综合实验七九-橄榄油中角鲨烯的分析鉴定

橄榄油中角鲨烯的分析鉴定一、实验目的1.了解橄榄油中角鲨烯的定性检测方法2.掌握样品前处理的方法及步骤二、实验原理角鲨烯是一种脂质不皂化物，最初是从鲨鱼的肝油中发现的,1914年被命名为Squalene,其化学名称为2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯,属开链三萜,又称鱼肝油萜。具有提高体内超氧化物歧化酶(SOD)活性、增强机体免疫能力、改善性功能、抗衰老、抗疲劳、抗肿瘤等多种生理功能,是一种无毒性的具有防病治病作用的海洋生物活性物质。角鲨烯在植物中分布很广，但含量不高，多低于植物油中不皂化物的5％，仅少数含量较多。如橄榄油。橄榄油是所有油类中唯一可不经提炼而直接以原始液态食用的油品，高质量的特级初榨橄榄油含有大量的角鲨烯物质。它增加了橄榄油自身的稳定性，延长了食用有效期和保持鲜美口味。橄榄油的色泽随榨油机压力的增加而加深：浅黄、黄绿、蓝绿、蓝至蓝黑色。色泽深的橄榄油酸值高，酸值大于3时，油味变浓并带有刺激性，不宜食用。深色橄榄油比重增大。如果浅色油的相对密度(15℃／15℃)大于0.918时，说明掺杂有其它油脂。橄榄油为高级食用油脂，售价较高，所以常有掺伪现象。为了鉴别，可用下列试验：冷冻试验、硝酸试验、测定油脂的克雷斯美尔值以及红外表征。而由于橄榄油中油脂成分复杂，本实验采用氢氧化钾-乙醇溶液皂化，石油醚萃取净化，红外光谱分析检测。三、实验部分3.1材料与仪器橄榄油、角鲨烯标准品、KOH、NaCl、无水硫酸钠、正己烷、乙醇；旋转蒸发仪、恒温水浴锅；红外光谱仪（岛津IRAffinity-1傅立叶变换红外光谱仪）。3.2实验步骤I.橄榄油样品前处理称取1.0g左右橄榄油样品，放入250mL磨口锥形瓶中，加入50mL的2.5moL/LKOH-乙醇溶液，置于85oC恒温水浴锅中皂化1h,移出冷却，转移至500mL分液漏斗中，加入50mL饱和NaCl溶液，再加入50mL石油醚，震摇萃取2min,静置，待分层后将上层有机相转入250mL分液漏斗中，下层皂化液再分别加入50mL、30mL石油醚，萃取两次，合并3次的石油醚层于250mL分液漏斗中，每次加入50mL去离子水洗有机相，洗至中性，有机相过无水硫酸钠脱水（1~2hr）后，于35oC水浴中旋转蒸发浓缩至近干，用正己烷溶解并定容至10mL，待测定。II.样品中角鲨烯的分析鉴定3.2.1冷冻试验无水橄榄油在2℃的条件下放置5.5小时仍澄清透明。如若在5.7℃的条件下放置24小时出现混浊，则橄榄油中一定有多量的掺杂油脂。3.2.2硝酸试验橄榄油与硝酸作用不呈显色反应。其它油脂与硝酸作用呈棕色。取2mL左右橄榄油样品放入比色管中,加入几滴硝酸进行观察。3.2.3测定油脂的克雷司美尔值纯净橄榄油的克雷司美尔值在68.5~71.6℃之间。否则其有掺杂。克雷司美尔值是在给定的条件下，取5mL橄榄油样品放入比色管中,加入5mL等量乙醇(92％)和戊醇混合溶剂，在水浴中（80℃左右）加热溶解，逐渐冷却至溶液发生混浊时的温度数值。3.2.4红外表征将测定的橄榄油样品IR图与标准谱图比较，并标出主要吸收带的归属，进行定性分析。四、思考题1.什么是皂化反应？试述在本实验中皂化反应的目的？2.分析所测橄榄油样品中红外谱结果，标出主要吸收带的归属。附件