电针对高脂血症大鼠血脂超敏C反应蛋白脂联素的调节作用

电针对高脂血症大鼠血脂、超敏C反应蛋白、脂联素的调节作用严志康，杨智杰，陈锋（武汉大学人民医院针灸科，武汉430060）摘要：目的：观察针刺和电针对高脂血症大鼠血脂、超敏C反应蛋白（HS-CRP）、脂联素（Adiponectin，ADPN）的调节作用及作用机理。方法：健康成年Wistar大鼠32只，随机分为正常对照组、模型组、手针组、电针组每组8只。采用高脂饲料饮食造模，正常对照组给予基础饲料，余组均给予高脂饲料，平均每只大鼠30g/日。连续喂养40天，造模成功后，手针组针刺大鼠“后三里”和“中脘”穴。电针组针刺并用电针刺激。4周后抽血观察不同处理因素对血清TC、TG、LDL-C、HDL-C、采用免疫散射比浊法检测HS-CRP、应用酶联免疫法进行检测ADPN。并观察手针，电针对以上指标的影响。结果：模型组TC、TG、LDL-C、HS-CRP显著高于对照组(P0.05或P0.01)，HDL-C、ADPN显著低于对照组（P0.05）。电针组、手针组TC、TG、LDL-C、HS-CRP显著低于模型组(P0.05或P0.01)，HDL-C、ADPN显著高于模型组（P0.01）。手针组TC、TG、LDL-C、HS-CRP高于电针组(P0.05或P0.01)，HDL-C、ADPN显著低于电针组（P0.01）。手针组HDL-C和电针组无统计学差异。结论：电针和手针可以有效的调节高脂血症大鼠的血脂水平，并可以降低HS-CRP水平，升高脂联素（ADPN）的水平。电针疗效优于手针。关键词：电针；高脂血症；超敏C反应蛋白；脂联素TheeffectofElectro-Acupunctureonblood-lipid,high-sensitivityC-reactiveprotein(HS-CRP)andadiponectin(ADPN)inhyperlipidemiaratsYanzhikang,Yangzhijie,ChenFeng(DepartmentofAcu-moxibustion,RenminHospitalohWuhanUniversity)Abstract：Objective:Thepurposeofthisstudywastoobservetheeffectandprincipleofelectro-acupunctureonblood-lipid,high-sensitivityC-reactiveprotein(HS-CRP)andadiponectin(ADPN)inhyperlipidemiarats.Methods:32maleWistarratswererandomlydividedintofourgroups:controlgroup,hyperlipidemiamodelgroup,acupuncturegroup,electro-acupuncturegroup.With8ratsineachgroup.Exceptforthecontrolgroup,hyperlipemicratswereinducedbyhighfatdiet,theaveragedailyperrat30g.Feedtheratsfor40days.After4weeksof第一作者：严志康武汉大学人民医院针灸科430060e-mail:[e-mail]-acupuncture,serumlevelsoftriglyceride(TG),totalcholesterol(TC),highdensitylipoproteincholesterol(HDL-C),lowdensitylipoproteincholesterol(LDL-C),high-sensitivityC-reactiveprotein(HS-CRP)andadiponectin(ADPN)weredetected.Results:Aftertreatmentfor4weeks,thelevelsofTC,TG,LDL-C,HS-CRPinelectro-acupuncturegroup,acupuncturegroupwerereduced(P0.05orP0.01)andthelevelsofHDL-C、ADPNwereelevated(P0.01),comparedwithhyperlipidemiamodelgroup.Conclusion:Electro-acupuncturehasmodulationeffectonhyperlipidemiaandcanreducethelevelofHS-CRP,increasethelevelofadiponectin(ADPN)inhyperlipemicratsinducedbyhighfatdiet.Keywords：Electro-acupuncture，Hyperlipoidemia，HS-CRP，Adiponectin(ADPN)，Experimentalresearch引言高脂血症(hyperlipidemia,HL)是由于脂肪代谢或转运异常导致血浆中脂类浓度异常，包括血总胆固醇（TC）升高、甘油三脂(TG)升高、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)升高或高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)降低的一类脂质代谢紊乱性疾病，是目前公认的动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)和心脑血管疾病的主要危险因素。针刺配电针对本型高脂血症患者临床疗效较好[1]。近年来针灸治疗单纯性肥胖已经取得了显著成果，体针、耳针、灸法、针刺结合推拿拔罐，以及穴位埋线对单纯性肥胖有较好疗效[2]。研究发现超敏C反应蛋白（HS-CRP）、脂联素（Adiponectin，ADPN）和肥胖、高脂血症、以及心脑血管疾病有直接关系。Hs-CRP是目前被认为是和动脉粥样硬化关系最为密切的炎症标志物之一[3]，脂联素与动脉粥样硬化、高脂血症也有密切的关系[4][5]。本实验通过对高脂血症大鼠的血脂水平、超敏C反应蛋白（HS-CRP）、脂联素（Adiponectin，ADPN）探讨电针对高脂血症大鼠作用机制。1实验方法1.1实验动物与模型制备雄性Wistar大鼠，32只，SPF级，体重180±20g，由湖北省实验动物中心提供，许可证号：No.00009561。（本实验遵循国际上广泛接受的减少、替代、优化为主的3R实验动物伦理学原则）随机分为正常对照组、模型组、手针组、电针组，每组8只。使用食饲高脂饲料法（平均每只鼠每日30g）进行造模，配方(%)组成为：基础饲料81，胆固醇2，猪油7，蛋黄粉10，造模时间40天。正常对照组喂基础饲料，40天后尾静脉采血测定血脂水平，TC、TG、LDL-C显著升高清（SPF级雄性SD大鼠血清TC、TG、LDL-C、HDL-C值分别为1.60±0.42mmolL、0.75±0。30mmolL、0.45±0.17mmolL、0.90±0.10mmolL）。HDL-C显著降低，说明高脂血症模型复制成功[6]。1.2干预方法手针组、电针组大鼠固定，用0.25mm*10mm毫针分别针刺“后三里”和“中脘”穴，4mm和2mm，平补平泻手法行针1min。电针组用6805电针仪，频率20Hz连续波，(1.5V、4mA)持续20min，“后三里”穴左右交替取穴。对照组、模型组仅固定20min不行针刺。各组干预1次/d，连续4周，干预期间各组均给予正常饮食。实验结束后，动物禁食过夜，次日断头处死。采血，离心，分离血清待测[7]。同时剖取肝脏组织块，进行石蜡包埋切片，HE染色后制成组织切片待观察。1.3观察指标及测定方法（1）TC、TG、LDL-C、HDL-C检测：从各实验组大鼠采血，3000r/min离心5min，取上层血清，用奥林巴斯AU640全自动生化分析仪测定甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)含量[8]。（2）HS-CRP的检测：采用免疫散射比浊法，五点定标，按说明书编辑参数，在全自动生化检测仪上测定。Hs-CRP正常值为0-lmg/L。（3）脂连素的测定：取血及分离血清同前，应用酶联免疫法进行检测，实验前按说明书配好血清，提前配置好所有试剂按以下步骤在酶标仪上进行检测[9]。1.4实验试剂蛋黄粉，武汉银河化工有限公司提供，批号为20091220；胆固醇，蓝恒生物有限公司提供，批号为100220；TC试剂盒，中生北控生物科技股份有限公司提供，批号为20100220；TG试剂盒，中生北控生物科技股份有限公司提供，批号为20100315；HDL-C试剂盒，中生北控生物科技股份有限公司提供，批号为20100130；LDL-C试剂盒，中生北控生物科技股份有限公司提供，批号为20091230；apoA-Ⅰ试剂盒，武汉华美生物工程有限公司提供，批号为20100322；apo-B试剂盒，武汉华美生物工程有限公司提供，批号为20100228；Lp（a）试剂盒，武汉华美生物工程有限公司提供，批号为20100315；HS-CRP试剂盒，武汉谷歌生物有限公司提供，批号为20100218；脂联素试剂盒，武汉华美生物工程有限公司提供，批号为20100121。1.5统计方法实验过程中的动物无脱失，32只大鼠全部计入统计。数据以均数±标准差（x±s）表示，用SPSS17.0统计软件进行数据分析，统计方法用单因素方差分析，两两比较采用q检验，以P＜0.05为有统计学意义。2实验结果2.1造模后大鼠TC、TG、LDL-C、HDL-C水平造模后，与正常对照组相比，模型组、手针组、电针组大鼠血清中TC、TG、LDL-C的水平均显著升高（P0.05或P0.01），HDL-C的水平显著降低（P0.01），表示高脂血症大鼠模型复制成功。见表1表1造模后大鼠TC、TG、LDL-C、HDL-C水平（x±ｓ）组别nTC(mmol/l)TG(mmol/l)LDL-C(mmol/l)HDL-C(mmol/l)正常对照组81.45±0.120.48±0.120.40±0.070.89±0.09模型组82.24±0.65＊1.06±0.29▲0.71±0.05▲0.71±0.06▲手针组82.35±0.59＊1.05±0.27▲0.72±0.05▲0.72±0.04▲电针组82.26±0.64＊1.07±0.30▲0.69±0.07▲0.71±0.06▲注：与正常对照组相比，＊P0.05▲P0.01****▲▲▲▲▲▲▲▲00.511.522.53TCTGLDL-CHDL-C血脂水平mmol/l正常对照组模型组手针组电针组Fig1Comparisonamongthecontrolgroup,hyperlipidemiamodelgroup,acupuncturegroup,electro-acupuncturegroupinthelevelofTC、TG、LDL-C、HDL-Cafterhighfatdietfor40days.2.2治疗4周后，大鼠TC、TG、HDL-C、LDL-C的水平模型组的TC、TG、LDL-C水平明显高于正常对照组，HDL-C水平又明显低于正常对照组，且都具有显著性（P0.01）；与模型组比，手针组、电针组的TC、TG、LDL-C水平又有显著的降低（P0.05或P0.01），HDL-C水平又有显著的升高（P0.01），说明各组均有较好的调整血脂的作用；电针组中TC、TG、LDL-C水平均显著降低（P0.05或P0.01），HDL-C水平显著升高（P0.01），与手针组比电针组中TC、TG、LDL-C水平均降低，且有显著差异性（P0.05），HDL-C水平与手针组无明显差异性（P0.05）。见表2表2治疗4周后，大鼠TC、TG、HDL-C、LDL-C的水平（x±ｓ）组别nTC(mmol/l)TG(mmol/l)HDL-C(mmol/l)LDL-C(mmol/l)正常对照组81.47±0.