第09章球菌.

球菌（coccus）第9章♦球菌（coccus）：指个体形状呈球形或椭圆形的一大类细菌。病原性球菌（pathogeniccoccus）：球菌中对人类有致病性的球菌。包括四个属的一些球菌：①葡萄球菌属：G＋球菌②链球菌属：G＋球菌③肠球菌属：G＋球菌④奈瑟菌属：G－球菌（脑膜炎、淋病奈瑟菌）化脓性球菌（pyogeniccoccus）：引起机体化脓性炎症的球菌。第一节葡萄球菌属（staphylococcus）一、金黄色葡萄球菌（S.aureus）二、凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）一、金黄色葡萄球菌（S.aureus）1.形态与染色球形，无鞭毛，无芽胞葡萄串状，革兰染色阳性（G＋）（一）生物学性状2.培养特性易培养：普通平板血平板产色素：金黄色白色柠檬色有些菌溶血，产生溶血环：致病性葡萄球菌菌落呈金黄色，于血琼脂平板上生长后，在菌落周围还可见完全透明溶血环（β溶血）。3.生化反应•多数菌分解葡萄糖、麦芽糖和蔗糖。•产酸不产气。•致病性球菌分解甘露醇。•触酶阳性（与链球菌区分标准）4.抗原构造(1)葡萄球菌A蛋白：细胞壁表面蛋白质，完全抗原。(2)荚膜多糖：有利于细菌粘附(3)多糖抗原：存在于细胞壁，有群特异性。SPAcapsuleteichoicacidpeptidoglycanSPA（staphylococcalproteinA）SPAIgGFcreceptorPHAGOCYTEBACTERIUM协同凝集试验（coagglutination）SPA功能体内作用：SPA与IgG结合后所形成的复合物具有抗吞噬、促细胞分裂、引起超敏反应、损伤血小板等多种生物活性。体外作用：用于多种微生物抗原检测。S.aureusAb金黄色葡萄球菌（S.aureus）表皮葡萄球菌（S.epidermidis）腐生葡萄球菌（S.saprophyticus）性状金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌菌落色素金黄色白色白色或柠檬色发酵甘露醇+--凝固酶+--α溶素+--耐热核酸酶+--致病性+--5.分类1)据色素、生化反应致病性葡萄球菌的鉴别三种葡萄球菌鉴别的主要性状主要性状金黄色葡萄球菌表皮/腐生性葡萄球菌色素金黄色白色/柠檬色血浆凝固酶＋（－）－甘露醇发酵＋－溶血性＋－耐热核酸酶活性＋－磷壁酸核糖醇型＋－磷壁酸甘油型－＋蛋白A（SPA）＋－致病性强无或弱2）根据有无凝固酶分型：凝固酶阴性菌和凝固酶阳性菌两大型。继而依据噬菌体分为4个噬菌体群和23个噬菌体型。III群引起葡萄球菌肠毒素食物中毒。3）根据核酸分析的遗传学分型：DNA脉冲电泳分型、PCR分型等方法。依16SrRNA不同，葡萄球菌属分48个种和亚种。6.抵抗力♥对外界因素的抵抗力强于其他无芽胞菌♥对碱性染料（龙胆紫）敏感♥易产生耐药性，特别对青霉素（MRSA）♥耐甲氧西林金黄色葡萄球菌葡萄球菌中金黄色葡萄球菌毒力最强，通过在宿主体内增殖、扩散和产生有害的胞外物质（酶和毒素）引起宿主疾病。葡萄球菌的毒力因子（致病物质）包括：①酶；②毒素；③细菌的一些表面结构蛋白。（二）致病性1.致病物质①酶凝固酶：血浆纤维蛋白原转为纤维蛋白，使血浆凝固耐热核酸酶：水解DNA纤维蛋白溶酶：水解纤维素（纤维蛋白溶酶、葡激酶）透明质酸酶：降解结缔组织（扩散因子）脂酶：分解脂肪触酶：分解H2O2②毒素葡萄球菌溶素毒性休克综合征毒素-1杀白细胞素肠毒素表皮剥脱毒素③表面结构或蛋白如粘附素、荚膜、胞壁肽聚糖和SPA等凝固酶（coagulase）概念：使含抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类游离凝固酶（freecoagulas）结合凝固酶（boundcoagulase）意义：鉴别有无致病性的重要指标致病机理：抵抗吞噬细胞的吞噬；保护病菌不受血清中杀菌物质的破坏；使感染局限化和形成血栓。—引起金黄色烫伤样皮肤综合征（staphylococcalscaldedskinsyndrome,SSSS）毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）—引起机体发热，增加对内毒素的敏感性；—引起多器官系统功能紊乱或毒性休克综合征（TSS）表皮剥脱毒素（exfoliativetoxin）肠毒素（enterotoxin）—约1/3临床分离金黄色葡萄球菌可产生—引起急性胃肠炎（即食物中毒）—耐热，抗胃肠液中蛋白酶—作用机制：刺激呕吐中枢导致以呕吐为主要症状的食物中毒—还具有超抗原（superantigen）作用葡萄球菌溶素（staphylolysin）—α溶素—损伤细胞膜的毒素（细胞毒素）杀白细胞素（leukocidin）—细胞毒素—攻击中性粒细胞和巨噬细胞—抵抗宿主吞噬细胞，增强细菌侵袭力2.所致疾病感染类型所致疾病侵袭性局部感染全身感染毒素性食物中毒TSSSSSS（三）.免疫性人类有一定的天然免疫力，只有当皮肤黏膜受伤后，宿主免疫力降低时，才易引起葡萄球菌感染。感染后能获得一定的免疫力，但不强，难以防止再次感染。小猫试验标本脓汁，血液，剩余食物，呕吐物等分离培养血浆凝固酶发酵甘露醇耐热核酸酶直接涂片镜检革兰阳性葡萄球菌生长现象色素，溶血……生化反应毒素检查药敏实验动物实验：对食物中毒患者（四）微生物学检查法防注意消毒隔离注意个人卫生防止医源性感染防止耐药性产生治抗菌素药敏试验自身菌苗疗法（五）、防治原则二、凝固酶阴性葡萄球菌Coagulasenegativestaphylococcus,CNS•泌尿系感染•细菌性心内膜炎•败血症•术后及植入医用器械引起的感染CNS已成为医源性感染的常见重要病原菌，耐药菌株日益增多；当机体免疫功能低下或细菌进入非正常寄居部位时，CNS可引起多种感染，各类感染中仅次于大肠埃希菌，居病原菌的第2位，造成诊治困难，引起临床微生物学工作者关注。CNS除表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌外，还包括溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、头葡萄球菌等30多种。第二节链球菌属（Streptococcus）•A群（化脓性）链球菌（S.pyogenes）•肺炎链球菌（S.pneumoniae）概述1.概念链球菌属是一大类G＋、排列呈双或长短不一的链状球菌。2.分类1)溶血现象分类链球菌在血琼脂平板培养基上生长繁殖后，按产生溶血与否及其溶血现象分为3类：①甲(α)型溶血；②乙(β)型溶血；③丙(γ)型溶血。根据溶血现象分类溶血环现象名称类别致病性草绿色溶血环溶血甲型溶血性链球菌多为条件致病菌完全溶血环溶血乙型溶血性链球菌溶血性链球菌致病力强不溶血丙型链球菌不溶血性链球菌无致病性2）抗原结构分类据链球菌细胞壁中抗原结构（C多糖抗原）不同,运用血清学方法分成A～V20群。对人致病的链球菌菌株，90%左右属A群，其他群少见。同一群的链球菌又分若干型。A群根据其M抗原不同，可分成约100个型。3）生化反应分类对一些不具有群特异性的链球菌（如肺炎链球菌和草绿色链球菌等），需用生化反应、药物敏感和对氧的需要分类。对氧的需要分类分为：需氧、厌氧和微需氧链球菌。医学常见链球菌链球菌血清群溶血诊断要点引起常见疾病化脓性链球菌A群β溶血；杆菌肽敏感皮肤感染，咽炎，风湿热，肾炎无乳链球菌B群β溶血；杆菌肽不敏感新生儿败血症和脑膜炎水解马尿酸盐牛链球菌D群不溶血；不耐6.5%NaCl败血症，心内膜炎肺炎链球菌—α溶血；胆盐敏感肺炎，脑膜炎，心内膜炎草绿色链球菌—α或不溶血；胆盐不敏感龋齿，心内膜炎一、A群（化脓性）链球菌本属细菌的代表种，致病性强，对人致病的链球菌有90%属此种。1.形态与染色球形或椭圆形，链状排列，革兰染色阳性（G＋），无芽胞，无鞭毛，有透明质酸的荚膜。(一)生物学性状2.培养特性•营养要求高：血平板或含血清培养基；•液体培养为沉淀生长；•血平板呈灰白色表面光滑小菌落，不同菌株溶血不一，多数有透明溶血环（β溶血现象）。3.生化反应•分解葡萄糖，产酸不产气。•不分解菊糖，不被胆汁溶解（可鉴别甲型溶血性链球菌与肺炎链球菌）。•链球菌不产生触酶，与葡萄球菌不同。4.抗原结构分20个群，A群致病菌（溶血性链球菌或化脓性链球菌）根据蛋白抗原进一步分类M抗原荚膜细胞壁蛋白质多糖肽聚糖细胞膜细胞质1）多糖抗原（C抗原）群特异性抗原，细胞壁的多糖组分。2）表面抗原或称蛋白质抗原：壁外的菌毛样结构含M蛋白，位于C抗原外层，具型特异性，有近100种血清型。M抗原与致病性有关。3）P抗原或称核蛋白抗原：无特异性。5.抵抗力一般链球菌均可在60℃被杀死，对常用消毒剂敏感。在干燥尘埃中生存数月。乙型链球菌对青霉素、红霉素，四环素、杆菌肽和磺胺药都很敏感。A群链球菌有较强的侵袭力，产生多种外毒素和胞外酶。1.致病物质致病物质可分三大类：细菌的胞壁成分，胞壁上的粘附素外毒素胞外侵袭酶类（二）致病性与免疫性｛｝｛｝｛｝｛｝1)胞壁成分(1)粘附素，包括：①脂磷壁酸（lipoteichoicacid,LTA）与生物膜有高度亲和力，是该菌定植在机体皮肤和呼吸道黏膜等表面的主要侵袭因素。②F蛋白（proteinF）位于化脓性链球菌细胞壁内，其结合区暴露在菌体表面，是纤维粘连蛋白（fibronectin,FBP）的受体。有利于细菌定植和繁殖。(2)M蛋白（Mprotein）是A群链球菌的主要致病因子，含M蛋白的链球菌具有抗吞噬和抵抗细胞内杀菌作用；与某些超敏反应疾病有关。(3)肽聚糖A群链球菌的肽聚糖具有致热、溶解血小板、提高血管通透性和诱发实验性关节炎等作用。2）外毒素类(1)致热外毒素（pyrogenicexotoxin）是人类猩红热的主要毒性物质。致热外毒素抗原性强，具有超抗原作用，对兔有致热性和致死性。(2)链球菌溶素（streptolysin）溶解红细胞、破坏白细胞和血小板。A族链球菌可分为两种溶血素（hemolysin）：链球菌溶素O（SLO）：对哺乳动物多种细胞有毒性作用链球菌溶素S（SLS）：对白细胞和多种组织细胞有破坏作用3）侵袭性酶（invasiveenzyme）A群链球菌可产生多种侵袭酶，均是扩散因子。（1）透明质酸酶（hyaluronidase）：分解间质内透明质酸，使病菌易扩散。（2）链激酶（streptokinase,SK）：与葡激酶类似，使血液中纤维蛋白酶原变成纤维蛋白酶，溶解血块或阻止血浆凝固，利于病菌扩散。（3）链道酶（streptodomase,SD）：亦称链球菌DNA酶，降解DNA，使脓液稀薄，促进病菌扩散。2.所致疾病A群链球菌引起的疾病约占人类链球菌感染的90%淋巴管炎、蜂窝组织炎、扁桃体炎等。猩红热(3)超敏反应性疾病(1)化脓性感染(2)中毒性疾病风湿热急性肾小球肾炎3.免疫性可刺激机体产生各种抗体，获得对同型链球菌的特异性免疫力。型别间无交叉免疫。抗M蛋白抗体有保护作用，不同型M蛋白均可诱生γ-干扰素。猩红热患者可建立牢固的同型抗毒素免疫。标本直接涂片镜检革兰阳性链球菌分离培养脓汁，血液，咽喉拭子与金葡菌的鉴别与肺炎链球菌的鉴别典型链球菌形态典型的链球菌菌落必要时做：生化反应或药敏实验等(三)微生物学检查法血清学检查抗O试验（ASOtest）：链球菌侵入体内产生SLO，刺激机体产生相应抗体ASO，当两者中和后，在加入SLO乳胶试剂，因病人血清中ASO量很多，未被中和的抗体与乳胶试剂反应，产生凝集，为阳性；无凝集，为阴性。–原理：中和试验，用SLO检测血清中的ASO–方法：间接凝集–结果：效价大于400单位–意义：活动性风湿热及肾小球肾炎辅助诊断积极治疗儿童链球菌感染，防止发生急性肾炎和风湿热。抗生素首选青霉素：用长效青霉素预防链球菌感染，对减少肾小球肾炎及风湿热的发生有一定效果。(四)防治原则二、其他链球菌（一）甲型溶血性链球菌：也称草绿色链球菌（streptococcusviridians）。因无多糖抗原，故不属于Lancefield血清学分类的任何族。包括多个种，条件致病，可引起下列两种疾病：1.龋齿（dentalcaries）：常由变形链球菌引起。2.亚急性细菌性心内膜炎（subacutebacterialendocarditis,SBE）由此菌引起的SBE占全部病例50%。（二）B族链球菌又称无乳链球菌。可寄居于正常妇女阴道和直肠，也寄