石灰性土壤有效磷含量测定GB12297

石灰性土壤有效磷含量的测定GB12297GB12297-901主题内容与适用范围本标准规定了测定土壤有效磷的碳酸氢钠浸提-钼锑抗比色法。本标准适用于石灰性土壤有效磷含量的测定；碱性或中性土壤也可参照使用。2方法提要用0.50mol/L碳酸氢钠溶液浸提土壤有效磷。碳酸氢钠可以抑制溶液中Ca2+的活度，使某些活性较大的磷酸钙盐被浸提出来；同时也可使活性磷酸铁、铝盐水解而被浸出。浸出液中的磷不致次生沉淀；可用钼锑抗比色法定量。测定值与作物对磷肥反应的相关性高。3试剂和溶液分析中仅能用蒸馏水或相当纯度的水。3.1碳酸氢钠（GB640，分析纯）；3.2氢氧化钠（GB629，化学纯）：50％（m/V）溶液；3.3活性炭（HG3─1290，化学纯）；3.4盐酸（GB622，化学纯）：1+1溶液；3.5钼酸铵（GB657，分析纯）；3.6硫酸（GB625，分析纯）；3.7酒石酸氧锑钾〔K（SbO）C4H4O6·1/2H2O，分析纯〕：0.30％（m/V）溶液；3.8抗坏血酸（C6H8O6，左旋，比旋光度＋21～＋22°，分析纯）；3.9磷酸二氢钾（GB1274，分析纯）；3.10浸提剂（0.50mol/LNaHCO3，pH=8.5）。将42.0g碳酸氢钠（3.1）溶于约800mL水中，稀释至1L，用氢氧化钠溶液（3.2）调节至pH至8.5（用pH计测定）。贮存于聚乙烯或玻璃瓶中，用塞塞紧。如贮存期超过20d，使用时必须检查并校准pH；3.11无磷活性碳粉：如果所用活性炭（3.3）含磷，应先用1+1盐酸（3.4）浸泡12h以上，然后移放在平板漏斗上抽气过滤，用水淋洗4～5次，再用浸提剂（3.10）浸泡12h以上，在平板漏斗上抽气过滤，用水洗尽碳酸氢钠，并至无磷为止，烘干备用；3.12钼锑贮备液：10.0g钼酸铵（3.5）溶于300mL约60℃的水中，冷却。另取181mL硫酸（3.6）缓缓注入约800mL水中，搅匀，冷却。然后将稀硫酸注入钼酸铵溶液中，随时搅匀；再加入100mL酒石酸氧锑钾溶液（3.7）；最后用水稀释至2L，盛于棕色瓶；3.13显色剂：0.50g抗坏血酸（3.8）溶于100mL钼锑贮备液（3.12）中。此试剂有效期在室温下为24h，在2～8℃冰箱中可贮存7d；3.14磷标准贮备溶液〔c（P）＝100mg/L〕：称取105℃烘干的磷酸二氢钾（3.9）0.4394g，溶于约200mL水中，加入5mL硫酸（3.6），转入1L容量瓶中，用水定容。此贮备溶液可以长期保存；3.15磷标准工作溶液〔c（P）＝5mg/L〕：将磷标准贮备溶液（3.14）用浸提剂（3.10）准确稀释20倍。此工作溶液不宜久存。4仪器和设备4.1土壤筛：1mm方孔筛；4.2分析天平：感量为0.01g；4.3锥形瓶：50和150mL，带橡皮塞；4.4漏斗：7cm；4.5滤纸：11cm，不含磷；4.6移液管：5，10和20mL；4.7吸量管：5mL；4.8量筒：50mL；4.9容量瓶：50mL；4.10分光光度计：可在880nm波长处测读吸光度；4.11恒温往复振荡机，或普通往复振荡机及25±1℃的恒温室。振荡频率约180r/min，但在150～250r/min的振荡机都可使用。5测定步骤5.1土壤有效磷的浸提称取通过1mm筛的风干土样2.50g，置于干燥的150mL锥形瓶中，加入25±1℃的浸提剂（3.10）50.0mL，用橡皮塞塞紧，在25±1℃的液温下，于往复振荡机上振荡30±1min，立即用无磷滤纸过滤入干燥的150mL锥形瓶中。5.2滤出液中磷的定量在浸提土样的当天，吸取滤出液10.00mL1）（含1～25μgP）放入干燥的50mL锥形瓶中，加入显色剂（3.13）5.00mL，慢慢摇动，使二氧化碳逸出。再加入10.00mL水，充分摇匀，逐尽二氧化碳。在室温高于15℃处放置30min后，用1cm光径比色槽2）在880nm波长处比色3），测读吸光度，以空白溶液〔10.00mL浸提剂（3.10）代替土壤滤出液，同上处理〕为参比液，调节分光光度计的零点。注：1）如果土壤有效磷含量较高，应改吸取较少量的滤出液，并加浸提剂（3.10）补足至10.00mL后显色。2）比色溶液中的磷浓度很低时，可与标准系列显色溶液（5.3）一起改用2或3cm光径比色槽比色。3）如果没有880nm波长的分光光度计，而滤出液的颜色又较深，或滤出液显色后浑浊时，可改在土壤浸提振荡30min后，在过滤之前，向土壤悬浊液中加入约0.3～0.5g活性碳粉（3.11），摇匀后立即过滤，在比色时可用660～720nm波长或红色滤光片比色。5.3校准曲线的绘制或线性回归方程的计算在土样测定的同时，吸取磷标准工作溶液（3.15）0，1.50，2.50，5.00，10.00，15.00，20.00，25.00mL，分别放入50mL容量瓶中，并用浸提剂（3.10）定容。此标准系列溶液中磷的浓度依次为0，0.15，0.25，0.50，1.00，1.50，2.00，2.50mg/LP吸取标准系列溶液各10.00mL，同上（5.2）处理显色，测读系列溶液的吸光度。然后以上述标准系列溶液的磷浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标绘制校准曲线，或计算两个变量的直线回归方程。6结果表示6.1计算土壤有效磷含量X（P，mg/kg）按下式计算：X＝c×20式中：c──从校准曲线或回归方程求得土壤滤出液中磷的浓度，mg/kgP；20──浸提时的液土比。注：如果定量磷时吸取滤出液少于10mL，则测定结果必须再乘以稀释倍数（10/吸取滤出液体积，mL）。6.2精密度a.取平行测定结果的算术平均值为测定结果；b.平行测定结果的允许差：测定值，mg/kgP允许差＜10绝对差值＜0.5mg/kgP10～20绝对差值＜1.0mg/kgP＞20相对差＜5％