ATP的过程16.踏车现象：在一定条件下，细胞骨架在装配过程中，一端发生装配使微管或微丝延长，而另一端则使微管或微丝缩短，实际上是正极的装配速度快于负极装配速度微丝或微管在一定条件下，其正端有亚基不断地添加的同时，负端有亚基不断地脱落，使一纤维在一端延长而另一端缩短的交替现象。17.电压门通道：细胞膜电位发生变化时，通道蛋白构象随之变化，从而使离子通道开启或关闭。18.“Hayflick”界限：正常的体外培养的细胞寿命不是无限的，而只能进行有限次数（约50次）的增殖19.细胞周期检验点：是