电子显微镜技术在白血病诊断的应用

电子显微镜技术在白血病诊断中的应用小组成员李耀扬刘玉龙王妍马骁王贺指导教师吴岩教授2007级电子显微镜技术硕士研究生课程概述电子显微镜比光学显微镜有更高的分辨率和放大倍数，其分辨率可为光镜的100倍，可以观察到细胞当中的超微结构。分类透射电镜：主要用于观察细胞内部的扫描电镜：可直接观察标本表面的三超微结构。维形态。概述白血病（leukemia）是一类造血干细胞的克隆性恶性疾病。其克隆中的白血病细胞失去进一步分化成熟的能力而停滞在细胞发育的不同阶段。在骨髓和其他造血组织中白血病细胞大量增生积聚，并浸润其他器官和组织，而正常造血受抑制。我国白血病发病率为2.76/10万。恶性肿瘤死亡率中，白血病居第6位（男性）和第8位（女性），在儿童及35岁以下成人中则居第一位。将电子显微镜技术应用到白血病的诊断当中，可以提高白血病的临床诊断率，为早期、明确诊断白血病提供了可能，从而指导白血病的化疗，对及早发现、诊治白血病起了很大的作用。意义一、毛细胞白血病（HCL）HCL白血病细胞根据其超微结构,特别是细胞表面突起的不同,分为型,HCLI型和HCLII型。应用HCLI型（经典型）：白血病细胞呈典型的毛细胞白血病细胞超微结构特征：细胞表面有较多毛发状突起,细长且有分支,有的可在细胞表面形成环状或半环状；核圆或不规则,异染色质较多,靠核膜分布,核仁不多见；胞浆量中等,线粒体和内质网多见,高尔基氏器较发达,游离核糖体丰富,有的细胞内尚可见少量小的电子致密颗粒,胞膜下多见胞饮泡。应用图1型毛细胞白血病细胞细胞表面有许多较长的毛发样突起注：图片取自姜晓星电子显微镜技术在血液系统疾病诊断中的作用.内科理论与实践，2008，3（2）：141HCLII型(变异型):电镜下细胞表面有许多较短的毛发样突起,突起较I型者短,但排列较密集,毛发状突起的直径与I型相似,粗细较均一,有的突起可见分支,一般不形成环状结构；核多为圆形或卵圆形,核仁多见；胞浆量有差异，部分细胞胞浆量中等,胞浆内线粒体、内质网及高尔基器较多见,游离核糖体丰富,有的可见糖原颗粒聚集分布；部分细胞具有高的核质比,核大而圆,以常染色质为主,核仁明显,胞浆量少,胞浆内细胞器相对少见,有极少量小的电子致密颗粒。应用图2型毛细胞白血病细胞细胞表面有许多较短的毛发样突起注：图片取自姜晓星电子显微镜技术在血液系统疾病诊断中的作用.内科理论与实践，2008，3（2）:141二、急性巨核系白血病（M7）大部分M7患者未成熟巨核细胞处于I期分化阶段,多数细胞直径在20μm以内,有微管、膜性囊腔及微小致密颗粒,缺乏成熟阶段应有的A2颗粒、分界膜系统、胞膜下环状微丝微管以及无结构胞浆区,显示M7以幼稚和低分化细胞为主的特点。应用A：胞浆内的管道结构，分界膜呈囊腔样结构B：典型的a颗粒C:过氧化物酶（＋）：定位于核膜上注:图片取自姜晓星电子显微镜技术在血液系统疾病诊断中的作用.内科理论与实践，2008，3（2）：141三、急性淋巴细胞白血病原淋细胞呈圆形，直径１２－１８μｍ，表面可见少量短小微绒毛，核圆或不规则，常有明显的凹陷，可见１－２个较大核仁。核内异染色质聚集常多于其他类型白血病，且常见核泡、核袋等。胞质内游离核糖体较丰富，线粒体数量较少，高尔基复合体不发达，粗面内质网散在。幼淋细胞较原淋细胞小，直径１０－１８μｍ。核较大，核仁明显，胞质少，并有少量圆形致密颗粒聚集。胞嘧啶单核苷酸酶定位于颗粒。应用四、急性红白血病白血病性原红细胞、幼红细胞及白血病性原粒细胞、早幼粒细胞同时增生。胞核大而圆，核仁大而清晰，常具多个核仁。常染色质丰富，有些红细胞核周聚集少量异染色质。胞质内除游离核糖体、线粒体外，较为突出的特征是在细胞周边常见较多的圆形小泡结构，线粒体电子密度较高，有时呈畸形。应用五、恶性淋巴瘤淋巴瘤是一类分类极为复杂的疾病。对于一些病例，常规病理检查无法确诊，而淋巴瘤细胞在电镜下有其特征性表现，为疾病鉴别诊断提供了重要依据。应用1.霍奇金淋巴瘤：细胞呈圆形或椭圆形，体积大，可达20－50μm，双核或多核，有巨大核仁位于核中心，核内常染色质占优势。胞质丰富，含发达的高尔基复合体、大量线粒体及少量粗面内质网，有时可见细丝束、溶酶体、脂滴和糖原。单核R-S细胞也称上皮样细胞，细胞体比典型的R-S细胞小，单核，核形不则,核内常染色质为主，少量异染色质沿核周分布，核仁大，位于核中心；胞质多，细胞器丰富。应用2.免疫母细胞性淋巴瘤细胞体积大，呈圆形或椭圆形。胞核呈圆形或不规整，异染色质少，沿核膜分布，可见核仁。Ｂ淋巴细胞性免疫母细胞胞质内粗面内质网丰富，有的扩张呈囊性，高尔基复合体发育良好。Ｔ淋巴细胞性免疫母细胞胞质内细胞器较少，核形更不规则。应用此外，我们还可以采用电镜酶细胞化学技术和电镜免疫细胞化学技术对各型白血病进行诊断。这些技术可以让我们通过检测白血病中特异的标志物而达到诊断白血病的目的，更大的提高了白血病诊断的精确度，也是我们研究工作中的一个重点。应用总之，随着对血液系统疾病认识的加深，对疾病诊断及治疗的要求也进一步提高。电镜在血液系统疾病诊断和研究中将会有更广泛的应用前景。展望