第6章消化道感染的细菌

63第6章消化道感染的细菌学习要点一、大肠埃希菌1.生物学性状革兰阴性杆菌；分解乳糖产酸，可与不分解乳糖的志贺菌、沙门菌等相区别；主要抗原有O、H和K三种，是血清分型的基础。2.致病性(1)肠道外感染：引起化脓性炎症，以泌尿系统感染为主。(2)肠道感染：某些血清型引起腹泻1）肠产毒型大肠埃希菌（ETEC）：主要感染婴幼儿和旅游者，致病物质主要为肠毒素和定植因子，肠毒素包括不耐热肠毒素(LT)和耐热肠毒素(ST)二种，LT的作用与霍乱毒素(CT)相似，并与其有交叉抗原，LT能激活肠粘膜上皮细胞的腺苷环化酶，使细胞内的cAMP升高，ST激活肠粘膜上皮细胞的鸟苷环化酶，使细胞内的cGMP升高，细胞内的cAMP或cGMP升高致肠液大量分泌于肠腔引起腹泻。2）肠致病型大肠埃希菌（EPEC）：致病机制为粘附和破坏小肠粘膜上皮细胞，细菌粘附于十二指肠、空肠和回肠上段定植增殖，致粘膜刷状缘破坏、微绒毛萎缩、上皮细胞排列及功能受损，造成严重腹泻3）肠出血型大肠埃希菌（EHEC）：主要的血清型为O157:H7，毒力因子是菌毛和Vero毒素，Vero毒素能使肠上皮细胞死亡脱落、肠道出血、肾远曲小管和集合管变性以及血小板聚集、损伤内皮细胞，可引起出血性肠炎、溶血性尿毒综合症、血栓性血小板性紫癜。4）肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）：发病机制与痢疾相似，侵袭和破坏结肠粘膜上皮，细菌侵入结肠粘膜上皮细胞，在细胞内生长繁殖导致炎症和溃疡、腹泻。5）肠集聚型大肠杆菌（EAggEC）：发病机制为聚集性粘附和产生毒性物质，该菌是儿童持续性腹泻的病因之一3.微生物学检查法病人细菌学检查64肠道外感染采取中段尿、血液、脓液、脑脊液；肠道内感染取粪便进行分离培养和鉴定。泌尿道感染患者的标本还应做细菌总数测定，每毫升尿细菌超过105个有诊断意义卫生细菌学检查以“大肠菌群值和大肠菌群指数”及“细菌总数测定”作为饮水、食品等粪便污染的指标；卫生部规定的饮水卫生标准是大肠菌群值不小于333ml，大肠菌群指数不得超过3。细菌总数＜100CFU/ml。4.防治原则重要的预防法是：防止粪便污染，切断粪-口传播途径二、志贺菌属1.生物学性状革兰阴性杆菌，分解葡萄糖产酸不产气，除宋内志贺菌的个别菌株外，均不分解乳糖，有O、K两种抗原，O抗原是分类的依据，根据O抗原差异将志贺菌分为痢疾志贺菌、福氏志贺菌、鲍氏志贺菌和宋内志贺菌4个群。2.致病性与免疫性致病物质(1)侵袭力：是志贺菌的主要致病因素(2)毒素：①内毒素：各群志贺菌都能形成强烈的内毒素，导致内毒素血症、黏液脓血便、腹痛、腹泻、里急后重。②外毒素：多由痢疾志贺菌Ⅰ型和Ⅱ型菌产生，称志贺毒素。具有神经毒性、细胞毒性和肠毒性3种生物活性。所致疾病引起人类细菌性痢疾，传染源是患者和带菌者，无动物宿主，经粪—口途径传播，细菌性痢疾可分为急性和慢性两类，急性中毒性痢疾多见于小儿，以全身中毒症状为主，死亡率高。带菌者有3种类型：恢复期带菌者，慢性带菌者和健康带菌者。免疫性病后可获得一定免疫力，免疫期短，不稳固，各菌型之间无交叉免疫，抗感染免疫主要依赖消化道局部分泌型IgA(SIgA)。653.微生物学检查法取病人或带菌者的粪便，采其脓血或粘液部分进行细菌分离培养和鉴定。血清学鉴定可确定菌群和菌型，必要时通过senery试验测试细菌毒力，可用免疫学和分子生物学方法进行快速诊断。4.防治原则对患者进行及时诊断、隔离和彻底治疗外，切断传播途径：加强水源和粪便的管理及食品卫生监督，减毒链霉素依赖株(Sd)活疫苗和重组活疫苗对人群有一定保护作用，该属细菌易产生多重耐药，治疗前应先进行药物敏感性测试三、沙门菌属1.生物学性状(1)革兰阴性杆菌(2)沙门菌属不分解乳糖，各菌生化反应较有规律，对鉴定细菌有重要意义(3)抗原构造复杂，有菌体抗原（O）、鞭毛抗原（H）、表面抗原（Vi）及菌毛等重要抗原1）O抗原：是LPS中的多糖部分，刺激机体产生IgM，O抗原有许多组成成分，含有相同抗原组分的细菌归为一组，分成A～Z、O51～O63、O65~O6742个组。2）H抗原：为蛋白质，刺激机体产生IgG型抗体，根据H特异相抗原不同，可进一步将组内细菌分成种或型。3）Vi抗原：为聚—N—乙酰D—半乳糖胺醛酸，与细菌毒力有关。(4)抵抗力：对胆盐、煌绿等染料耐受力较其他肠道菌强在水中能存活2~3周，粪便中可维持活性1~2个月，在冰冻土壤中可过冬2.致病性与免疫性致病物质(1)侵袭力：借助Vi、O抗原的保护和抗吞噬作用，及染色体上侵袭素基因inv的介导，侵入小肠壁粘膜(2)毒素1)内毒素：引起全身症状和局部炎症反应2)肠毒素：性质与大肠埃希菌肠毒素相似66所致疾病(1)肠热症：即伤寒、副伤寒病原体：为伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌。侵入机体菌量多（106~1011）或胃酸不足时致病，典型的临床表现为：持续高热，但相对缓脉，肝脾肿大、全身中毒症状显著、皮肤出现玫瑰疹，外周血白细胞明显下降。细菌可从粪便和尿液排除痊愈后可继续排菌数周～数月成为恢复期带菌者，少数可成为慢性带菌者。(2)急性胃肠炎或食物中毒：最常见的沙门菌病病原体为：鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌等摄入菌量超过107时致病，引起恶心、呕吐、腹痛、腹泻（水样泻或粘液浓性腹泻）、发热等症状(3)沙门菌败血症：多见于儿童和免疫力低下的成人病菌以猪霍乱沙门菌、丙型副伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌等常见免疫性肠热症病后能获得牢固免疫力，很少发生再感染，主要与特异性细胞免疫的防御机制有关3.微生物学检查法细菌学分离与鉴定标本的采取视疾病而定，肠热症时按不同病程采取不同标本进行分离培养和鉴定，病程的第1~2周取外周血或骨髓，第2~3周取粪便和尿液，全病程可取骨髓。标本接种于选择鉴别培养基（SS琼脂平板）分离培养进一步做生化反应、血清学鉴定（用已知抗血清作玻片凝集）。血清学诊断常用肥达反应，用已知的伤寒沙门菌O、H抗原、甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌的H抗原与病人血清做定量凝集试验，肠热症发病第二周血清中开始出现抗体，于恢复期达高峰，一般间隔5~7d重复采血检测，凝集价随病程的延长有4倍以上增高时，方有诊断价值。67判定肥达反应结果时注意：正常凝集价，病程，O与H抗体的诊断意义。沙门菌食物中毒的病程短，一般不进行血清学诊断。带菌者检查最可靠方法是分离培养病原菌，但检出率不高，可用血清学方法先检测可疑者血清Vi抗体进行筛选，若效价超过1:10，即为阳性，Vi抗体阳性者可取粪便或尿液反复进行细菌分离培养，以确定是否为带菌者。4.防治原则控制传染源，切断传播途径，提高机体免疫力。预防肠热症主要是进行疫苗预防接种，国际上公认的新一代疫苗是来源于伤寒Ty2菌株的Vi荚膜多糖疫苗。四、霍乱弧菌1.生物学性状（1）形态结构：革兰染色阴性，弯曲呈弧型或逗点状，菌体极端有一根单鞭毛，运动活泼。（2）培养特性：于pH8.0~9.0碱性环境中生长迅速，常用pH8.4的碱性蛋白胨作为选择培养基。（3）抗原结构：有H抗原和O抗原，根据O抗原不同，分为155个血清群，引起霍乱的是O1群和O139群，其他血清群可引起人类胃肠炎等疾病，O1血清群的霍乱弧菌包括两个生物型，即古典生物型与Eltor生物型。根据O抗原的成分不同，O1群霍乱弧菌又进一步分为3个血清型。2.致病性与免疫性致病物质(1)鞭毛和菌毛等：细菌依靠活泼的鞭毛运动，穿过肠粘膜表面的粘液层；借菌毛粘附于肠壁与上皮细胞刷状缘的微绒毛上(2)肠毒素：O1群和O139群霍乱弧菌产生的肠毒素也称霍乱毒素，是目前已知的致泻毒素中毒性最强的毒素，是不耐热聚合蛋白，MW约84000dal由1个A亚单位和5个B亚单位以共价键组成，B亚单位与小肠粘膜上皮细胞神经节苷脂结合，A1多肽穿过细胞，刺激细胞内的腺苷酸环化酶活化，使ATP转化为cAMP，该毒素引起严重腹泻、呕吐，电解质大量丧失。所致疾病68引起的烈性传染病——霍乱，传染源为患者及带菌者，108~1010个细菌通过污染的水或食物经口摄入便可造成感染，临床病人可呈现严重腹泻、呕吐、脱水、外周循环衰竭、电解质紊乱和代谢性酸中毒。可因肾功能衰竭、休克死亡。免疫性霍乱弧菌感染后可获得牢固免疫，再感染者少见，以特异性体液免疫为主，抗O1群霍乱弧菌的免疫力对O139群细菌无交叉保护作用3.微生物学检查法(1)标本应采取病人“米泔水”样粪便或呕吐物(2)直接涂片染色和悬滴检查可作出初步诊断(3)标本先接种碱性蛋白胨水，增菌后作分离培养和鉴定(4)必要时还需进行肠毒素检查以获得准确诊断(5)快速诊断可用荧光菌球法或SPA协同凝集试验4.防治原则(1)及时发现病人，尽早隔离治疗(2)彻底消毒患者及带菌者的粪便及呕吐物(3)特异性预防用O1群霍乱弧菌死疫苗皮下注射，但保护力不强，且持续时间短(4)用抗生素治疗并及时补充液体和电解质五、副溶血性弧菌(1)呈弧状、杆状、丝状等多形性。(2)嗜盐，在培养基中加3.5%NaCl生长最为适宜，无盐则不能生长。(3)致病物质：具有肠道毒性的溶血素、粘附素和粘液素酶，细菌的致病力与其溶血能力呈平行关系。(4)主要引起食物中毒，该菌存在于近海的海水、海底沉积物和鱼类、贝壳等海产品中，是我国大陆沿海地区食物中毒中最常见的病原菌，食物中毒多发生于夏秋季节，系经烹饪不当的海产品或盐腌制品所传播。六、幽门螺杆菌1.生物学性状革兰阴性，弯曲成弧型、S形或海鸥状，有鞭毛，运动活泼69微需氧，营养要求高，培养时需动物血清或血液不分解糖类，过氧化氢酶和氧化酶阳性，尿素酶丰富，故快速尿素酶试验是鉴定该菌的主要依据之一2.致病性与免疫性(1)致病物质和致病机制目前尚不清楚，可能是多种因素如细菌的鞭毛、粘附素、尿素酶、蛋白酶、空泡毒素、内毒素等协同作用的结果(2)幽门螺杆菌感染与人类B型胃炎、消化性溃疡和胃癌等关系密切(3)幽门螺杆菌的感染可刺激机体产生IgM、IgG和IgA型抗体，但是否对机体有保护作用尚不清楚3.微生物学检查法(1)标本最好采取胃粘膜活体组织(2)快速诊断：标本直接涂片染色镜检、快速尿素酶活性检测(3)分离培养可将活体组织磨碎后接种于鉴别培养基，经2~7d培养后再进行鉴定4.防治原则目前尚无有效的预防措施，治疗多采用以胶体次枸橼酸铋或抑酸剂为基础，再加两种抗生素的三联疗法。复习题一、名词解释1.大肠菌群指数2.不耐热肠毒素（LT）3.志贺毒素4.肥达反应5.Vi抗原二、选择题A1型题1.我国大陆沿海地区引起食物中毒最常见的病原菌是：A.副溶血性弧菌B.金黄色葡萄球菌C.产气荚膜梭菌70D.蜡样芽胞杆菌E.霍乱弧菌2.霍乱弧菌初次分离用的培养基是A.血清肉汤B.肉浸液C.碱性蛋白胨水D.庖肉培养基E.葡萄糖蛋白胨水3.快速脲酶分解实验可用于下列细菌的快速诊断的是A.幽门螺杆菌B.致病性大肠杆菌C.霍乱弧菌D.痢疾杆菌E.解脲脲原体4.机体抗伤寒杆菌主要依赖A.抗生素B.体液免疫C.细胞免疫D.补体E.中性粒细胞5.卫生细菌学中作为饮水、食品等粪便污染指标的细菌是A.痢疾杆菌B.霍乱弧菌C.蜡样芽胞杆菌D.大肠埃希菌E.伤寒杆菌6.确定伤寒杆菌带菌者的指标是A.血清Vi抗体效价超过1:10B.粪便或尿液细菌分离培养阳性C.O与H抗体的凝集价均超过正常值D.O抗体的凝集价超过正常值E.H抗体的凝集价超过正常值7.可引起菌血症的肠道菌是A.痢疾志贺菌B.霍乱弧菌C.肠炎沙门菌D.大肠埃希菌E.伤寒杆菌8.肠热症病程的第1周，最易检出伤寒沙门菌的标本是A.尿B.血C.粪便D.胆汁E.呕吐物9.下列细菌不．产生外毒素的是A.伤寒沙门菌B.霍乱弧菌C.幽门螺杆菌D.痢疾志贺菌E.肠产毒型大肠埃希菌10.鉴别肠道致病菌与非致病菌常用的生化反应是A.吲哚实验B.菊糖发酵实验C.葡萄糖发酵实验D.乳糖发酵实验E.甘露醇发酵实验B1型题（供1～3题备选答案）A.不耐热肠毒素B.Vero毒素71C.志贺毒素D.空泡毒素E.霍乱毒素1.肠产毒型大肠埃希菌的致病物质是2.肠出血型大肠埃希菌的致病物质是3.致泻毒素中毒性最强的毒