盐酸氟西汀验证实例.

徐禾丰分析方法验证盐酸氟西汀验证实例现代验证系列简介•美国某公司生产10mg和20mg盐酸氟西汀两种相胶囊•其重量与配方相同,仅盐酸氟西汀与辅料比例不同•所验证方法是公司内部对美国和欧盟市场产品产品放行和稳定性研究中使用的含量和杂质分析的方法•该分析方法已经建立2含量与杂质的分析方法基本一致验证项目清单1.精密度2.线性3.范围4.准确性5.低浓度盐酸氟西汀验证6.m-盐酸氟西汀验证7.选择性8.耐用性3精密度项目:1.系统重复性2.方法重复性3.中间精密度4系统重复性方法•按照分析方法要求,配制盐酸氟西汀标准溶液•重复进样5次计算•峰面积平均值•相对标准偏差5目的是检查系统是否可靠方法重复性方法•按照分析方法要求,分别配制20mg盐酸氟西汀样品溶液6个•分别进样计算•含量相对标准偏差6目的是检查分析方法本身是否可靠中间精密度方法•由另外一个分析员•在不同日期•另外的仪器上•按照分析方法要求•分别配制20mg盐酸氟西汀样品溶液6个计算•含量及相对标准偏差7目的是检查分析方法对不同人,日期,仪器是否可靠线性方法•正常含量分析用标准溶液浓度的50%到200%范围内•均匀选择5个点•配制相应浓度的盐酸氟西汀含量标准溶液•分别进样计算•线性回归分析•相关系数•斜率•Y轴截距8范围方法•正常20mg样品含量分析浓度50%到200%范围内•均匀选5个点•并配制盐酸氟西汀样品溶液•分别进样计算•线性回归分析•相关系数•斜率•Y轴截距9准确性项目:1.标准品准确性2.样品准确性10标准品准确性方法•按照分析方法要求•配制盐酸氟西汀标准溶液•重复进样5次计算•准确性•测定浓度值用峰面积按照回归方程进行计算11样品准确性方法•按照产品的标示量•在70%到180%正常标示量选均匀选择4个点•混合辅料与及盐酸氟西汀•每点3个样品•分别进样计算•回收率•测定浓度值用峰面积按照回归方程进行计算12低浓度盐酸氟西汀验证项目:1.线性2.准确性3.系统重复性4.定量限度5.检测限度13线性方法•按照分析方法要求•均匀选择6个点•配制标示量的0.02%到1.0%含量标准溶液•分别进样计算•线性回归分析•相关系数•斜率•Y轴截距14准确性方法•配制杂质浓度的标准溶液•进样6次计算•按峰面积用回归线性方程来计算测量浓度•平均值•相对标准偏差15系统重复性方法•配制工作浓度的0.02%和0.05%标准溶液•分别进样6次计算•峰面积的平均值•相对标准偏差16定量限度用系统重复性实验中的标准偏和线性回归方程中的斜率差计算17检测限度用系统重复性实验中的标准偏和线性回归方程中的斜率差计算18m-盐酸氟西汀验证项目:1.线性2.检测限度3.定量限度4.准确性5.精密度•方法重复性•中间精密度19m-盐酸氟西汀简介m-盐酸氟西汀是产品中的一个杂质m-盐酸氟西汀在0.05%－1.0%区间呈线性相对响应因子(对盐酸氟西汀):F=132.73952/74859534=1.820定量限度根据盐酸氟西汀定量限度相对响应值计算盐酸m-氟西汀定量限度21检测限度根据盐酸氟西汀检测限度相对响应值计算盐酸m-氟西汀检测限度22回收方法:•分别6个标空白中加0.05%的m-盐酸氟西汀进样计算:•回收率•实际检测值用峰面积按照回归线性方程计算23准确性方法:•在已知m-盐酸氟西汀含量的样品中分别在0.4%,0.5%和0.6%3个水平加入m-盐酸氟西汀标准品•每组3个样品中计算:•回收率•实际检测值用峰面积按照回归线性方程计算24重复性项目:1.方法重复性2.中间精密度25方法重复性方法:•按照要求配制溶液•反复进样6次计算:•平均值•标准偏差•相对标准偏差26中间精密度方法:•另外一个分析员•在不同日期•另外的仪器上按照方法重复性方法•配制溶液6次•并分别进样计算:•含量•相对标准偏差27选择性降解原样酸降解碱降解氧化降解日光降解溶液加热降解粉末加热降解系统适应性空白28简介•降解产物的选择性试验是分析方法稳定性指示性验证的一个重要部分•主要目的是通过试验证明各种降解的产物与所要分析的物质可以完全分开•本试验中的主要设备是二极管矩阵检测器•并通过计算纯度角,匹配角,纯度阈值,匹配阈值,含量来证明峰的纯度29原样品方法•20mg胶囊按照规定的方法进样分析•标准品按照规定的方法进样分析30酸降解样品•称量大约等量20mg的样品•转移到50ml容量瓶中•加入20ml稀释剂•并超声处理10分钟•加1ml的浓盐酸•放置18小时•用10N氢氧化钠中和到pH5.5•稀释到刻度•过滤31酸降解标准品•称量大约22mg的标准品•转移到50ml容量瓶中•加入20ml稀释剂,加2ml的盐酸•放置18小时•用10N氢氧化钠中和到pH5.5•稀释到刻度32碱降解样品•称量大约等量20mg的样品•转移到50ml容量瓶中•加入20ml稀释剂,并超声处理10分钟•加1ml的5N氢氧化钠•放置18小时•用5N盐酸中和到pH5.5•稀释到刻度•过滤33碱降解标准品•称量大约22mg的标准品•转移到50ml容量瓶中•加入20ml稀释剂•加2ml的5N氢氧化钠•放置18小时•用5N盐酸中和到pH5.5•稀释到刻度34氧化降解样品•称量大约等量20mg的样品•转移到50ml容量瓶中•加入20ml稀释剂•并超声处理10分钟•加1ml的30%过氧化氢•放置5小时•稀释到刻度•过滤35氧化降解标准品•称量大约22mg的标准品•转移到50ml容量瓶中•加入20ml稀释剂•2ml的30%过氧化氢•放置5小时•稀释到刻度36阳光降解样品•称量大约等量20mg的样品•在500w/hr.cell下曝光1小时•设定BST35C,ACT45C37阳光降解标准品•称量大约等量20mg的样品•在500w/hr.cell下曝光1.5小时•设定BST35C,ACT42C38溶液加热降解样品•称量大约等量20mg的样品•转移到50ml容量瓶中•加入20ml稀释剂•并超声处理10分钟•稀释到刻度•取4ml溶液并转移到坩埚内•与105C加热2小时•冷却到室温•过滤39溶液加热降解标准品•4ml的工作标准液转移到坩埚内•与105C加热2小时•冷却到室温•过滤40粉末加热降解样品•称量大约等量20mg的样品•转移到合适的试管中•于100C加热4小时•冷却到室温•转移到50ml容量瓶•加入20ml稀释剂•并超声处理10分钟•稀释到刻度•过滤41粉末加热降解标准品•称量大约等量45mg的标准品•转移到合适的试管中•于100C加热4小时•冷却到室温•转移到100ml容量瓶•稀释到刻度•过滤系统适应性•系统适应性按照规定方法进行•氟西汀与m-氟西汀间分离度应不小于2.0•氟西汀峰拖尾因子应不大于2.0•氟西汀的典型保留时间大约在9.5到10.0分之间43空白•分析两个批号的空白与氟西汀,并分析混合样品•没发现干扰峰44标准与样品溶液的稳定性项目:1.标准溶液2.样品溶液45标准溶液稳定性方法•配制标准溶液•冷藏于4C－8C放置30天以上•与两个新配制的标准溶液一道测试46样品溶液稳定性方法•配制样品溶液•冷藏放置48小时•重新分析47耐用性项目:1.提取效率2.析因设计48提取效率方法•取三个样品•按照要求配置溶液•但超声分为5,10和15分钟•每个样品测定3次49析因设计因素项目规格柱Shandon,HypersilBDSC-8,5m,1504.6mm流动相溶液A:溶液B(55:45)溶液A三乙胺缓冲液:乙腈:四氢呋喃(75:15:10)溶液B三乙胺缓冲液:乙腈:四氢呋喃(65:20:15)流量1.4－1.6mL/min温度30C(2C)进样量10mL检测器UVdetectorl=227nm,FlowCell=10mm.稀释剂溶液B50析因设计参数1.流动相构成2.流量参数3.柱温4.柱生产商51柱生产商事件柱温(C)流量(mL/min)溶液A(%)柱型号1301.555Shandon,Hypersil,BDSC-8,5m,150x4.6mm-1271.060Hypersil,BDSC-8,5m,150x4.6mm52析因设计序号溶液A(%)柱流量(ml/min)柱温(C)拖尾因子分离度保留时间min111111.52.69.421-11-11.32.69.63-1-1111.32.79.94-111-11.42.710.651-1-111.52.813.4611-1-11.32.814.87-11-111.52.815.28-1-1-1-11.42.815.753徐禾丰分析方法验证盐酸氟西汀验证实例现代验证系列