第十六章人体组织的检验

第十六章人体组织的检验一、毛发检验毛发结构：毛发是皮肤的一种特殊的附属器，是皮肤毛囊细胞产生的一种富有弹性角质体。毛尖-----是毛干的游离末端，毛干向毛尖逐渐变细而尖毛干-----是裸露于皮肤外部的部分，由角化上皮细胞组成，中心向外可以分为：毛小皮：人----毛小皮花纹通常为细小波浪状。毛皮质：人----皮质发达，毛髓质：人---髓质不发达、而且髓质不连续毛根-----是埋在皮肤内的部分。毛球：毛根起始端膨大和球状的部分毛囊：包裹毛根的一管状结构，内层为上皮根鞘、外层为纤维组织鞘毛乳头：毛球和毛囊末端膨大，底面内凹，含毛细血管和神经的结缔组法医意义：1毛发容易脱落，在凶杀、强奸、抢劫等案件中均可遗留2毛发理化性质稳定，其主要成分为角蛋白，不易腐蚀和毁坏，可长期保存3毛发可以进行个人识别鉴定注意：1毛发容易丢失，检验时应该特别小心，最好带口罩2选择合适的背景进行观察毛发与其他纤维的鉴别肉眼观：毛尖、毛干、毛根显微镜：毛小皮、毛皮质、毛髓质燃烧法：毛发由特殊的臭味----角蛋白中含有3%~5%的硫人毛与其他动物毛的鉴别毛小皮毛皮质毛髓质形态边缘宽度色素宽度连续性末端人毛细而不规则花形细锯齿状较宽2/3均匀较窄1/4~1/5不连续部分缺如动物毛形状多变粗锯齿状较窄1/2~1/3不均匀较宽》1/3连续直至毛尖毛发部位的确定毛发其他特征鉴别5%~10%亚硝基铁氰化钠溶液脱落----毛根完全角化，干燥萎缩，无根鞘附着，根部色素少。染色不颜色反应拔出----毛囊组织附着、毛球湿润，毛球下端开放呈钩状，染色呈红色。钝器损伤----钝器作用部位变宽扁平，皮质纤维分离，部分或完全断裂锐器损伤----断端平滑整齐、毛干不碎裂、皮质纤维不分裂长度直径横断面头发~2m《0.1圆形或椭圆形胡须~30cm0.15钝的三角形阴毛3~6cm0.1~0.2长椭圆形毛发的个人识别形态学检查：长度---色泽---黑色、浅褐色、灰色、白色---色素：白色、黑色、红色形态---直发、波状发、卷发断端---剪切或切割、部分撕裂或完全撕裂免疫学检查：ABO血型----解离试验特征：1血型物质含量少；2毛小皮没有血型物质，只有皮质和髓质才有方法：毛发洗净--乙醇脱色--充分压扁--加抗体吸收---涤、解离、RBC注意：1毛发压扁，原宽度地~4倍；2抗血清效价》128；3吸收时间充分，过夜4毛发对照生化学检查：有毛根和毛囊的毛发可以检测ESD、GLOI、PGM1、ORM等分子生物学：带毛囊---DNA提取用chelex-100，STR基因座分析，性别基因鉴定毛干---线粒体DNA多态性分析化学分析：微量元素的检测应用：可以推测可能的生活环境、从事的职业、判断是否中毒方法：原子发射光谱析、原子吸收分光光度、中子活性、气相色谱、质谱二、软组织检验1种类鉴别肉眼观察适合于组织块比较大的检材的识别组织切片HE染色后，在显微镜下观察，鉴别***如果干燥组织可以用5%醋酸浸软组织以恢复正常形态皮肤----复层鳞状上皮细胞的表层结构+真皮层的毛囊和皮脂腺，及皮下脂肪脑组织----神经细胞和神经胶质细胞肝脏----肝细胞及胆管构成发肝小叶结构肾脏----肾小球、肾小管、消化道----粘膜层、粘膜下层、肌层、外膜2种属鉴定免疫学方法：抗人血清---沉淀反应、凝集反应、酶免疫分析**法医检验中的组织经常受各种因素的影响，变性或分解，易产生误判。分子生物学：Alu序列含有AluI酶切位点散在重复序列，由300bp重复单位，该序列为人类和灵长类特有-----种属特异性PCR-AFLP：人类130bp的扩增产物28srRNArRNA=60s（28s+5.8s+5s+50多种多肽）+40保守区中的可变区进化较快，种属之间差异很大人类108、104、101、99bp，不同动物的扩增产物长度不同细胞色素b基因位于线粒体上的具有种属差异的遗传标记人和哺乳类动物区别AluI酶切位点--酶切片断的长度不同人和鸟类的动物区别—NcoI酶切位点---人类不含有该酶切位点SON基因3个人识别检验基础：正常情况下，同一个体不同组织的血型、酶型、DNA分型结果相同例外：癌变的组织；腐败组织----获得性B物质影响因素：环境因素，干燥能保存，潮湿易破坏温度、酸碱烧熟（但未焦）的组织可以检出，自溶和腐败使组织的血型物质及其他的遗传标记更容易被破坏送检注意：1尽快送检---2妥善保存---所有检材不宜用甲醛固定3合理选材---肝脏和脾脏中核酸分解酶丰富，蛋白质和DNA降解快，不宜首选，肌肉和脑是提取DNA较理想的检材血型：ABO血型ABH抗原不仅分布于人类红细胞上，也存在于人体各种上皮细胞、血管与淋巴管的内皮细胞、心内膜及神经组织的神经细胞及突触。有些组织的ABH抗原发育较红细胞早方法：吸收试验---凝集抑制试验解离试验---热解离试验混合凝集---红细胞粘连试验免疫组化---酶标抗体的应用基因分型---PASA、PCR-RFLP、ASO-PCR酶型测定检材处理：组织制成匀浆，DNA分析DNA提取：冷冻组织---常规有机溶剂，量少用Chelex-100DNA分析STR或HLA基因分型三、其他组织检验1指甲检验—由表皮细胞角化而成，由多层连接牢固的角化细胞构成，细胞内充满角质蛋白。ABO血型特点：ABH为水溶性血型物质，但不受分泌型的影响，存在于所有的个体。成人和新生儿指甲中的ABH含量无明显的差异。方法：洗净---用肥皂水充分的洗涤，再用蒸馏水冲洗数次软化---生理盐水中2小时，晾干脱脂---丙酮或乙醇脱脂压碎---加大抗血清接触的面积mtDNA检测测定mtDNA多态性的灵敏度比检测核DNA的多态性高2骨及牙检验-----人体最坚硬的组织，抵抗腐败，长期保存检材处理：用手术刀刮净骨表面和牙齿表面的污垢物，用蒸馏水冲洗2次，紫外线照射1小时后，用锤子将牙齿砸碎成粉末，或用电钻取出骨粉ABO血型：骨粉经乙醇脱脂后，分别粘在透明胶布上-----解离试验DNA分析：常规提取以后，可以再用DNAclean-up纯化备用。