第八章 杂环类药物的分析

第八章杂环类药物的分析第一节吡啶类药物的分析NCONHNH2N异烟肼（isoniazid）吡啶（pyridine）NCON(C2H5)2尼可刹米（nikethamide）NCONHNCHOHOCH3异烟腙（ftivazide）一、结构与性质1.吡啶环弱碱性pKb～8.8，非水碱量法含量测定或沉淀反应鉴别吡啶环可发生开环反应，可用于吡啶类药物的鉴别2.取代基：（1）异烟肼位上酰肼基弱酸性非水酸量法还原性鉴别或氧化还原滴定法含量测定可与某些羰基试剂发生缩合反应鉴别或比色法含量测定酰胺键易水解引入特殊杂质游离肼（2）尼可刹米位上酰胺基易水解，遇碱水解后，释放出具有碱性的二乙胺，能使湿润的红色石蕊试纸变蓝色，故可以此进行鉴别。二、鉴别试验（一）吡啶环的反应1.沉淀反应（1）与氯化汞的反应白色异烟肼尼可刹米2HgCl（2）与铜盐的反应尼可刹米ChP（2000）草绿色尼可刹米SCNNHCuSO44【鉴别】（3）取本品2滴，加水1ml，摇匀，加硫酸铜试液2滴与硫氰酸胺试液3滴，即生成草绿色沉淀。2.吡啶环的开环反应适用于吡啶、′未取代，以及、为烷基或羧基的衍生物（1）戊烯二醛反应（König反应）（2）二硝基氯苯反应异烟腙ChP（2000）【鉴别】取异烟腙约50mg，加2,4－二硝基氯苯50mg与乙醇3m1，置水浴中煮沸2～3min，加10％氢氧化钠溶液2滴，静置后，即显鲜明的红色。紫红色二硝基氯苯，异烟肼乙醇OH42异烟肼不经处理的反应：（二）酰肼基团的反应1.还原反应23NAgAgNO、银镜）（黑色异烟肼异烟肼ChP（2000）【鉴别】（2）取异烟肼约10mg，置试管中，加水2ml溶解后，加氨制硝酸银试液1m1，即发生气泡与黑色浑浊，并在试管壁上生成银镜。（红色）异烟肼SeSeO22.缩合反应测定熔点异烟腙（黄色）香草醛异烟肼、OH2NCONHNH2+CHOOHOCH3H2ONCONHNCHOCH3OH异烟肼ChP（2000）【鉴别】（1）取本品约0.1g，加水5ml溶解后，加10％香草醛的乙醇溶液1m1，摇匀，微热，放冷，即析出黄色结晶，滤过，用稀乙醇重结晶，在105℃干燥后，测定熔点，其熔点为228～231℃，熔融时同时分解。（三）分解产物的反应二乙胺尼可刹米ΔNaOH1.尼可刹米ChP（2000）【鉴别】（1）取本品10滴，加氢氧化钠试液3ml，加热，即发生二乙胺的臭气，能使湿润的红色石蕊试纸变蓝色。2.丙硫异烟胺ChP（2000）【鉴别】（1）取本品约50mg，加盐酸溶液（9→100）3ml，缓缓加热，发生的气体可使湿润的醋酸铅试纸显黑色。（黑色）丙硫异烟胺PbSPb(Ac)SHSHHCl222（四）紫外吸收光谱特征丙硫异烟胺ChP（2000）【鉴别】（1）取本品，加乙醇制成每1ml中含20g的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在291nm的波长处有最大吸收，吸收度约为0.78。（五）IR尼可刹米ChP（2000）【鉴别】（4）本品的红外吸收图谱应与对照的图谱（光谱集135图）一致。三、杂质检查杂质来源原料引入、降解产生（一）异烟肼中游离肼的检查1.薄层色谱法（TLC）（1）ChP（2000）杂质对照品法%02.0%100105021050%1003供试品量允许杂质存在的最大量L（2）BP（1998）游离肼杂质对照品法有关物质高低浓度对比法2.比浊法JP（13）检查方法灵敏度法反应原理游离肼+水杨醛→水杨醛腙↓优点：不用对照品，价廉、简单易行缺点：准确度差3.差示分光光度法游离肼+对二甲氨基苯甲醛→黄色缩合物于456nm波长处有最大吸收异烟肼+对二甲氨基苯甲醛→缩合物于456nm波长处无吸收游离肼+3%丙酮→无色的二甲基甲酮连氮参比：异烟肼+游离肼+对二甲氨基苯甲醛+3%丙酮样品：异烟肼+游离肼+对二甲氨基苯甲醛测定，对照法定量（二）尼可刹米中有关物质的检查ChP（2000）TLC高低浓度对比法配制两种不同浓度的对照溶液四、含量测定（一）异烟肼的含量测定1.氧化还原滴定法（1）溴酸钾法ChP（2000）原料及制剂NCONHNH23+2KBrO3HClNCOOH3+3N2↑+3H2O+2KBr反应摩尔比3∶2mlmg429.33214.13701667.0ncMT（2）溴量法反应摩尔比1∶4mlmg429.3414.1371.0ncMTNCONHNH2+2Br2+H2OHClNCOOH+N2↑+4HBr（3）剩余碘量法反应摩尔比1∶4NCONHNH2+2+NCOOH+N2↑+4NaI+5I25NaHCO3CO2+4H2O2.非水溶液滴定法（1）非水酸量法（2）非水碱量法（二）尼可刹米的含量测定1.非水溶液滴定法ChP（2000）原料2.紫外分光光度法ChP（2000）注射液内容量移液管（三）异烟腙的含量测定非水溶液滴定法电位法指示终点ChP（2000）原料及片剂第二节吩噻嗪类药物的分析吩噻嗪类药物的基本结构NSRR'12345678910NSCH2CHN(CH3)2CH3HCl盐酸异丙嗪NSCH2CH2CH2N(CH3)2ClHCl盐酸氯丙嗪NSClCH2CH2CH2NNCH2CH2OH奋乃静NSCH2CH2CH2CF3NN(CH2)2OCO(CH2)8CH3癸氟奋乃静一、结构与性质（一）结构分析1.硫氮杂蒽母核（1）含S、N的三环共轭的大体系，S、N与苯环形成p-共轭——具有紫外吸收光谱特征10987654321NS（2）硫氮杂蒽环上硫原子为-2价，具有还原性，易氧化呈色（3）硫氮杂蒽环上硫原子有两对孤对电子，易与金属离子络合呈色2.取代基R：脂烃胺基、哌嗪基，具碱性R：卤素XXC一定方法破坏（二）性质1.紫外与红外吸收光谱本类药物的紫外特征吸收，主要由母核三环的π系统所产生，一般具有三个峰值。即在204～209nm（205nm附近）、250～265nm（254nm附近）和300～325nm（300nm附近）。最强峰多在250～265nm。2位上的取代基（R′）不同，会引起吸收峰发生位移。其结构中-2价的硫，易氧化，氧化产物砜及亚砜有四个吸收峰。吩噻嗪类药物随取代基R和R′的不同，产生不同的红外吸收光谱。2.易被氧化呈色3.易与金属离子络合呈色4.碱性二、鉴别试验（一）UV和IR奋乃静ChP（2000）[鉴别]（2）取本品，加无水乙醇制成每1ml中含7g的溶液，照分光光度法（附录ⅣA）测定，在258nm的波长处有最大吸收，吸收度约为0.65。（二）显色反应1.氧化剂氧化显色氧化剂硫酸、硝酸、过氧化氢奋乃静ChP（2000）[鉴别]（1）取本品5mg，加盐酸与水各1ml，加热至80℃，加入过氧化氢溶液数滴，即显深红色；放置后，红色渐褪去。盐酸异丙嗪ChP（2000）[鉴别]（1）取本品约5mg，加硫酸5ml溶解后，溶液显樱桃红色；放置后，色渐变深。（2）取本品约0.1g，加水3ml溶解后，加硝酸1ml，即生成红色沉淀；加热，沉淀即溶解，溶液由红色转变为橙黄色。癸氟奋乃静ChP（2000）[鉴别]（2）取本品约5mg，加甲醇2ml溶解后，加0.1%氯化钯溶液3ml，即有沉淀生成，并显红色，再加过量的氯化钯溶液，颜色变深。2.与钯离子络合显色（三）分解产物的反应癸氟奋乃静ChP（2000）[鉴别]（1）取本品15～20mg，加碳酸钠与碳酸钾各约0.1g，混匀，在600℃炽灼15～20分钟，放冷，加水2ml使溶解，加盐酸溶液（1→2）酸化，滤过，滤液加茜素锆试液0.5ml，应显黄色。溶液由红色变为黄色茜素癸氟奋乃静酸性茜素锆℃，]ZrF[F26600COKCONa3232（四）氯化物的反应盐酸氯丙嗪ChP（2000）[鉴别]（3）本品的水溶液显氯化物的鉴别反应（附录Ⅲ）。三、有关物质检查1.癸氟奋乃静及其注射液TLC参比杂质对照品法以盐酸氟奋乃静为对照品2.其他药物TLC高低浓度对比法四、含量测定（一）非水溶液滴定法原料药HClO4在冰醋酸溶液中，具强氧化性，可氧化吩噻嗪类药物产生红色的氧化物，干扰指示剂终点的观察。排除方法：（1）改用中性溶剂（2）加抗坏血酸（3）电位法指示终点（二）紫外分光光度法1.直接分光光度法盐酸异丙嗪：片剂测定波长为249nm（为910）；注射液为了消除抗氧剂维生素C（max243nm）对测定的干扰，测定波长改为299nm（为108）。1%1cmE1%1cmE同理，盐酸氯丙嗪片剂测定波长为254nm（为915）；注射液测定波长改为306nm（为115）。1%1cmE1%1cmE2.萃取后分光光度法盐酸氯丙嗪注射液计算。为以，测定盐酸氯丙嗪乙醚层氯丙嗪盐酸氯丙嗪盐酸萃取乙醚提取氨水碱化915E12541%1cmmaxAnm3.二阶导数分光光度法盐酸氯丙嗪注射液抗氧剂维生素C的二阶导数光谱近似为接近基线的一条直线，不干扰盐酸氯丙嗪的测定4.萃取—双波长分光光度法（1）原理在待测组分（a）的最大吸收波长（测定波长，1）处测定待测组分和干扰组分（b）吸收度的总和；另选一适当波长（参比波长，2）测定吸收度，并使干扰组分在测定波长和参比波长处的吸收度相等，即，而待测组分在这两个波长处吸收度的差值足够大。bbAA21（2）定量依据样品在二波长下吸收度差值（A）：abbaaababababaCAAAlCAAAAAAAAA)()()(212121221121（3）必要条件①干扰组分在两个波长处吸收度相等②待测组分在两个波长处吸收度相差足够大（三）铈量法红色消褪红色e2,)Ce(SOe,)Ce(SOsolHS2424自身指示终点或电位法、永停法指示终点优点：硫酸铈作滴定剂具有高的氧化电位，且为一价还原；不存在对环取代基的副反应，专属性高。本法既可用于原料，亦可用于片剂的测定（四）比色法1.钯离子比色法，对照法定量处测定在～红色络合物吩噻嗪类药物Anm500Pdmaxmax0.1pH22反应在pH2±0.1的缓冲液中进行优点：钯离子比色法可选择性地用于未被氧化的吩噻嗪类药物的测定2.铁盐比色法第三节苯并二氮杂卓类药物的分析1234567+环庚三烯草卓NN12345671,4-二氮杂卓NN12345671,4-苯并二氮杂卓89NNNCH3OCl氯氮卓HNNClH3CO地西泮NNO2NOH硝西泮一、结构与性质1.苯并二氮杂卓母核弱碱性，UV2.结构中的环一般比较稳定，但在酸性溶液中可水解，形成相应的二苯甲酮衍生物。甘氨酸地西泮、OHH2XXC氧瓶燃烧法破坏3.含卤素二、鉴别试验（一）化学反应1.沉淀反应橙红色氯氮卓、地西泮HCl4KBiI氯氮卓ChP（2000）【鉴别】（2）取本品约10mg，加盐酸溶液（9→1000）10ml溶解后，加碘化铋钾试液1滴，即生成橙红色沉淀。2.水解后重氮化—偶合反应氯氮卓、艾司唑仑、奥沙西泮氯氮卓ChP（2000）[鉴别]（1）取本品约10mg，加盐酸溶液（1→2）15ml，缓缓煮沸15分钟，放冷，溶液显芳香第一胺类的鉴别反应（附录Ⅲ）。3.水解后呈茚三酮反应地西泮4.硫酸—荧光反应地西泮ChP（2000）[鉴别]（1）取本品约10mg，加硫酸3ml，振摇使溶解，在紫外灯（365nm）下检视，显黄绿色荧光。氯氮卓——黄色艾司唑仑——亮绿色硝西泮——淡蓝色5.分解产物的反应地西泮ChP（2000）[鉴别]（2）取本品20mg，用氧瓶燃烧法（附录ⅦC）进行有机破坏，以5%氢氧化钠溶液5ml为吸收液，燃烧完全后，用稀硝酸酸化，并缓缓煮沸2分钟，溶液显氯化物的鉴别反应（附录Ⅲ）。（二）UV和IR（三）TLC三、特殊杂质的检查（一）有关物质的检查1.地西泮中有关物质