温度激活剂和抑制剂对酶活力的影响

实验二温度、激活剂和抑制剂对酶活力的影响一、实验目的1、了解温度对酶活性的影响，学会检测酶最适温度的方法。2、了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。3、学习检测激活剂和抑制剂影响酶促反应速度的原理和方法。二、实验原理（一）温度对酶活性的影响一方面是温度升高,酶促反应速度加快。另一方面,温度升高,也将导致酶活性降低甚至丧失。因此大多数酶都有一个最适温度(即酶促反应速度最快时的环境温度)酶的最适温度不是一个常数，它与作用时间长短有关。人唾液中淀粉酶为α-为淀粉酶，在唾液腺细胞内合成。在唾液淀粉酶的作用下，淀粉被水解，经过一系列被称为糊精的中间产物，最后生成麦芽糖。不同阶段的糊精遇碘有不同颜色反应，分别呈现为：蓝色紫色褐色红色棕黄色(遇碘不显色)。（二）激活剂和抑制剂对酶反应的影响酶活力常受到有些物质的影响,有些物质能使酶活力增强,称为酶的激活剂；另一些物质则能使酶活力降低，称为酶的抑制剂。剂i]三、试剂和器材1、实验器材(1)恒温水浴锅(2)试管(3)烧杯(4)量筒(5)玻璃棒(6)白磁板(7)铁三角架(8)酒精灯(10)试管夹(11)试管架(12)秒表2、实验试剂(1)0.5%淀粉的0.3%氯化钠溶液(2)KI-I2(3)1%NaCl(4)1%CuSO4(5)1%Na2SO4(6)0.1%淀粉溶液(7)唾液淀粉酶四、操作步骤（一）温度对酶活性的影响取6支试管，编号，按下表的顺序准确地加入各种试剂，记录结果。管号1230.5%淀粉的0.3%氯化钠（mL）2.02.02.0温度（℃）冰浴3770各保温10min管号1E2E3E唾液淀粉酶（mL）1.01.01.0温度（℃）冰浴3770各保温10min1和1E，2和2E…各对应管混和并摇匀后,置各温度保温5-10min*KI-I2液（滴）111记录观察结果*(二)激活剂和抑制剂对酶活性的影响试剂管号12341%NaCl（mL）1.0———1%CuSO4（mL）—1.0——蒸馏水（mL）———1.01%Na2SO4（mL）——1.0—0.1%淀粉（mL）1.51.51.51.5唾液淀粉酶1.01.01.01.0摇匀，置37℃水浴中5~15分钟，取出冷却。KI-I2（滴）1-2滴1-2滴1-2滴1-2滴记录结果五、注意事项1、本实验中的保温时间是5min-10min，因不同的唾液淀粉酶的活性是不同的。2、淀粉溶液与酶液务必充分混匀，反应后才能得到理想的颜色梯度变化结果。思考题1、高温导致酶活性丧失的分子机理是什么？如何在酶的分离纯化中克服这种影响？2、哪些因素可以导致酶活性的降低？剂i]