第14章血沉分析仪

1第十四章自动血沉分析仪首页基本要求重点难点讲授学时内容提要1基本要求1.1了解1.1.1血沉自动分析仪的常见故障及维护1.1.2血沉分析方法的进展1.2熟悉1.2.1自动血沉分析仪主要由哪些部分构成1.2.2自动血沉分析仪的性能指标1.2.3血沉自动分析仪的安装注意事项1.2.4血沉自动分析仪的维护和保养1.2.5血沉自动分析仪的参考值1.3掌握1.3.1血沉自动分析仪的原理1.3.2血沉自动分析仪的读数原理1.3.3血沉自动分析仪的质控规定2重点难点2.1重点2.1.1血沉自动分析仪的原理2.1.2血沉自动分析仪的读数原理2.2.3血沉自动分析仪的质控规定2.2难点2.2.1血沉自动分析仪的原理3讲授学时2建议2学时~4学时4内容提要4.1自动血沉分析仪的工作原理和方法4.1.1自动血沉分析仪的工作原理所有自动血沉测定仪的原理和方法都是建立在魏氏法的基础上，利用光学阻挡原理进行测量；也有采用红外线障碍法或激光光源扫描微量全血进行检测。红细胞的沉降过程是一个包含力学、流变学及细胞间相互作用的复杂过程。影响红细胞沉降的因素很多，主要包括红细胞的形态和大小、红细胞的变形性、红细胞的聚集性、红细胞间的相互作用，血细胞比容，血浆介质和上升流动，沉降管的倾斜度等。对于红细胞沉降这一非线性过程而言，自动血沉分析仪可完整记录红细胞沉降的全过程。红细胞沉降曲线方程：)/(150ttHH其中，H是血浆层的极限高度（t），50t是血浆高度为2/H的时刻，为常数（1）。沉降速度则表示为dtdHV/，求极限便可得红细胞的最大沉降速度。通过对红细胞沉降实践过程的记录，以及采用非线性最小二乘拟合方法，可得红细胞沉降曲线（H-T曲线）。红细胞的最大沉降速度maxv与红细胞在聚集期形成的聚集体的大小、血浆蛋白含量、血浆粘度及红细胞的形态和变形性等因素有关。红细胞沉降从聚集期过渡到恒定沉降的时间maxt后，与红细胞聚集达到动态平衡，此后聚集体将不再继续生长。50t反映了红细胞沉降从恒定沉降期向充塞期过渡的特征，它与红细胞在这两个时期中的动力学变化有关。H表示在充塞期（t）红细胞所能达到的最大沉降距离，它与充塞期红细胞间相互作用有关。是与红细胞沉降曲线有关的常数。设沉降前的高度为0h，沉降后的红细胞层高度1h，两者相减即可得到血浆层的高度h。血液沉降前，管内血液均呈红色，即可吸收红外线；沉降后，血液分为上下两层，上层为透明血浆，可透过红外线，下层为红细胞等物质呈褐红色，可吸收红外线。测量时可利用两层间的色彩差异利用红外线扫描方法找到分界面，从而测得0h和1h，通过计算可得到红细胞沉降率h。4.1.2自动血沉仪的读数原理目前有两大类型：一类是血沉管垂直固定在自动血沉仪的孔板上，光电二极管沿机械导轨滑动，对血沉管进行扫描。如果红外线不能到达接收器，说明红外线被高密度的红细胞阻挡，一旦红外线能穿过血沉管到达接收器，接收器的信号就引导计算机开始计算到达移动终端时所需的距离。首先记录血沉观中的血液在时间零计时的高度，此后每隔一定时间扫描一次，记录每次扫描时红细胞和血浆接触的位置，3并以计算机自动计算转换成魏氏法观测值报告结果。另一类是固定光电二极管，血沉管随转盘转动。垂直置管式与魏氏法相同。18度倾斜置管方式是将放入血沉管中的血样被仪器充分混匀后，试管相对于Y轴倾斜18度，促使红细胞沉降加速，静置一段时间，光电传感器自动读出红细胞沉降值，先纪录结果后转换成魏氏法观测值。4.2血沉自动分析仪的结构、性能指标及维护4.2.1仪器的基本结构血沉自动分析仪由光源、沉降管、检测系统、数据处理系统四个部分组成。光源：采用红外光源；血沉管：为硬质玻璃管或塑料管；检测系统：一般仪器采用光电阵列二极管，其作用是进行光电转换，把光信号转变成电信号；数据处理系统：由放大电路、数据采集和打印机组成。其作用是将检测系统的检测信号，经计算机的处理，驱动智能化打印机打印出结果。4.2.2仪器的性能指标测量时间：18～60分钟；测量精度：≤1毫米；定时精度：≤1分钟；样品用量：1毫升左右；同时测量样品数：10～40个；电源：AC220V±20V，50Hz。标本采集：真空管或普通管。4.2.3仪器的软件设计血沉分析仪软件部分设计了数据采集、数据分析、数据库、打印等模块。数据采集模块在开始测量时启动电机扫描血沉管，当到达血沉分界面时，将此时从光码盘的脉冲数存入相应的数组变量；数据分析模块将脉冲数转换为位移量，得出1h，再根据血液原始高度0h计算出红细胞沉降率。数据库模块体现了其设计的优越性，既为其他血流变分析软件提供了接口，增强了软件的扩展性能；还为用户查询提供了方便。4.2.4仪器使用和维护4.2.4.1仪器的安装一般自动血沉分析仪的安装都比较简单，严格按照说明书安装即可。安装前应仔细阅读仪器操作手册。仪器的安装条件如下：1．应安装在清洁、通风处（室内温度应在15℃～32℃，相对湿度应≤85％），避免潮湿。2．应安装在稳定的水平实验台上（最好是水泥台）。禁止安装在高温、阳光直接照射处；应远离高频、电磁波干扰源。4.2.4.2仪器的维护保养1．使用过程中，要避免强光的照射，否则会引起检测器疲劳，计算机采不到数据；2．使用前要按程序清洗仪器，同时要定期彻底清洗并进行定期校检；43．仪器要保持水平状态。4.3血沉自动分析仪的临床应用红细胞沉降率ESR是某些疾病常用的参考指标，全自动血沉分析仪可同时测定数十个标本，整个测量过程完全自动，其结果与国际血液学标准化委员会推荐的魏氏法测定结果相吻合，因此得到广泛的应用。血沉分析仪实现了红细胞沉降的动态结果分析，对监测血沉全过程、研究红细胞沉降的机理等提供了新的数据。红细胞沉降过程表现为悬浮、聚集、快速、缓慢沉降四个阶段。ＭarioPlecani,MD等报道使用全自动血沉分析仪测定297例健康成人的参考值，见表14-2。健康成人的mV、mT、STBS测定结果见表14-3。血沉的速度与时间曲线图在各疾病中的分布见表14-4。4.4自动血沉分析仪的质量控制血沉分析仪结果的准确性受到许多因素的影响，包括分析前、分析中、分析后三个环节。为了提高实验室测定结果的可比性和实施有效的质量控制，必须在全球实施统一方法和标准化工作。由国际血液学标准化委员会所属的血液流变学专家组，对血沉常规方法有如下规定。4.4.1标本的采集与抗凝4.4.1.1静脉采血要求在30秒钟内完成采血且不能淤血和溶血。在吸进血沉管之前标本一定要充分混匀，混匀后立即吸进血沉管内测定。如果用放大镜检查发现血液有一点凝固迹象，就不能使用，否则会导致结果偏低且重复性差。4.4.1.2血沉管其内径不得小于2.55mm，管全长孔径的一致性应保持在±5%以内，要正圆，长短轴之差不超过0.1mm。不可粘附血细胞，也不得释放影响血沉的物质。测定温度应为：18℃～25℃±1℃。4.4.1.3抗凝剂由于自动血沉仪大量使用EDTA抗凝血液，为了便于同时采血，使用EDTA抗凝血可以不用枸橼酸钠液稀释，直接用于血沉测定，但被测标本的血细胞压积（hematocrit，Hct）要调至0.33±0.03，因为Hct过高，重复性差。另外，要将其换算成普通血沉报告结果，校正公式为：ESR（mm/h）=[不稀释血沉mm×0.86]-12。标本也可先用EDTA抗凝，然后按4:1加枸橼酸钠液稀释，枸橼酸三钠液（2分子结晶水）的浓度为0.10～0.136mmol/L。109mmol/L的枸橼酸钠（含2分子结晶水）抗凝，血液与抗凝剂比为4:1。4.4.2质控物的选择质控物的质量是质控的关键，标准化方法要求使用新鲜人血，血沉值为15mm～105mm，按参考方法进行校验，95%的差值应在5mm以下。一般采取低值、中值、高值三个新鲜血样，要求这三个血样的ESR值应为1mm～99mm之间。5