经穴部位的Ca是针刺效应产生的因素之一

应该说，针刺效应的产生是多种因素共同作用的结果。影响针灸治疗效果的因素很多，如取穴、手法、施术时间、患者体质等。揭示针刺治疗原理，对提高临床疗效具有重要的意义。多年来，我们对钙离子在针刺疗效中的作用进行了研究，现将结果报告如下。一.几种针刺效应动物模型的建立经脉经脉•脏腑病变的调节1、研究依据、研究思路穴位针刺效应经脉者，所以决死生、处百病、调虚实《灵枢•经脉篇》夫十二经脉者、内属于腑脏、外络于肢节《灵枢•海论篇》2、动物模型的复制方法（1）乌头碱引起心律失常模型动物：家兔方法：20ug/kg、0.002%乌头碱溶液耳缘静脉注射指标：观察心电图心律失常恢复时间穴位：内关手法：平补平泻5分钟（2）电刺激下丘脑引起的心律失常模型动物：家兔方法：用脑立体定位器固定家兔头部，打孔、参照Sawyer图将金属电极插在下丘脑，给于20-30V、60Hz的电刺激指标：观察心电图一定时间内早搏收缩出现的次数穴位：内关手法：平补平泻5分钟（3）实验性心肌梗塞模型动物：大鼠方法：乙醚麻醉后将大鼠固定，胸部备皮、消毒，切开左胸部皮肤，从第四或第五肋间分离肌层，打开胸腔、轻轻地压迫胸廓，挤出心脏。从左心耳和动脉圆锥之间的冠状静脉部位结扎冠状动脉后，将心脏压回胸腔，迅速缝合胸壁。指标：缺血部的体积（用计算机分析）血清酶:AST、CDH、α-HBOH、CK活性穴位：内关手法：平补平泻（4）正常胃运动模型动物：家兔方法：麻醉后切开家兔的腹腔，取出胃，将自制的传感器缝合于幽门部的浆膜层处，将腹腔缝合，将导线从颈部引出指标：用计算机处理胃运动的振幅和频率穴位：足三里手法：平补平泻（5）实验性胃运动亢进及抑制模型动物：家兔方法：和（4）的手术方式相同，肌肉注射新斯的明造成胃运动亢进，肌肉注射654-2（Anisodamine)，造成胃运动抑制，摸索引起胃运动亢进或抑制的药物的剂量指标：用计算机处理计算胃运动的振幅和频率穴位：足三里手法：平补平泻（6）实验性胃胀痛模型动物：大鼠方法：用三叉管的一端连接能扩张的小球囊、一端连接水银检压计、一端连接注射器，乙醚麻醉下，将小球囊从口腔缓慢插入胃内，然后，用注射器将空气注入小球囊使其扩张，造成胃胀痛。指标：大鼠出现胃胀的症状（四肢或头部的扭动等），用血压计测定压力穴位：足三里手法：平补平泻（7）实验性胃损伤小鼠胃排空模型动物：小鼠方法：稀盐酸（0.3mol/l、1ml)灌胃造成胃损伤。将20个直径为0.5mm的黑色树脂球和10%可溶性淀粉糊一同注入胃中穴位：足三里手法：平补平泻指标：胃排出率=肠排出的树脂球数目灌入总数×100%综上所述经脉心：手厥阴心包经（内关）胃：足阳明胃经（足三里）动物大鼠、小鼠、大耳白家兔穴位针刺时间根据模型不同，一般3-5分钟、留针二、穴位Ca2+浓度变化以及阻断Ca2+活动环节对针刺效应的影响1、络合穴位处Ca2+对针刺效应的影响内关、足三里心、胃病变针刺有效络合穴位处Ca2+对针刺效应的影响（络合：使用EDTA溶液与Ca2+结合，使Ca2+失活）内关、足三里心、胃病变注射EDTA针刺无效EDTA络合Ca2+的浓度：10-2M、2.5×10-3M、5×10-4M、10-4MEDTA络合Ca2+的剂量:家兔20ul、大鼠、小鼠5ul结果：10-2M、2.5×10-3M、10-3M的EDTA可以使针刺效果丧失。但是5×10-4M、10-4MEDTA穴位注射，针刺效果仍然存在。证明10-3M的EDTA是使针刺效果丧失最低浓度。注射EDTA对照液内关、足三里心、胃病变针刺有效EDTA对照液，在体外已结合上Ca2+的EDTA溶液VOCs阻断剂心胃的病变无效经脉内关足三里针刺2、阻断穴位细胞细胞膜上VOCs对针刺效应的影响VOCs阻断剂的种类和浓度：10-3MMn(NO3)220ul2×10-3M二异搏定20ul5×10-4M心痛定20ul给药方法：1、微量注射器穴位注射2、微量蠕动泵穴位连续灌流VOCs阻断剂对照液心胃的病变有效经脉内关足三里针刺注：VOCs阻断剂对照液NaNO3溶液，剂量与VOCs阻断剂相同3、阻断CaM活性对针刺效应的影响三氟啦嗪胃抑制模型无效经脉足三里三氟啦嗪剂量：10ul浓度：60um针刺生理食盐水注射胃抑制模型有效经脉足三里针刺CaCl2溶液穴位注射心胃病变有效经脉内关足三里针刺4、升高穴位Ca2+浓度对针刺效能的影响CaCl2溶液的浓度：10-1M、10-2M、5×10-3M、10-3M升高穴位处的Ca2+后针刺效能继续存在，与单纯针刺相比无显著的统计学差异，原因有待进一步研究。上海蔡震亨听了我们的报告后，以油性Ca2+穴位注射治疗哮喘，取得了较好的疗效。三、经脉线上Ca2+浓度变化及阻断Ca2+活动环节对针刺效应的影响心胃病变无效经脉内关足三里针刺1、降低经脉上几处Ca2+浓度对针刺效应的影响表示EDTA注射的部位。经脉线上的某个穴位或经脉线上非穴位处，每次实验仅在一处注射，EDTA的剂量、浓度与上述相同。研究表明使针刺效能消失的最小浓度为10–3M心胃病变有效经脉内关足三里针刺（2）表示EDTA对照液注射部位，体外EDTA络合钙溶液，其浓度、剂量与上述相同。心胃病变有效经脉内关足三里针刺（3）表示EDTA注射的部位，经脉线两旁。注射剂量与注射方法与上述实验相同，部位对照实验。心胃病变无效经脉内关足三里针刺2、阻断经脉线上几处细胞细胞膜上VOCs对针刺效果的影响表示阻断部位。阻断剂种类、剂量、浓度、给药方法同前，阻断部位：经脉线上的穴位或在经、非穴处。每次实验阻断一处。心胃病变有效经脉内关足三里针刺（2）表示阻断剂对照液注射部位。药物种类、剂量、浓度同二2（2）。药物对照实验。心胃病变有效经脉内关足三里针刺（3）表示经脉线两旁阻断部位。药物种类、剂量、浓度同三2（1）。部位对照实验。胃抑制模型无效足三里针刺表示三氟啦泰注射部位。浓度、剂量同二3（1）胃经3、经脉线上CaM活性阻断对针刺效果的影响胃抑制模型有效足三里针刺表示生理盐水注射部位。剂量10ul胃经（2）胃抑制模型有效足三里针刺（3）表示三氟啦泰注射部位。经络线两旁胃经心胃病变有效经脉内关足三里针刺升高Ca2+浓度的部位。药物剂量、浓度同二44、经脉线Ca2+浓度的上升对针刺效能的影响四、Ca2+络合针刺效能丧失现象的原理初探用电生理的方法记录正中神经干复合动作电位实验性心律异常有效内关电针1、内关足三里实验性心律异常无效EDTA注射内关电针2EDTA浓度：10-1M、10-3MEDTA剂量：20ul正中神经干复合动作电位与1存在统计学差异