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1植物检疫1、植物检疫:一个国家或地区政府为防止检疫性有害生物的进入或传播而由官方采取的所有措施。2、有害生物:指危害或可能危害动植物及其产品的任何有生命的有机体。有害生物分为限定的有害生物和非限定的有害生物两类。3、限定的有害生物:在一个国家或地区未发生,或虽有发生但分布未广,且官方正在积极控制中的潜在经济重要性的有害生物,包括检疫性有害生物和限定的非检疫性有害生物。4、检疫性有害生物:指对某一地区具有潜在经济重要性,但在该地区尚未存在或虽存在但分布未广并由官方控制的有害生物。5、限定的非检疫性有害生物:一种存在于种植材料上并将对其造成不可接受的损害的非检疫性有害生物,因而对进口国来说是被限制的有害生物。6、非限定的有害生物:已经广泛发生或普遍分布的有害生物,有些是日常生活中常见的,它们在植物检疫中没有特殊的重要性。7、世界各国的植物检疫分为以下几种类型:环境优越型(实行的是全面检疫)、发达国家大陆型(表现内松外紧)、发展中国家大陆型(实施重点检疫)、工商城市型(要求比较宽松)1、《实施卫生和植物卫生措施协议》(SPS协议):SPS规定了各缔约国的基本权力与相应的义务,明确缔约国有权采取保护人类、动植物生命及健康所必须的措施,但这些措施不能对相同条件的国家之间构成不公正的歧视,或变相限制或消极影响国际贸易。2、我国颁布的植物检疫法规有《中华人民共和国进出境动植物检疫法》、《植物检疫条例》等。国际性法规与公约有《国际植物保护公约》(IPPC)、《实施卫生和植物卫生措施协议》(SPS协议)、《国际植物检疫措施标准》(ISPM)。1、有害生物:任何对植物或植物产品构成伤害的植物、动物或病原微生物。2、非疫区:指一个由科学证据证实没有发生某种有害生物,且这种情况由官方维持的地区。3、疫区:指由官方划定的发现有检疫性有害生物存在并正由官方控制中的地区。4、有害生物风险分析准则:有害生物风险分析起点;有害生物风险评估;有害生物风险治理。1、植物检疫六个程序:检疫许可、检疫申报、现场检验与实验室检测、检疫处理、检疫出证以及检疫监管2、植物检疫的方式:产地检疫、现场检疫、实验室检疫、隔离检疫、国际邮包检疫3、检疫许可:是指在输入某些检疫物或引进禁止进境物时,输入单位向植物检疫机关提前提出申请,检疫机关经过审查做出是否批准引进的法定程序。检疫许可分为特许审批和一般审批两种类型。特许审批所针对的是禁止进境物;一般审批针对的是植物种子、苗木、其他繁殖材料以及水果、粮食等。4、检疫申报:是有关检疫物进出境或过境时由货主或其代理人向植物检疫机关及时声明并申请检疫的法律程序。5、检验:检疫员在车站、码头、机场等现场对货物所做的直观检查,称为检验26、检测:检疫员对货物除做肉眼鉴定以外还用其他方法进行检查或在取样后到实验室检验的,称为检测7、现场检验:是由官方在现场环境中对植物、植物产品或其他限定的商品进行的直观检查,以确认是否存在有害生物或确认是否符合植物检疫法规要求的法定程序。8、现场检查的主要方法:肉眼检查、过筛检查、X光机检查和检疫犬检查9、实验室检测:由检验人员在实验室中借助一定的仪器设备对样品进行深入检查的植物检疫法定程序,以确认有害生物是否存在或鉴别有害生物的种类。10、实验室检测的常用方法:比重检测、染色检测、洗涤检测、保湿萌芽检测、分离培养与接种检测、噬菌体检测、显微镜检测、血清学检测、鉴别寄主检测、分子鉴定和计算机辅助鉴定等。11、线虫常用的分离方法:贝尔曼漏斗法、浅盘法、过筛分离法、漂浮法12、产地检疫:是在植物或产品出境或调运前,输出方的植物检疫人员在其生长期间到原产地进行检验、检测的过程。13、预检:是在植物或植物产品入境前,输入方的植物检疫人员在植物生长期间或加工包装时到产地或加工包装场所进行检验、检测的过程。14、产地检疫和预检意义:①提高检疫结果的准确性;②简化现场检验的手续,加快商品流通;③避免货主的经济损失15、隔离检疫:是将拟引进的植物种子、苗木和其他繁殖材料,在植物检疫机关指定的场所内,在隔离条件下进行试种,在其生长期间进行检验和处理的检疫过程。16、检疫处理:消毒处理、除害处理、隔离试种17、检疫程序调入地检疫机构调出地检疫机构第七章危险性植物病原生物真菌类检疫方法:产地检疫、土壤检验、直接检查、病原菌形态观察、染色检验一、小麦矮化腥黑穗病菌---外检、内检1、危害情况:小麦矮化腥黑穗病是一种系统性侵染病害,感病后易减产,同时影响面粉质量。3、生物学特性:冬孢子存活在土壤中和种子上有极强的抗逆性。5、越冬场所:以冬孢子或菌瘿在土壤中、种子表面或粪肥中。6、传播途径:远距离传播:种子调运、进口粮、麸皮和被孢子污染的包装材料、容器和运输工具等;近距离传播:病区土壤带菌是主要的侵染源,在收获或储运期间,菌瘿或冬孢子常撒落田间和被风吹到附近田块。粪肥和秸秆也传病7、检测方法1)、直接检查:将平均样品倒入无菌白瓷盘内,仔细检查有无菌瘿或碎块,样品过筛,挑取可疑病组织1.取得检疫要求书3.货到7天内报检调入单位和个人2.调运前5天申请检疫证书调出单位和个人3在显微镜下检查鉴定。同时对筛上挑出物及筛下物进行检查,将发现的可疑病组织及其他可疑的感染黑穗病的禾本科作物及杂草种子进行镜检鉴定。2)洗涤检验:抽取50g样品加100ml蒸馏水,再加1-2滴吐温-20洗涤,振荡5min,倒入灭菌的离心管内,离心3min,沉淀物制片观察。3)冬孢子形态鉴定:根据孢子大小、网目、网脊高度、胶鞘厚度进行鉴定。4)、冬孢子自发荧光显微检验:从菌瘿取冬孢子于载波片上,防尘处干燥,加1滴无荧光载浮剂,落射荧光显微镜,统计冬孢子自发荧光率(≥80%为小麦矮化腥黑穗病菌,≤30%不是小麦矮化腥黑穗病菌)5)、冬孢子萌发试验:待检验的病粒孢子粉或孢子悬浮液接种于3%的水琼脂培养基上,在5℃有光条件下,矮化腥黑穗病菌21d后开始萌发,17℃不能萌发,普通腥黑穗病一周后开始萌发,网腥黑穗病在17℃无光照条件下,7-10d萌发。6)、PCR技术检验二、小麦印度腥黑穗病菌---外检1、危害情况:小麦印度腥黑穗病属局部侵染性病害,病害流行年份减产,但对小麦的品质影响甚大。若3%小麦子粒被侵染,加工后的面粉有腥臭味,面粉就不能食用。病粒生活力和发芽率下降,并且产生畸形幼芽。5、越冬场所:病菌以冬孢子或菌瘿在土壤中、种子表面或粪肥中越冬。6、传播途径:远距离传播:冬孢子随种子的调运传播;近距离传播:病区主要靠带菌土壤传播,粪便和秸秆也能传病。随气流传播到麦穗上进行侵染。7、检测方法1)、直接镜检法:50克麦种加100ml水,加1滴吐温20,震荡洗涤30分钟,洗涤液通过上铺滤纸的布氏漏斗,用抽气泵抽滤,1%-3%的KOH湿润滤纸,在25-50倍解剖镜下镜检。2)、氢氧化钠鉴定法:用0.2%NaOH溶液浸种24h(20℃)。病粒发病部位乌黑发亮,健康部位灰黄色。3)洗涤检验、冬孢子形态鉴定:同小麦矮化腥黑穗病菌。4)过滤抽提---离心富集技术:分级过筛-α-淀粉酶酶解-蔗糖密度梯度离心对小麦中的孢子富集,进行检测。5)、PCR技术检验:利用特异性引物三、烟草霜霉病菌---外检3、病原菌生物学特性:孢子囊萌发需饱和的大气湿度;卵孢子越冬后不萌发,第二年越冬后有少量萌发,第3~4年越冬后萌发增多。卵孢子抗逆力强。5、越冬场所:病菌主要以菌丝体在田间或温室的病株、自生烟苗、野生烟草上越冬。6、传播途径:近距离传播:自然条件下主要是气流传播扩散;远距离传播:此病菌的孢子囊和卵孢子可随烟苗、商品烟叶或烟叶制品运输到异地、异国。7、检验与检测:1)、干烟叶或烟制品检验:①症状检查:用肉眼逐片检查。②检查孢囊梗和孢子囊:用体视显微镜直接观4察孢囊梗和孢子囊,对可疑病叶,将其剪碎进行洗涤、离心,镜检沉淀物中有无病菌的孢囊梗或孢子囊。③检查卵孢子:取老病斑周围的组织,剪成0.5mm的小片,置小烧杯中,加适量10%氢氧化钾煮沸,使叶组织完全透明,用棉蓝染色,镜检卵孢子。将病斑或烟丝捣碎或研成粉末,用筛筛去掉残渣,取筛下物,用乳酚油透明后制片,镜检有无卵孢子。2)种子检查:①洗涤检查:取种子样品,加水振荡,离心洗涤液,向最终沉淀内加数滴席尔氏液,调节至1ml,浸泡4小时后镜检。②种植检验:种子表面消毒后播于2%琼脂培养基,或营养液栽培,在20℃和正常光照下培养,出苗2周后,观察烟苗有无症状,如有霉层,可镜检确定。3)种苗检查:观察叶片上有无霜霉病的症状。症状不明显的可疑烟苗,取叶片放在铺有3层湿滤纸的培养皿中,保湿24小时后检查有无霉层产生。四、玉米霜霉病菌---外检、内检引起玉米霜霉病的病原菌:玉米指霜霉(外)、高粱指霜霉(内)、菲律宾指霜霉(内)、甘蔗指霜霉(内)3、越冬场所:玉米指霜霉菌:以菌丝体在玉米植株、甜根子草、羽高粱上越冬;高粱指霜霉菌:卵孢子在种子、土壤、病残体中或孢子囊在寄主植株上越冬;菲律宾指霜霉菌:以菌丝体在甜根子草、甘蔗、拟高粱上越冬;甘蔗指霜霉菌:以菌丝体在甘蔗上越冬。4、传播途径:玉米指霜霉:远距离-带菌种子随玉米传播,近距离-孢子囊经气流传播;高粱指霜霉:远距离-带颖壳的高粱种子传播,玉米种子不能传病,近距离-发病玉米和其他寄主产生的孢子囊经风雨传播;菲律宾指霜霉:远距离-甘蔗插条传播,玉米种子不能传病,近距离-孢子囊经风雨传播;甘蔗指霜霉:染病的甘蔗插条传播,玉米种子不能传病。5、检验与检测:1)、产地检疫:幼苗或成株症状、病原菌形态。2)、室内检查:①吸水纸培养法——霜霉病菌繁殖体。②镜检卵孢子——玉米种子中夹杂的高粱和甘蔗病残组织等保湿7d(埋于灭菌土),组织腐烂,制片观察。③种子部分透明染色检验:检查种子的种皮和种胚等部位是否带有菌丝体。④洗涤检验——检验种子外部是否附着卵孢子。⑤生长检验——甘蔗插条或带卵孢子的带颖壳的高粱种子播于灭菌土壤中,观察幼苗的系统症状,直至出苗5周以后。五、大豆疫霉病菌---外检、内检1、生物学特性:卵孢子的抗逆性很强,可在土壤中存活多年。5、越冬:卵孢子在土壤和病残体中。6传播:远距离-带菌的种子,混杂在种子中的病残体,病土粒;近距离-病田的卵孢子萌发释放的游动孢子。7、检验方法:1)种子检验——观察卵孢子的有无。将豆粒放在10%KOH水溶液中浸泡,将种皮取下制片镜检。2)病残5体检验:将大豆根、茎、叶、荚、病部用乳酚油透明后,镜检卵孢子。3)生长检验4)、土壤检验—土壤叶碟诱集法5)、血清学检验—ELISA法检测,单克隆抗体。6)、分子生物学检验—DNA探针、PCR。六、马铃薯癌肿病菌---外检、内检3、生物学特征:休眠孢子囊需要相当长的休眠期。休眠孢子囊的抗逆性很强,通过牲畜消化道仍可存活。休眠孢子囊在土壤中可长期存活。5、越冬:休眠孢子囊在病薯和病土或混入粪肥中越冬,是重要的初侵染源。6、传播:远距离传播-引种和调运(带菌种薯和薯块上残余病土);近距离传播-田间靠雨水、水流、农事操作和工具传带的病土。7、检验方法:产地检疫、土壤检验、直接检查、病原菌形态观察、染色检验七、苜蓿黄萎病菌---外检、内检黑白轮枝菌4、越冬:菌丝体和休眠结构在植株病残体、土壤和种子上。5、传播:远距离传播-种子带菌及种子间混杂的病残体,带菌的苜蓿干制品(苜蓿粉)也可作远距离传播;近距离传播-典型的土传病害,农业机械工具和人畜携带病田土壤和病株残体是最有效传播途径。邻近健株根系与病株根系或带菌土壤直接接触后可被病菌侵染。苜蓿黄萎病菌还可由风、灌溉水和昆虫传播。6、检验方法:产地检验、种子带菌检验、吸水纸检验7、大丽轮枝菌与黑白轮枝菌的区别:1)、黑白轮枝菌不产生黑色微菌核,大丽轮枝菌形成黑色微菌核;2)、黑白轮枝菌老熟分生孢子梗基部呈褐色,大丽轮枝菌分生孢子梗基部透明;3)、黑白轮枝菌分生孢子梗长,分生孢子大,大丽轮枝菌分生孢子梗短,分生孢子小;4)、黑白轮枝菌在30℃条件下不能生长,大丽轮枝菌生长良好;5)、黑白轮枝菌在pH3.6时勉强生长,大丽轮枝菌在pH3.6时生长良好。八、榆树枯萎病菌---外检1、越冬场所:菌丝体、子囊孢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